新生儿CMV感染情况及其与连接蛋白Cx26基因突变的相关性

熊雨美，杨好妹，刘光明，李佩青

(广州市妇女儿童医疗中心急诊科，广东 广州 510120)

人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)是人类疱疹病毒组中最大的一种病毒，临床上亦被称为涎病毒，由于其进入人体细胞后很容易使细胞增大，因此称为巨细胞病毒。有研究表明，听力损害与连接蛋白Cx26基因突变密切相关[1]。为此，本研究将2014年5月至2017年2月广州市妇女儿童医疗中心收治的104例新生儿作为研究对象，探讨其巨细胞病毒(cytomegalovirus，CMV)感染情况及与连接蛋白Cx26基因突变的相关性。

1对象与方法

1.1研究对象

将2014年5月至2017年2月广州市妇女儿童医疗中心收治的104例新生儿作为研究对象，其中42例CMV-DNA阴性新生儿作为甲组，62例CMV-DNA阳性新生儿作为乙组。甲组中男23例，女19例；乙组中男32例，女30例。两组性别的比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经本院医学伦理委员会批准。

1.2纳入与排除标准

所有入选新生儿均出生胎龄大于37周且无严重并发症；所有新生儿家属均知情同意。排除标准：胎龄低于37周的新生儿；合并有重大脏器并发症的新生儿；需采取重症监护治疗的新生儿；因各种原因无法配合完成本次研究的新生儿。

1.3研究方法

采集两组新生儿脐血，根据反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)法对两组新生儿的Cx26基因mRNA表达情况进行检测，同时分析两组新生儿的血生化情况，即血清总胆红素(total bilirubin，TBil)、天门冬氨酸转氨酶(aspartate amino￣transferase，AST)、谷氨酸转氨酶(alanine transaminase，ALT)等。将先天性CMV感染的新生儿划分为肝功能异常型和肝功能正常型两种。追踪两组新生儿的听力情况，分析两组新生儿的听力检测结果、Cx26基因变异情况和CMV感染类型的相关性。

1.4听力随访

对于早产儿，在其出生3～14天内采用耳声发射仪进行听力初步筛查，而足月新生儿则在其出生2～3天内采用耳声发射仪进行听力初步筛查；对于没有通过初步筛查的新生儿，在出生42天时采用耳声发射仪进行复筛，如果仍然没有通过，则在出生3个月时进行脑干诱发电位检查，将双耳听阈大于25dBnHL的新生儿判断为感音神经性聋(sensorineural hearing loss，SNHL)[2]。根据结果对非先天性和先天性CMV感染新生儿的听力变化进行分析，同时将新生儿的听力变化情况与其Cx26基因突变情况进行相关性分析。

1.5统计学方法

2结果

2.1比较各组新生儿的生化指标

甲组血生化指标检测均无异常，乙组27例新生儿的AST、ALT水平显著高于正常值，且TBil水平也显著升高，因此将该27例新生儿划分为肝功能异常型的先天性CMV感染，而另外35例新生儿则划分为肝功能正常型的先天性CMV感染。乙组的TBil、AST、ALT值都高于甲组，差异均有统计学意义(t值分别为9.57、15.73、12.04，均P<0.05)，见表1。

表1 两组新生儿的生化指标比较Table 1 Comparison of biochemical indexes

2.2 Cx26基因突变结果

甲组新生儿中有2例出现235delC突变，有1例出现多态性改变343A-G1。乙组新生儿中肝功能正常型有21例出现235delC突变，有1例出现多态性改变79G-A；肝功能异常型中有18例出现235delC突变。

2.3听力随访结果

甲组新生儿中有36例通过听力初筛，其余6例均通过听力复筛。乙组肝功能正常型新生儿中，有24例通过听力初筛，有4例通过听力复筛，其余7例新生儿中有3例经脑干诱发电位检查判断为异常；乙组肝功能异常型新生儿中有8例通过听力初筛，有6例通过听力复筛，其余13例新生儿中有8例经脑干诱发电位检查判断为异常，见表2。

2.4 Cx26基因突变与CMV感染和感音神经性聋的关系

在控制感音神经性聋变量时进行偏相关分析，Cx26基因突变与CMV感染的相关系数r=0.571，P<0.05；在控制CMV感染变量时进行偏相关分析，感音神经性聋与Cx26基因突变之间的相关系数r=0.209，P<0.05；在控制Cx26基因突变变量时进行偏相关分析，感音神经性聋与CMV感染之间的相关系数r=0.381，P<0.05，见表3。

表2 听力随访结果[n(%)]Table 2 Results of hearing followed up[n(%)]

3讨论

3.1 CMV对新生儿的危害

CMV在我国流行较为广泛，其中成人感染率高达95%，一般情况下大多数正常人会有CMV潜伏，其潜伏部位主要是白细胞、睾丸、子宫颈、肾脏、乳腺、唾液腺及其他腺体之中[3]。该病毒可致畸，作用机制主要是染色体分裂异常、基因整合、同源基因表达受影响以及胎盘和绒毛损害等[4]。但是对于大对数免疫正常的个体而言均表现为无症状感染，在部分胎儿、婴幼儿及免疫抑制个体中感染则会出现明显的病症。临床上人类CMV感染可以根据感染的时间分为先天性感染和后天性感染两种类型，前者是由于孕妇接触病毒，使得病毒进入胎盘致胎儿感染，另外部分隐性感染的孕妇，其病毒在妊娠后期被激活，经产道或泌尿道排出使得分娩时新生儿在经过产道时被感染。据报道，先天性感染CMV的新生儿绝大多数会有如感音神经性聋等较为明显的后遗症，其发生时间一般在新生儿出生后至数年之间，并且大多数都会呈现为渐进性恶化[5]。无症状感染的新生儿虽然具有较好的预后，但是也会存在单侧或双侧的进行性神经性耳聋。据有关资料显示，先天性CMV感染肝功能异常型新生儿有35%～65%的几率会出现听力障碍，而肝功能正常的新生儿出现听力障碍的几率为7%～15%，并且前者出现听力障碍的时间更早，亦较为严重[6]

3.2 Cx26基因突变是导致患儿出现感音神经性聋的根本原因

本次研究中，甲组新生儿的血生化指标检测均无异常，乙组新生儿中则有27例新生儿的AST和ALT的水平显著高于正常值，且TBil水平也显著升高。因此将该27例新生儿划分为肝功能异常型的先天性CMV感染，而另外35例新生儿则划分为肝功能正常型的先天性CMV感染。甲组新生儿中有2例新生儿出现235delC突变，有1例出现多态性改变343A-G1；乙组新生儿中肝功能正常型有21例出现235delC突变，有1例出现多态性改变79G-A；肝功能异常型中有18例出现235delC突变。本次研究中Cx26基因突变主要表现为235delC突变，与既往调查资料相符[7]，而多态性基因改变由于不是致病性突变，因此不需要分析该基因突变与听力损害的关系。缝隙连接是完成细胞间通讯的结构基础，而Cx26基因则参与该连接中离子通道的形成，因此Cx26基因突变会破坏该蛋白质的正常结构，上皮细胞间连接通道完整性破坏及通道开关异常，使细胞间信息传递受阻或紊乱，而细胞内外的离子浓度是毛细胞能量转换的基础，从而形成异常缝隙连接使得钾离子回流受阻，最终导致患儿出现感音神经性聋[8]。

3.3 Cx26基因、CMV和感音神经性聋三者间的关系

在本次研究中，甲组新生儿中有36例通过听力初筛，其余6例均通过听力复筛；乙组肝功能正常型新生儿中，有24例通过听力初筛，有4例通过听力复筛，剩下7例新生儿中有3例经脑干诱发电位检查判断为异常；乙组肝功能异常型新生儿中有8例通过听力初筛，有6例通过听力复筛，剩下13例新生儿中有8例经脑干诱发电位检查判断为异常。在控制感音神经性聋变量时进行偏相关分析，Cx26基因突变与CMV感染的相关系数r=0.571，P<0.05，提示Cx26基因突变与CMV感染有正相关关系。在控制CMV感染变量时进行偏相关分析，感音神经性聋与Cx26基因突变的相关系数r=0.209，P<0.05，提示感音神经性聋与Cx26基因突变之间具有弱相关关系。在控制Cx26基因突变变量时进行偏相关分析，感音神经性聋与CMV感染之间的相关系数r=0.381，P<0.05，提示感音神经性聋与CMV感染之间具有正相关关系。

综上所述，新生儿CMV感染会使其Cx26基因发生突变，并且会进一步损害患儿的听力，其中肝功能异常型CMV感染会大大增加患儿出现感音性神经性聋和Cx26基因突变的概率。

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[3]曾小青,俞琤,朱建芳.胎儿巨细胞病毒感染的临床分析及超声诊断[J].中华医院感染学杂志,2014,24(14):3607-3609.

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[专业责任编辑：艾 婷]