2017年河北省致病性大肠杆菌的耐药性检测与分析

冯书风 ，马 晨 ，杜静静 ，张 诚 ，崔 欢 ，高文媛

（1.河北农业大学动物医学院，河北保定071001；2.河北农业大学生命科学学院，河北保定071001；3.保定市疾病预防控制中心，河北保定071000）

致病性大肠杆菌病是由广泛存在于自然界的致病性大肠杆菌引起的一种细菌性疾病，主要引起猪的腹泻，表现肠毒血症等症状[1]；引起禽大肠杆菌败血症、肉芽肿、气囊炎等[4]。大肠杆菌病一直是兽医临床上的多发病，被我国的兽医以及养殖户高度重视，并且随着我国养殖业集约化的迅速发展，该病愈加多发。又因为该病往往和其他病混合感染，增加了发病率和死亡率，对养殖业造成严重的经济损失[2]。目前大肠杆菌的防治主要是依靠抗菌药物，但是由于对抗生素的盲目且大量的使用，大肠杆菌对临床上常用的抗菌药物产生了不同程度的耐药性[3]。为了了解和检测大肠杆菌耐药性的不同程度和发展趋势，我们整理了2017年河北省200例中分离出来的致病性大肠杆菌用纸片扩散法进行的9种抗菌药物的情况，希望为预防以及调控该疾病的流行和指导临床合理用药提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验菌株

来源于河北省地区内各鸡场和猪场发病之后分离到的致病性大肠杆菌。

1.2 培养基

麦康凯琼脂培养基 （购自北京奥博星生物技术有限责任公司）按常规方法制备。

1.3 试验药物

阿莫西林 （AMX）、 杆菌肽 （B）、 红霉素 （E）、 多西环素（DOX）、氟苯尼考（FFC）、环丙沙星（CIP）、新霉素（N）、壮观霉素（SH）、头孢噻肟（CTX）。

1.4 药敏片

直接购于温州市康泰生物科技有限公司，干燥、密封、4℃保存备用。

1.5 抗菌药物敏感性测定法

1.5.1 药敏试验方法

在无菌条件下分别自肺脏、脾脏、淋巴结等病料中取样，划线接种于麦康凯琼脂平板，37℃ 培养 20～24h。观察细菌的菌落形态，多次划线纯化培养，保存。从同一病检动物不同部位样品分离的细菌计为同一个菌株。勾取纯化培养的菌之后均匀细密的涂布在麦康凯琼脂培养基上，在培养基上放置这9种药敏片，做好标记，在37℃倒置培养18～24h。利用仪器自动菌落分析仪（杭州迅数科技有限公司）测定数据，记录结果。

1.5.2 结果判定

判定敏感性的标准为抑菌圈直径的大小：20mm以上判为极敏；15.1～20.0mm 判为高敏；10.1～15.0mm 判为低敏；10mm 以下判为耐药。

2 结果与分析

这200例致病性大肠杆菌对9种抗菌药物的耐药性表现出差异。大肠杆菌耐药性从低到高依次是头孢噻肟、壮观霉素、新霉素、环丙沙星、氟苯尼考、多西环素、阿莫西林、杆菌肽、红霉素。其中壮观霉素、新霉素、环丙沙星、氟苯尼考、多西环素、阿莫西林、杆菌肽、红霉素等8种耐药率大于50%，仅头孢噻肟小于20%。具体数据见下表1、表2、表3。

表1 致病性大肠杆菌对9种抗菌药物的耐药率

表2 致病性大肠杆菌多重耐药的百分比

表3 9种药物耐药谱的具体分布百分比

本次的药敏实验结果显示∶在这200例中，分离出的致病性大肠杆菌对头孢噻肟和壮观霉素这两种药物比较敏感，有可能是因为这两种药使用的较少，但同时也显示出这两种药治疗大肠杆菌的良好潜力[5]；但是对于阿莫西林、杆菌肽、红霉素来说，耐药率达到了100%，所以无论是预防还是治疗，不建议使用这三种药物 ；由于地区的不同，使得新霉素、环丙沙星、氟苯尼考、多西环素这四种药物具有不同程度的治疗效果，可根据具体情况、具体病理动物的药敏实验结果进行临床合理用药。

从上述的试验结果数据可以看出，抗菌药物的耐药率很高，并且7重、8重、9重的耐药率百分比达到了72.5%，已经显示出了盲目使用抗生素的严重后果。

接下来，对于养殖户来说，可以从以下方面减少畜禽患病的机率，同时也减少抗生素药物的使用∶

（1）加强平时的饲养管理，同时严格控制外来人员以及外来车辆的进出。

（2）对于规模化的养殖场来说，要完善消毒制度，要定期定量的进行消毒，消毒药可交叉使用，减少耐药性的产生。

（3）制定合理的免疫程序，直接从源头上遏制畜禽患病。

（4）保证畜舍、禽舍的卫生情况，定时清理粪便，保证通风、干燥的环境。

（5）对于养殖户来说，在进行免疫接种和注射治疗药物时，严禁针头重复利用，避免交叉感染。