液质联用法测定白酒中甜蜜素含量的不确定度评定

2018-03-12向春燕

现代食品 2018年2期

◎ 盛静，向春燕

（重庆市黔江食品药品检验所，重庆 409000）

甜蜜素常被用作食品生产中的添加剂，经常食用甜蜜素超标的食品，会危害人体的肝脏及神经系统[1-2]。根据相关国家食品安全标准和白酒产品标准规定，不得在白酒中检出甜蜜素。白酒中环己醇及环己基的类似物质可能与亚硝酸钠反应，生成环己醇亚硝酸酯，使用气相色谱法测定时可能会造成酒中含有甜蜜素的假象，故使用液相色谱质谱法更为可靠[3-4]。测量不确定度是评价检测结果可信性、可比行和可接受性的重要指标，测量不确定度表明了测量结果的质量，不确定度越小表明测量结果的使用价值越高[5-9]。由于在检测过程中测量误差的存在，为提高白酒中甜蜜素检测时的准确度，建立检测方法的测量结果进行不确定度评定十分必要。

1 材料与方法

1.1 设备与试剂

设备：Waters UPLC TQ-S液质联用仪，美国沃特世公司；PL303电子天平，梅特勒-托利多。试剂：甜蜜素标准储备液，浓度为10.0 mg/mL，UPr=1%（k=2），农业部环境保护科研监测所提供。

1.2 数学模型

其中，X为试样中甜蜜素含量，mg/kg；C为试样中甜蜜素浓度，ng/mL；V为试样测试体积，mL；m为试样质量，g。

2 结果与分析

2.1 样品中甜蜜素测定结果

通过标准曲线法求得甜蜜素含量分别为0.292 9、0.289 6、0.287 2、0.295 7、0.290 7、0.292 9 mg/kg，平均值为0.291 5 mg/kg，实验标准差为0.002 98 mg/kg。

2.2 测量不确定来源

对测量过程和数学模型分析可知，白酒中甜蜜素含量的不确定度主要来自于重复性测定、标准物质、样品测试体积、标准曲线拟合、仪器设备、环境条件、仪器设备分辨率，见表1。

表1 白酒中甜蜜素含量不确定度预估表

重复性测定引起的不确定度分量作为第一个影响分量处理，可以通过多次独立重复测量，采用A类评定方法求出；标准曲线拟合引入的不确定度分量，按A类评定方法求出；标准物质引入的不确定度分量，按B类评定方法求出；样品测试体积引入的不确定度分量，按B类评定方法求出；仪器设备引入的不确定度分量，按B类评定方法求出；环境条件引入的不确定度分量，检测是在标准要求环境条件下测量，该环境条件下引入的不确定分量忽略不计；仪器设备分辨率引入的不确定度分量，已经考虑了重复性测定引起的不确定度分量，可以不再考虑。

2.3 分量不确定度评定

2.3.1 重复性测定引入的不确定度分量uA1r评定

根据样品中甜蜜素测定结果和内赛尔公式计算平均值实验标准差：

则：

2.3.2 标准曲线拟合求得样品浓度时引入的不确定度分量uA2r评定

用液相色谱串联色谱仪测定甜蜜素含量，标准系列溶液的浓度为50、100、200、400、500 ng/ml。用最小二乘法对数据进行拟合，得到直线方程Y=aX+b和相关系数r，其中a=521.015，b=2447.39，r=0.999 9。

样品平行测定6次，由线性方程求得平均浓度c样=265.911 ng/mL，则标准曲线拟合求得样品浓度时引入的标准不确定度为：

式中：S(y)为标准溶液对应峰面积的残差的标准差。

c-为标准溶液的平均浓度。

Scc为标准溶液浓度残差的平方和。

P为标准溶液的测量次数，P=5；n为样品的测量次数，n=6。则：

2.3.3 标准物质引入的不确定度分量uB1r评定

（1）甜蜜素标准储备液[GBW(E)100173]为农业部环境保护科研监测所提供，浓度为10.0 mg/mL，证书给出的相对扩展不确定度为UPr=1%（k=2）=0.01，则uPr=0.1/2=0.005。

（2）标准中间溶液配制过程引入的不确定度。标准中间溶液配制：准确吸取5.0 mL甜蜜素标准储备液于50 mL容量瓶中，用水定容至刻度，浓度为1.0 mg/mL。再准确吸取1 mL该标准溶液于100 mL容量瓶中，用水定容至刻度，浓度为10 μg/mL。配制过程中使用了5.0 mL和1.0 mL单标线吸量管和A级单标线50 mL、100 mL容量瓶。根据JJG 196-2006规定，1.0 mL和5.0 mL单标线吸量管的容量允差分别为±0.007 mL和±0.015 mL，按矩形分布考虑，则相对标准比确定度为别为：