反复输血对红细胞免疫功能的影响

2018-04-12王艳春

中国医药科学 2018年5期

王艳春

深圳市龙岗中心医院输血科，广东深圳 518172

输血是临床常用的治疗手段，近年来由于临床输血的普及和临床输血量的增加，输血对机体产生的影响也日益受到重视，血液具有复杂的生理功能，包括氧的传送、凝血以及免疫等[1-2]，近年来的研究显示[3-4]，红细胞不仅具有携氧等生理功能，而且具有免疫功能，红细胞免疫功能参与机体整体免疫网络的够成，如对外来抗原的吸附，参与对肿瘤细胞的识别等。输血对红细胞免疫功能的影响目前尚少有报道，本文就临床反复输血患者红细胞免疫功能的变化进行研究，为临床输血安全提供进一步的资料。

1　资料与方法

1.1　一般资料

选择2016年2月～2017年6月我院收治的需输血治疗的患者126例，其中男74例，女52例，年龄29～63岁，平均（47.2±8.5）岁，其中消化道出血36例，慢性肾病贫血52例，功能性子宫出血29例，其它原因贫血9例，患者入选标准：（1）急性失血Hb＜90g/L或慢性失血Hb＜70g/L；（2）原发病诊断明确，预期输血能够取得可靠效果；（3）Hb降低未达到输血标准，但有较为炎症的失血或贫血相关症状；（4）患者对研究内容知情同意。排除标准：（1）免疫性溶血性贫血患者；（2）合并免疫系统疾病，可能影响红细胞免疫功能者；（3）长期应用免疫抑制剂或糖皮质激素者；（4）合并恶性肿瘤，可能导致红细胞免疫异常者。患者入选后按输血次数分为对照组及研究组，其中对照组63例，男38例，女25例，年龄29～61岁，平均（47.1±8.7）岁，其中消化道出血19例，慢性肾病贫血24例，功能性子宫出血15例，其它原因贫血5例，研究组63例，其中男36例，女27例，其中消化道出血17例，慢性肾病贫血28例，功能性子宫出血14例，其它原因贫血4例，两组患者年龄、性别、基础疾病等一般资料差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2　输血方法

患者入组后均积极治疗原发病，输血指征明确，输注红细胞悬液，输血前常规交叉配血，检测不规则抗体，输血前0.9%NaCL冲洗管道，红细胞出库后4h内输注完毕，输注过程中严密观察不良反应发生情况，输注红细胞后血袋送输血科保留24h备查，输血前及输血后24h行静脉血血细胞分析检查，评价输血效果。

1.3　观察指标

两组患者输血前及输血后48h采集静脉血检测红细胞粘附免疫功能（RBC.C3bR、RFER、RBC.IC）和红细胞肿瘤免疫功能（DTER、NTER、ATER和ETER），检测方法采用郭氏法[5-6]。RBC.C3bR检测：酵母试剂（上海通蔚生物科技有限公司）用Hanks液配成含1×108酵母细胞/mL的悬液，然后加等量新鲜豚鼠血清，37℃水浴20min，加入C3b抗原致敏酵母菌株，静脉血分离红细胞，采用Hanks液洗涤3次，稀释成125×107细胞/mL的悬液C3b致敏酵母悬液和红细胞悬液各50μL，混匀，于37℃水浴40min后取出，涂片干燥，甲醇固定，姬姆萨氏染液染色，高倍镜检查，计算花环率；RBC.IC检测过程同上，检测过程不采用C3b抗原至敏酵母菌，RFER检测分别采用灭活血清及正常血清检测花环率，按下列公式计算，RFER=灭活血清花环率-正常血清花环率/灭活血清花环率×100%，DTER、NTER、ATER及ETER检测过程分别采用冻干补体致敏和未致敏的肝癌细胞株，按上述步骤进行检测。

1.4　统计学方法

采用统计学软件SPSS11.5版对数据进行统计分析，计量资料采用（x±s）表示，采用t检验，计数资料采用百分数（%）表示，采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1　两组输血前后红细胞粘附免疫功能变化

两组患者输血前RBC.C3bR、RFER、RBC.IC比较差异无统计学意义（P＞0.05），输血后两组患者RBC.C3bR、RFER均较输血前降低（P＜0.05），RBC.IC较输血前增高（P＜0.05），输血后研究组RBC.C3bR、RFER低于对照组（P＜0.05），RBC.IC高于对照组（P＜0.05）。见表1。

表1　两组患者输血前后红细胞粘附免疫功能比较（x ± s，%）

2.2　两组患者输血前后肿瘤免疫功能变化

两组患者输血前 DTER、NTER、ATER和ETER比较差异无统计学意义（P＞0.05），输血后两组DTER、NTER、ATER和ETER均较输血前降低（P＜0.05），输血后研究组DTER、NTER、ATER和ETER低于对照组（P＜0.05）。见表2。

3　讨论

近年来的研究显示[7-8]，红细胞具有免疫功能，参与机体整体免疫网络的够成，红细胞表面粘附具有多种抗体，能够识别、粘附抗原，清除抗原抗体免疫复合物，红细胞表面的主要抗体包括Ⅰ型补体受体、NK细胞增强因子、阿片类受体以及红细胞趋化因子受体等，能够通过与抗原以及其他细胞的受体发挥免疫作用，如参与对肿瘤细胞的免疫清除，参与对炎症因子的免疫作用发挥抗感染作用等。

红细胞的免疫功能受多种因素的影响，如自身的免疫功能状态、红细胞的功能状态、衰老因素、遗传因素以及其它疾病的影响等[9]。有研究显示[10-11]，输血能够引起自身免疫功能的变化，如T淋巴细胞免疫功能的抑制，免疫球蛋白表达的下降以及红细胞免疫功能状态的改变等。在对本组资料的研究发现，两组患者输血后红细胞粘附免疫功能以及肿瘤免疫功能均较输血前不同程度下降，其中RBC.C3bR及RFER下降，RBC.IC升高，而研究组的变化要较对照组更为明显，输血后研究组的RBC.C3bR及RFER要低于对照组，RBC.IC高于对照组，而输血后的DTER、NTER、ATER和ETER比要低于对照组，提示反复输血对受血者的红细胞免疫功能具有明显的影响，RBC.C3bR、RFER及RBC.IC能够反应红细胞的粘附免疫功能，RBC.C3bR、RFER能够反应红细胞膜表面粘附受体的情况，RBC.C3bR、RFER降低说明红细胞表面受体减少，说明红细胞自身的免疫功能下降，RBC.IC能够反应外周抗原免疫复合的增加情况，其表达上调说明循环免疫复合物增多，RBC.C3bR、RFER及RBC.IC的变化说明红细胞的免疫功能降低与继发性的因素有关[12-13]，其可能与反复输血导致的异体血中抗原成分形成循环免疫复合物，占据红细胞表面的受体，导致活性受体的相对量下降，导致其粘附功能降低，粘附免疫功能受损[14]。DTER、NTER、ATER和ETER是一组反应与红细胞肿瘤免疫有关的指标，包括对体内对肿瘤表面抗原的识别以及NK细胞杀伤肿瘤的趋化等作用的相关受体，DTER、NTER、ATER和ETER的下降能够反应红细胞肿瘤免疫作用受到抑制[15-16]，其可能同红细胞自身免疫功能的改变、外周循环免疫复合物的竞争性抑制以及血制品中某些理化成分的改变有关[17]。