免疫检验的影响因素分析及初步研究

张 琳

（抚顺市第五医院检验科，辽宁 抚顺 113003）

免疫功能异常，往往在一定程度上可以对疾病进行预警，由此可见，免疫检验的具有一定临床意义[1]。免疫检验涉及到的指标诸多，其中包含对外界条件相对敏感指标。免疫检验较为复杂。若未能处理好免疫检验影响因素，那么就会对检验结果造成影响，不利于疾病方案制定，甚至会对患者疾病转归造成影响。因此，认真依照标准环节实施检验，排除不利因素，提升检验人员职业素养，做好质量控制工作，有着相当重要的临床意义。结合实际情况，本文收集2015年12月至2016年12月免疫学检验资料为研究样本，全面分析影响检验的因素与质控方式，得出心得，现汇报如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：收集2015年12月至2016年12月免疫学检验资料为研究样本。检验项目具体为：HCV-Ab、HAV-Ab、TP-Ab、乙型肝炎五项以及HIV-Ab。数据涵盖具体检验结果和影响因素，样本总数为8800。

1.2 方法

1.2.1 检验前质控工作：确保质量为样本收集前提，在进行该项工作时，应全面考虑样本收集时间段，止血带使用情况和采血姿势。当对近期使用过激素类药物患者收集血清时，应当注意其体位改变情况和血液收集时间，避免出现激素峰值。在保存标本时，应当针对性保存，开始免疫检验之前，应对相关仪器进行校正与核对，另外也要定期对稀释棒、吸管以及反应板等定期检查，以降低实验误差。尽量避免使用不同种类试剂盒，以免影响检测数据。

1.2.2 检验中质控工作。室间质量评价法（EQA）：每3个月进行卫生部和上级检验中心下发标本，依照相关要求，实施检验工作。

室间质量评价法（IQC）：使用夹心法酶免试剂盒，对艾滋病病毒以及肝炎病毒实施检测。在进行试剂选择过程中，应当注意好有效期限和保存条件，尽量选择同一厂家试剂盒。在医院自行配置试剂时，应当依照相关标准进行。

1.2.3 检验后质控工作：所有待检验样本均应通过初检，检验者应对结果进一步审查[2]。若第一次结果为阳性或者疑似阳性，应安排复检，每次检测均应使用室内质量控制血清。值得说明的是，在一段时间内 ，实验室需保留结果，做好相关记录工作，方便日后查询。

1.3 统计学原理：本实验使用SPSS20.0专业统计学软件，使用线性回归分析法，探析自变量与因变量之间的关系，当P＜0.05时，证实组间数据存在显著差异。

2 结 果

经线性回归分析可知，实验室温度和湿度、检验者经验、试剂平衡时长、洗液更换详情、标本质量为影响检验质量的关键性因素，组间数据存在显著差异，P＜0.05。见表1。

3 讨 论

公允性强的免疫检验结果，可为疾病诊断和治疗提供理论依据。在实施免疫检验工作过程中，相关人员应当对检验结果影响因素给予必要重视。影响免疫检验因素主要分为内源性和外源性两种。详细为：

3.1 影响因素

3.1.1 内源性因素。常见内源性因素主要有：高水平非特异性免疫球蛋白、异嗜性抗体、部分自身抗体以及补体、类风湿因子等。通常来讲，当前临床使用的血清样本内均含有一定内源性干扰因素，导致结果可能为假阳性。为了全面预防ELISA法测定过程中受到类风湿因子影响，可通过稀释血清标本法，降低该物质浓度。由于类风湿因子浓度下降，可保证检验结果可靠性，另外，也可以通过改变酶标抗体法提升检验精准性，首先使用已发生变性的IgG封闭样本内类风湿因子，后对抗原加以测定，进而消除干扰[3]。

3.1.2 外源性因素。检验室温度湿度、洗液更换详情、试剂平衡时间、检验者素质以及样本质量等均为影响免疫结果精准性的外源性因素。

血液标本为免疫检验样本的主要形式，由于这种样本的特点，决定了其容易发生细菌污染以及凝固不全现象，另外，长时间放置样本，也会对检验结果造成影响。为了预防标本变性，应积极防止溶血，确保检验质量。使用质量不合格的采血器具和不良采血习惯，是导致这种现象发生的重要原因。由于血红蛋白内含有血红素基团，令其具备与过氧化物相似的性质，使用HRP视为标记酶的ELISA实验中，如果血红蛋白浓度较高，很容易在温育过程中发生吸附固定相情况，后与HRP发生显色反应，影响结果。

表1 线性回归结果情况

值得说明的是，在观察实验过程内，使用电化学发生免疫分析法对NSE加以检测，溶血对于该项检测结果影响最为显著。若溶血浓度达到1 g/L Hb时，NSE水平会显著提升，血红蛋白水平越高，结果受影响概率越大，在通常情况下，溶血度每上升1 g/L，NSE结果就会提升15～35 ng/mL。由此可见，若溶血度过大，最好重新采血，以免影响检测结果。

3.2 质量控制方式：结合本次实验相关研究结果，可以就下述几个方面，进行实验室质量控制，详细为：①将酶标板放到4 ℃或25 ℃的孵箱内，其显示时间差约10 min，若实验室湿度在40%以下，由于存在静电作用，塑料器皿附着带电微粒，令标本受到污染，因此应将湿度控制在30%～60%，温度保持在18～25 ℃。②标本应现用现处理，防止长时间搁置，细菌污染，反复冻融，溶血和凝固不全现象发生。③控制好试剂平衡时长，检验之前应保证实际温度和室温相一致，以30 min为宜。④选择质量可靠的采血器。⑤完成检验工作之后，应尽数倾出洗液，并使用蒸馏水洗净储液桶，及时更换新的洗液。⑥院方定期开办讲座，提升工作人员的个人素质，防止采血过程中发生不良现象。综上所述，影响免疫检验质量的因素诸多，实验室温度、检验者经验以及试剂平衡时间为最主要影响因素，在实施临床免疫检验过程中，检验者应依照相关标准进行，重视检验过程内的细节问题，这对于保证检验质量来讲，有着相当重要的现实意义。

[1] 谭遥,黄莉,刘凯,等.初探酶联免疫斑点法检测T细胞免疫功能质控要点[J].检验医学与临床,2014,11(23):3384-3385.

[2] 张婉婷,陈灵.影响酶增强免疫分析法测定丙戊酸血药浓度质量控制的因素分析[J].中国医院药学杂志,2014,34(9):762-764.

[3] 张巧娣,谢而付,付煜,等.胰岛素放射免疫检测技术外部影响因素分析[J].检验医学与临床,2016,13(16):2256-2257.