氯化琥珀胆碱的分析检测综述

彭慧飞,姜兆林,陈 阳,李 栋,王庆威

(1.中国刑警学院 法化系, 辽宁 沈阳 110000;2.青藏铁路公安局刑事技术处 ，青海 西宁 810000))

氯化琥珀胆碱(又名司可林，SUX)属于国家管制的B级有机剧毒药品，主要作为兽药或者手术麻醉诱导剂，其注射液为无色或者无色透明状的粘液[1]，临床上主要用于气管插管和麻醉手术中使肌肉保持松弛状态，代谢速度快，半衰期为2～4min。[2]但近年不法分子使用氯化琥珀胆碱制作弩箭，用于盗窃家犬，也有致人死亡事故发生，对于这类案件的侦破，如何检测氯化琥珀胆碱固定犯罪证据，是此类案件侦破的关键[3]。

本文主要介绍已发表的生物体内的氯化琥珀胆碱的检测方法。目前，SUX 检测的方法主要有气相色谱-质谱联用法、高效液相色谱法、酶法电极法、离子交换分离结合电导检测的方法。

1 液相色谱质谱联

张云峰[4]等人精确称取氯化琥珀胆碱标准品加乙腈定容，配成1mg/mL的标准溶液，存放于-20℃冰箱中冷冻，取空白血0. 5mL，加入3mL氨水调节pH值=8，涡旋混匀。使用Oasis WCX柱(3cc/60mg)柱依次甲醇，氨水活化。取血液样品上清液过柱，用离子水、甲醇淋洗杂质;然后使用含甲酸∶水∶乙腈( 1∶50∶49，v /v) 溶液洗脱;洗脱液用0.22μm 微孔滤膜过滤，用液质联用检测。通过一系列的试验确定色谱最优条件为，色谱柱：以20mmol/L甲酸铵缓冲液( 含0.2% 甲酸) -乙腈作为流动相梯度洗脱，质谱为ESI，氯化琥珀胆碱的分子量为290，生成双电荷的母离子为145.1，选择145.1作为检测的定性离子对，其中115.6为定量离子。该方法也对空白干扰进行检测，排除了血液中内源性物质对氯化琥珀胆碱测定没有干扰。对液质联用的基质效应进行考察，发现数值分别符合规范。证明此方法不存在基质效应，可以用于检测血液中的氯化琥珀胆碱，但是有文献报道，对于死亡之后的生物体血液，胃内容物无法检测出琥珀氯化胆碱。

宣宇[5]等人同样采用OasisR WCX 固相萃取柱预处理检测样品，采用液质检测，均检出琥珀胆碱，获取良好的线性范围，检出限，精密度。宣宇等人同时论证了氯化琥珀胆碱的分解问题，将标准样品存放于塑料瓶，玻璃瓶内，10日内分别检测，证明在塑料容器中存储稳定，而在玻璃容器中其降解几乎达90%，证明玻璃种的SiO2容易引起对琥珀胆碱的吸附并使其降解，对于氯化琥珀胆碱赢存储于塑料瓶内,注意防止爱检测中因保管不当造成阴性结果。

周兴旺[6]等人采取市场上毒狗肉进行检测，用碳酸钠-碳酸氢钠缓冲盐震荡超声提取狗肉的氯化琥珀胆碱，过WCX固相萃取柱净化，液相色谱三重四极杆串联质谱定性、定量，证明线性关系，检出线均良好，适合快速检测市场上的毒狗肉。此外，周兴旺等人通过多组平行试验，证明对WCX固相萃取柱进行活化后，上标准溶液25ng时，最佳的洗脱液为甲酸-乙腈-水溶液(1∶8∶1)体积为2.0mL。

李 祎[7]等人采用高效液相色谱 -飞行时间质谱，采取2mL血液加乙腈沉淀蛋白质后进样分析，这样样品前处理简单，仅需5min。此方法同样获取了良好的实验结果。此方法具有良好的线性关系，检出限低，重现性好，准确可靠，也排除了生物质干扰，但是相对前处理复杂，操作复杂。

2 离子色谱法

陈祥国[8]等采取死者针孔部位的肌肉，加入高氯酸酸化和去离子水，超声5min后，过滤，取滤液检测，采用抑制性阳离子交换色谱法，手动进样:25μL ，采取的检测方式为:电导检测。在死者组织中检测出氯化琥珀胆碱。此方法能满足快速的定性需要。此方法具有分析时间快，灵敏度高，样品前处理相对简单等优点。但是需要考虑常见生物质中的阳离子，在检测之前需要配置标准溶液，对于个案，在检测前需要配制标准溶液和设置仪器条件，相对繁琐。

3 红外光谱的方法

乔文涛[9]等人取现场的飞镖内液体0.1 mL， 存放于蒸发皿中挥干，以KBr压片法制备试样，谱库检索比对发现与氯化琥珀胆碱相似度达96%以上，可以达到定性目的，此方法可以作为公安理化鉴定的有效辅助手段。据查此法源于药典对纯品的检测。

胡浩浪，裴茂清，施文兵[10]等人，利用傅立叶变换红外光谱对“飞镖”上的白色结晶性粉末进行红外光谱仪检测，与标准图谱对比，与氯化琥珀胆碱的匹配率达90.65%，确定成分为氯化琥珀胆碱。

此法只适用于对纯品的检验和定性，方法简单易，准确定性也相对高，效果较好，快速。可以作为定性或者良好的辅助手段，但是不适用于生物检材。

4 酶电极法

孙士青[11]等人通过设计一个精密的检测电极——胆碱氧化酶电极，以固定化胆碱氧化(EC5896)结合H2O2电极构成电流型酶电极生物传感分析仪,利用酶的专一性检测氯化琥珀胆碱。同时通过对比试验排除了乙二胺四乙酸二钠、D-葡萄糖等物质的干扰，最优响应pH值为7.8，故采取硼酸作为缓冲溶液，同时也论证了氯化钠与磷酸氢二钠对电极活性具有抑制作用。

此类方法利用专一性高、固定化酶的稳定性，灵敏性高，能满足注射液的快速定性、定量分析。但仅仅主要针对氯化琥珀胆碱注射剂进行分析，是否适用于生物检材，文中暂未论述，个人感觉此方法专业强，无法满足公安工作需要。

5 薄层色谱法

武向锋[12]等人用薄层色谱法检查注射液中的氯化琥珀胆碱含量。首先利用微晶纤维素和羧甲基纤维素钠制作薄层的玻板,晾干后,活化。选取正丁醇-水-无水甲酸(67∶25∶20)作为展开剂，喷以稀碘化铋钾试液，在105℃加热至斑点显色清晰。通过这种方法对琥珀胆碱注射液及其杂质、分解产物做了检测。通过点样显色确定氯化胆碱的最低检出量为0.2μg。

此方法需要制作薄层色谱，而且相关试剂种类繁杂，操作麻烦，而且仅针对注射剂这类比较纯的纯品做检测，不适用公安理化鉴定中。

总结，针对目前的公安机关的仪器条件，推荐使用液相色谱联用质谱检测生物检材中氯化琥珀胆碱，该方法成熟，报道文献数目最多，同时达到定性定量检测目的，不过诸如离子色谱检测，红外检测也都是良好的辅助检测手段。目前的报道主要针对肌肉组织检测，有文献报道，根据氯化琥珀胆碱的代谢情况，在生物尸体在心、肝、脾、肾和膈肌中均可检测到琥珀胆碱，其中肾脏中的药物浓度始终最高，对于肌肉组织未检出的情况下，可以对肾脏进行检测[13]。

[1] 冒理雄，叶光华，范琰琰，等.注射氯化琥珀胆碱致人死亡1 例[J].中国法医学杂志, 2014,29(03)： 272-273.

[2] 张延波，郑伟明，罗郁风，等.注射氯化琥珀胆碱杀人后自杀1 例[J].法医学杂志,2016,32(1):75-76.

[3] 方俊杰，秦 明，韩志杰，等.氯化琥珀胆碱弩箭杀人的法医学鉴定3例[J].刑事技术,2013(3):64-65.

[4] 张云峰，赵 森，王 炯，等.超高效液相色谱- 质谱法分析人全血中的氯化琥珀胆碱[J]．中国法医学杂志，2013(6):475-477．

[5] 宣 宇，孙 楠，傅得锋，等.液相色谱质谱联用检测血液和尿液中的琥珀胆碱及对标样的稳定性评价[J].分析试验室，2011,30(8):112-114.

[6] 周兴旺,康紹英,张继红,等.液相色谱串联质谱测定狗肉中的氯化琥珀胆碱[J].食品与机械，2015,31(6 ):102-104.

[7] 李 祎，舒 科，申秀华，等.高效液相色谱 -飞行时间质谱用于琥珀胆碱的快速检测[J].刑事技术,2016,41(2):120-122.

[8] 陈祥国，王淑真，吕纪忠，等.离子色谱法分析生物检材中的氯化琥珀胆碱[J]．刑事技术，2010(6):17-18．

[9] 乔文涛,黄彬晏,黄克建，等.离子色谱法结合红外光谱法检验氯化琥珀胆碱[J].化学分析计量,2014(S1):38-40.

[10] 胡浩浪,裴茂清,施文兵.氯化琥珀胆碱致人死亡一例[J].广东公安科技,2014(1):78-79.

[11] 孙士青，王 宁，葛淑兰.酶电极法测定氯化琥珀胆碱注射液氯化胆碱及氯化琥珀胆碱含量[J]．中国药学杂志，1997，32(10):609-611.

[12] 武向锋,靳守东,沈 娟,等.氯化琥珀胆碱注射液中有关物质的检查[J]. 解放军药学学报，2009,25(4):355-357.

[13] 竺 凌，闻 俊，周婷婷，等.琥珀胆碱的体内过程及其法医毒物分析研究[J].药物分析杂志，2015，35(5):849-855.