重组猪表皮生长因子对仔猪糖皮质激素水平的影响

(深圳市宝安区动物卫生监督所，广东 深圳 518101)

0 引言

为提高母猪的繁殖力和母猪的利用率，减少母猪传染疾病给仔猪，仔猪早期断奶技术（21～27d）现已被广泛应用。但断奶仔猪受到营养、环境、心理、猪群结构等方面的应激，造成早期断奶仔猪营养供给急剧降低，不仅影响到短期内日增重，而且会影响到断奶后2W的日增重，甚至平均推迟出栏达8d，给养猪业经济效益带来重大影响[1]。因此，如何减少早期断奶仔猪心理应激，促进仔猪的生长，成为早期断奶仔猪护理上的一个重大问题。

EGF在促进肠道粘膜上皮细胞的增殖和分化，减轻多种因素对胃肠道结构的损害，维持胃肠道结构和功能的完整等方面，均表现出良好的效果{2-3]。同时EGF可降低早期断奶仔猪的血浆中皮质醇的含量，促进GH含量和IGF-I含量的分泌和合成，这些均有利于仔猪的生长。

由早期断奶导致的应激会使仔猪的内分泌和免疫功能发生剧烈变化，对仔猪的生长极为不利。当皮质醇浓度升高时，表明机体受到的应激较大。过多的皮质醇可能会抑制生长激素和甲状腺素等的分泌，使断奶仔猪基础代谢降低，生长受阻。

胰岛素样生长因子（IGF）是生长激素（GH）诱导靶细胞产生的一种具有促生长作用的肽类物质，IGF家族由IGF-I和IGF-II 2个单链多肽类生长因子组成。IGF-I主要对出生后的动物生长发育有十分重要的作用。

生长激素（GH）是一种调节物质代谢的重要激素，它主要作用是促进肝脏释放葡萄糖，促进脂肪分解和氧化，促进蛋白质和核酸的合成，通过多种生理过程促进组织对循环系统中氨基酸的摄取和利用，使较多的养分用于组织中蛋白质的合成，减少脂肪合成，刺激颅骨、下颌骨增大及软骨肥大、骨骺软骨增生，刺激泌乳。生产实践中，GH对动物体的影响主要表现为能提高生长速度，促进肌肉生长，降低脂肪含量。

1 材料与方法

1.1 实验动物的选择及分组

表1 妈咪妙基础日粮营养配方

妈咪妙试验分组处理情况：

A:EGF活菌+上清液

B:EGF灭菌+上清液

C:M17培养液

其中活菌数为30亿/ml,上清液含游离的EGF4ug/ml。

添加量为全价日粮的1%。

1.2 试验日粮与饲养管理

按照猪场常规饲养，各栏自由釆食，少量多餐，充足饮水，每日进餐2次，给药是在进餐前，仔猪饥饿状态下，第1周给予实验计60ml，第2周改为80ml，每天收集撒料，回收余料。按照本场免疫程序规定操作。

1.3 记录及测定指标

1.3.1 生产性能指标

记录试验过程仔猪的釆食量、试验初始重、试验终末重、釆食量（每日釆食量及总釆食量）、增重（总增重及平均日增重）、料肉比。

釆食量：投料量-剩余饲料量;日釆食量：（投料量-剩余饲料量）/试验天数。

总增重：试验初始重-试验终末重；日增重：（试验初始重-试验终末重）/试验天数。

料重比：日釆食量/日增重。

1.3.2 腹泻率及病死率（记录粪便颜色及状态）

腹泻率%=(腹泻总头次/总头次)×100

（总头次：试验天数×试验猪总头数；腹泻总头次：试验期间每组每日腹泻头次总和）

1.3.3 观察猪只皮毛、粪便外观

试验前和试验结束时分别对猪的外观评分：皮毛指数=皮肤红润程度+毛色亮度+毛顺程度（表2）。

1.4 血液的采集

在仔猪14日龄时，各组仔猪中随机选取5头，苯巴比妥钠40% 生理盐溶液耳缘静脉注射麻醉，宰杀，采集血液5ml，肝素抗凝，2000r/min离心10min分离血浆，保存于-20℃待测。

1.5 血浆中糖皮质激素水平的测定方法

表2 仔猪皮毛指数

采用放射免疫分析法，严格按照试剂盒说明书上的步骤进行测定（试剂盒购自研域（上海）化学试剂有限公司），其中批内变异系数＜7.5%，批间变异系数＜9.5%。

1.6 血浆中IGF-I水平的测定方法

采用放射免疫分析法，严格按照试剂盒说明书上的步骤进行测定（天津九鼎医学生物工程有限公司），其中批内变异系数＜5.8%，批间变异系数＜9.3%。

1.7 血浆中生长激素水平的测定方法

原理：[125I]标记抗原（*Ag）与未标记抗原（Ag）竞争限量抗体（Ab）上的结合位点。Ag浓度和*Ag-Ab复合物呈负相关的函数关系，并表现在剂量反应曲线上，以该曲线为依据即可对样品进行定量。分离剂用于游离相和结合相的分离。

采用液相平衡竞争放射免疫分析法（RIA），严格按照试剂盒说明书上的步骤进行测定。

1.8 数据处理于统计分析

采用SPSS13.0统计软件进行数据的统计分析，采用t检验方法，试验结果数据以平均数±标准差表示.

2 结果

2.1 试验仔猪粪便情况的结果

试验仔猪粪便情况（表3）是根据表2仔猪皮毛指数统计的结果。

2.2 试验仔猪血浆中糖皮质激素水平结果

注：经方差分析，临界值F0.05(2,15)=3.68,F0.01（2,15）=6.36，因为各组间的F值为10.64大于F0.01(2，15)，P小于0.01，

表3 3组各4栏仔猪粪便计分情况（14d）

表4 试验仔猪料重比的结果

2.3 试验仔猪血浆生长激素和胰岛素水平结果

3 讨论与分析

3.1 重组猪表皮生长因子对仔猪糖皮质激素水平的影响

由早期断奶导致的应激会使仔猪的内分泌和免疫功能发生剧烈变化，对仔猪的生长极为不利。糖皮质激素是由肾上腺皮质束状带分泌，对糖代谢、蛋白质代谢有重要影响。当糖皮质质醇浓度升高时，表明机体受到的应激较大，仔猪受到断奶应激。过多的糖皮质激素可能会抑制生长激素和甲状腺素等的分泌，使断奶仔猪基础代谢降低，生长受阻。急性短期高温和持续日变高温，使猪血浆糖皮质激素浓度升高。而对早期断奶仔猪血浆中糖皮质皮含量的研究鲜有报道。21日龄断奶仔猪血浆中糖皮质含量在断奶后1周左右均处于较高水平，直到第2周仔猪的血浆皮质醇含量仍显著高于断奶前。本试验中，A组（EGF-LL活菌）仔猪血浆在抽样中发现明显低于B组（EGF-LL灭活）和C组（空白对照），方差分析显示各组间差异极显著。过多的糖皮质激素可能抑制了生长激素、甲状腺素等的合成与分泌，使断奶仔猪基础代谢降低，生长受阻。导致仔猪生长性能不良，消化吸收功能受到应急的影响，日粮营养没有充分吸收，腹泻率偏高，仔猪肠道受到刺激影响生长期。A组与C组和B组与C组数据对比表明重组组表皮生长因子对断奶仔猪血浆中国糖皮质激素水平起到了影响。A组与C组对比表明使用EGF-LL活菌与使用失活菌对糖皮质激素的影响明显，其中使用EGF-LL活菌可使断奶仔猪血浆中糖皮质激素水平降低，大大减小了仔猪的断奶应激。B组与C组仔猪的生长状况数据比A组相差很多，其中A组仔猪生长性能数据有利于仔猪的生长发育，断奶应激少，仔猪消化吸收良好，降低养殖成本到达良好效益。进而表明A组通过EHG-LL（活菌）这种途径在一定程度上能减少断奶仔猪血浆中糖皮质激素水平，降低了断奶仔猪的应急，达到增长养殖效益目的。

表6 试验仔猪血浆中GH和IGF水平结果

3.2 重组猪表皮生长因子对血浆中IGF和GH水平的影响

胰岛素样生长因子（IGF）是生长激素（GH）诱导靶细胞产生的一种具有促生长作用的肽类物质。IGF-I主要对出生后的动物生长发育有十分重要的作用。

生长激素是由脑垂体前叶嗜酸性细胞分泌的一种单一肽链的蛋白质激素。它主要作用是促进肝脏释放葡萄糖，促进脂肪分解和氧化，促进蛋白质和核酸的合成，通过多种生理过程促进组织对循环系统中氨基酸的摄取和利用，使较多的养分用于组织中蛋白质的合成，减少脂肪合成，刺激颅骨、下颌骨增大及软骨肥大、骨骺软骨增生，刺激泌乳。生产实践中，GH对动物体的影响主要表现为能提高生长速度，促进肌肉生长，降低脂肪含量。

本试验结果表明A组（EGF-LL活菌）仔猪血浆中GH和IGF的含量明显高于其他2组，进一步证明在A组仔猪血浆中糖皮质激素含量明显低于其他2组，收到糖皮质含量激素的影响，A组仔猪的生长状况最为良好，仔猪受断奶应激少，消化吸收功能良好，仔猪可有效利用日粮养分，料重比在所有试验组中为最小（1.26）。

4 小结

综上所述，本试验结果表明重组猪表皮生长因子对早期断奶仔猪血浆中糖皮质醇水平、IGF水平和GH激素水平有影响。其中血浆中糖皮质醇水平降低，而IGF水平和GH激素水平均有所上升，促进了断奶仔猪的生长。

[1]李巨浪.提高早期断奶仔猪生产性能的生物技术研究[R].加拿大哥尔夫大学，2012.

[2]范志勇,王康宁,周定刚.EGF、Gln和pGRF基因质粒对早期断奶仔猪肠道发育的影响[J].畜牧兽医学报,2006 ,37(5):457-463.

[3]Becker BA,Ni enaber JA,Christ enson RK.1985. Peripheral concent rat ions of cortisol as an indicator of stress in the pig [J].Am .J.Vet.Res.46 (5):1034- 1038.