血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗体和抗MCV抗体对早期类风湿关节炎的诊断价值

姚文瑛,须 静

(上海交通大学医学院附属第九人民医院检验科,上海 201900)

类风湿关节炎(RA)是一种自身免疫性疾病，其临床特点表现为多关节肿胀、疼痛，以及滑膜炎，最终引起成骨和软骨的破坏，该病的致残率较高[1]。RA不仅对自身关节造成伤害，还能引发多种并发症，给患者的生活质量带来严重影响[2]。因此，早发现、早诊断和早治疗对于改善RA患者预后有重要意义。临床上诊断RA常采用血清类风湿性因子(RF)，但其敏感度和特异度均较低[3]。近年来，瓜氨酸相关自身抗体不断被用于RA的临床诊断，且效果显著[4]。本文为了探讨血清RF、Ⅰ型胶原吡啶交联终肽(ⅠCTP)、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)和抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(抗MCV抗体)对早期RA的诊断价值，选取2013年10月至2016年10月到本院就诊的早期RA患者60例作为研究对象，进行随机分组研究。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2013年10月至2016年10月到本院就诊的早期RA患者60例纳入早期RA组，所有患者均符合2009年美国风湿病学会及欧洲抗风湿病联盟制定的相关诊断和分期标准，均为早期RA[5]。其中男27例，女33例；年龄17～75岁，平均(46.87±5.9)岁。入组标准：(1)14个关节区至少存在3个以上关节炎；(2)腕、掌指或近端指间关节至少1处肿胀；(3)晨僵超过30 min；(4)RF阳性；(5)抗CCP抗体阳性；(6)病程3～12个月；(7)满足以上5项中的至少3项。排除标准：恶性肿瘤疾病；严重肝肾功能不全；内分泌疾病；严重感染；其他免疫性疾病。排除急性感染、肿瘤及其他自身免疫疾病。选取同期本院收治的非RA患者50例纳入非RA组，男23例，女27例；年龄16～73岁，平均 45.8±6.1)岁；骨关节炎20例，强直性脊柱炎13例，干燥综合征10例，系统性红斑狼疮(SLE)7例；所有患者均符合国内或国际相应自身免疫性疾病的诊断标准。选取同期到本院体检的健康体检者50例纳入健康对照组，其中男25例，女35例；年龄18～74岁，平均(47.1±6.8)岁。3组的一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具可比性。

1.2方法 所有对象均于清晨采集空腹静脉血4 mL，离心分离出血清，在-70 ℃保存待用。RF检测采用免疫散射比浊法检测，仪器为Beckman Coulter公司Immage免疫比浊分析仪，试剂为原装配套试剂。ⅠCTP检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA)，试剂盒来自由芬兰Orion Diagnostica公司，其线性范围为1～50 ng/L。抗CCP抗体和抗MCV抗体检测采用ELISA，试剂盒来自德国欧蒙公司，严格按照说明进行操作，检测设备为BioTek ELx800全自动酶标仪，在405 nm处读取A值，以标准品水平为横坐标，以A值为纵坐标，绘制标准曲线，根据绘制的曲线，求出待检样品抗CCP抗体和抗MCV抗体水平。以上试剂均配有标准品与质控品。各指标阳性值范围：抗MCV抗体≥20 U/mL；抗CCP抗体≥5 U/mL；RF≥20 U/mL；ⅠCTP>4.5 μg/L。

2 结 果

2.13组血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗体和抗MCV抗体水平比较 早期RA组的血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗体和抗MCV抗体水平显著高于非RA组和健康对照组(P<0.05)。见表1。

2.23组血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗体和抗MCV抗体阳性率比较 早期RA组的血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗体和抗MCV抗体阳性率显著高于非RA组和健康对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.34项指标检测对早期RA的诊断价值比较 抗MCV抗体单项检测的敏感度和特异度显著高于其他3项指标，RF、ⅠCTP、抗CCP抗体和抗MCV抗体4项指标联合检测的敏感度和特异度最高，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表1 3组血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗体和抗MCV抗体水平比较

注：与早期RA组比较，*P<0.05；与健康对照组比较，△P<0.05

表2 3组血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗体和抗MCV抗体阳性率比较[%(n/n)]

注：与早期RA组比较，*P<0.05；与健康对照组比较，△P<0.05

表3 4项指标检测对早期RA的诊断价值比较(%)

2.4各指标诊断早期RA的ROC曲线分析 血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗体和抗MCV抗体曲线下面积分别为0.719、0.754、0.807、0.857。见图1。

图1 各指标诊断早期RA的ROC曲线分析

2.5血清抗MCV抗体与RF、ⅠCTP、抗CCP抗体的相关性分析 经过Pearson相关分析，血清抗MCV抗体水平与RF、ⅠCTP、抗CCP抗体均呈正相关(r=0.376、0.509、0.613,P<0.05)，其中与抗CCP抗体的相关性最强。

3 讨 论

RA是一种自身免疫性疾病，其致残率较高，主要病理特点是关节滑膜炎增生及滑膜炎血管翳形成[6]。早期RA是可逆的，但病情发展2年后常会出现不可逆性损伤，因此RA的早期诊断对于有效、及时治疗RA非常重要。传统检测指标RF对RA的敏感度和特异度均较低。因此，针对早期RA患者寻找多项联合诊断指标已成为国内外临床学者的共同研究热点。

诊断RA的传统血清学指标包括RF、抗瓜氨酸蛋白抗体(ACPN)系列，如抗CCP抗体、抗角蛋白抗体(AKA)、抗Sa抗体等，抗MCV抗体属于抗Sa抗体之一。RF在其他自身免疫性疾病、肿瘤、慢性感染疾病等患者中检测结果也可表现出阳性[7]。AKA和抗核周因子抗体的特异度虽然较高，但敏感度较低，且其结果受个人主观判断的影响较大。而抗CCP抗体的敏感度公认较低，原因是每例患者血清中的抗体亚群不同，尚存在未知抗原决定簇，检测使用的合成肽无法全部涵盖，但其特异度较高。抗MCV抗体是近年来发现的ACPN之一，有研究表明其特异度较高。其可能的作用机制是当关节滑膜细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等发生共同作用，从而形成血管翳，同时释放多种炎症因子，进而刺激凋亡巨噬细胞分泌波形蛋白及突变型的波形蛋白，随后又在肽酰精氨酸亚氨酶作用下结构发生变异，导致抗原决定簇增加。在凋亡细胞抗突变型瓜氨酸波形蛋白不断聚集，且无法清除，进而诱导机体产生抗MCV抗体[8]。有许多文献均报道了血清RF、抗CCP抗体和抗MCV抗体三者联合检测对RA具有较高的诊断价值，许军华等[9]研究结果显示三者联合检测对RA的特异度可高达99.1%，但敏感度降至67.3%。本研究结果中三者的敏感度为71.3%，特异度为93.8%，与以上报道基本一致。本研究表明，早期RA组的血清RF、抗CCP抗体和抗MCV抗体的水平及阳性率均显著高于非RA组和健康对照组(P<0.05)。

RA患者的病理特征之一是伴有局部和全身性骨质的丢失。Ⅰ型胶原蛋白是人体内最丰富的胶原蛋白，主要存在于骨骼中，占有机成分90%以上。ⅠCTP具有完整免疫源性肽形式，是唯一从胶原纤维分子中释放进入血液的交联，可反映骨吸收情况，具有较高的敏感度和特异度。ⅠCTP以完整免疫源性肽形式进入血液，不会继续分解，且机体的饮食对其无影响[10]。ⅠCTP水平高低与破骨细胞活性密切相关，其变化可反映I型胶原的降解速率和骨基质的病理性破坏程度。有研究结果表明，ⅠCTP在早期RA与非RA组差异无统计学意义(P>0.05)[11]，但显著高于对照组(P<0.05)。本文研究结果与其一致。

董奕裕等[12]报道，ⅠCTP、基质金属蛋白酶-3、抗CCP抗体和RF检测对旱期RA的敏感度为43.8%，特异度为99.0%。而本文选取RF、ⅠCTP、抗CCP抗体和抗MCV抗体4项指标在保证特异度(96.9%)的基础上，显著提高敏感度(92.9%)。本研究结果还表明，血清抗MCV抗体水平与RF、ⅠCTP、抗CCP抗体均呈正相关关系。说明RF、ⅠCTP、抗CCP和抗MCV抗体4项指标互相补充，进而提高了诊断的敏感度和特异度。

综上所述，血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗体和抗MCV抗体联合检测有利于对RA进行的早期诊断，可作为临床辅助诊断方法。

[1]杨娟娟．血清 RF、抗CCP抗体和抗MCV抗体水平对早期类风湿关节炎的诊断价值[J]．中国实验诊断学，2015，19(11)：1847-1849．

[2]王文琴，翁巍，施金俏．抗CCP抗体、抗MCV 抗体与RF检测在早期类风湿关节炎诊断中的价值[J]．浙江实用医学，2013，18(6)：413-414．

[3]陈庆平，史雅峰，沈斯瑶，等．类风湿关节炎实验室诊断指标与DAS28评分相关性的研究[J]．陕西医学杂志，2012，41(11)：1469-1470．

[4]刘丹，曹团平，巩义，等．抗MCV抗体、抗CCP抗体及RF在类风湿性关节炎诊断中的应用研究[J]．陕西医学杂志，2013，42(7)：811-813．

[5]许福亮，伊鑫，张霞，等．抗环瓜氨酸肽抗体和抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体在早期类风湿关节炎患者血清中的表达及对其诊断价值[J]．中国免疫学杂志，2013，29(12)：1297-1298．

[6]王毅，白雪，张凯，等．抗瓜氨酸化蛋白/肽抗体及类风湿因子在类风湿关节炎早期诊断中的应用[J]．天津医药，2012，40(3)：212-214．

[7]AHMED A S,SAIF A G,SAFLA A M,et al.Evaluation of anti-mutated citrullinated vimentin antibodies,anti-cyclic citrullinated peptide antibodies and rheumatoid factor in Omani patients with rheumatoid arthritis[J].Int J Rheumatol,2012,10(8):1151-1156.

[8]贾淑芳，袁璐，周玲瑶，等．抗CCP抗体、抗MCV抗体和RF抗体联合检测与磁共振成像诊断类风湿关节炎相关性分析[J]．临床和实验医学杂志，2013，12(8)：584-585．

[9]许军华，刘树业．血清抗CCP抗体、抗MCV抗体与RF联合检测诊断类风湿关节炎的临床价值[J]．山东医药，2013，53(22)：38-40．

[10]朱国民．血清Ⅰ型胶原吡啶交联终肽检测在类风湿关节炎疗效评估中的意义[J]．检验医学，2013，28(12)：1142-1143．

[11]董奕裕，张新根，陆建良，等．早期类风湿性关节炎患者血清Ⅰ型胶原吡啶交联终肽、基质金属酶-3等指标的检测及意义[J]．检验医学，2013，28(5)：400-403．

[12]董奕裕，张新根，陆建良，等．ICTP、MMP-3、抗CCP抗体和RF检测对早期RA患者的诊断应用[J]．放射免疫学杂志，2013，26(3)：330-333．