测定大米中敌敌畏残留量的处理方法比较

2018-03-12陈瑞霞梁晓涵周考根

现代食品 2018年2期

◎ 陈瑞霞，梁晓涵，周考根

（1.海南省食品药品检验所琼海分所，海南琼海 571433；2.海南省食品检验检测中心，海南海口 570314）

敌敌畏是一种有毒的有机磷农药，对害虫有胃毒、触杀和熏蒸作用[1]，价格低廉，故广泛应用于农作物生产中。由于敌敌畏挥发性强，熏蒸作用突出，一些不法生产大米的粮油企业利用这一特性，在粮仓喷洒剧毒农药敌敌畏，达到防虫杀虫的目的。这样的行为给大米质量带来安全隐患，对大米中敌敌畏的残留检测不容忽视。为了找到更多、更简便的检测方法，本文对国标GB/T 5009.20-2003改进法[2-3]及QuEchERS[4-5]两种不同方法进行比较研究。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

仪器：气相色谱仪，岛津GC 2010 PLUS，配FPD检测器；电子天平，FA2104；旋涡振荡器，德国 Heidolph；离心机SIGMA 3-30KS；均质机，德国IKA公司，T25 digital TURRAX；旋转蒸发器，BUCHI Rotavapor R-3；超纯水机，ULTRAPURE WATER 优普纯水机；氮吹仪，HN200 多功能氮吹仪，海能仪器。

试剂：标准品为丙酮中敌敌畏，1.2 mL，1 000 μg/mL，编号GBW（E）082244，购自北京坛墨质检科技有限公司；乙腈为色谱纯；丙酮为色谱纯；氯化钠，分析纯；水，超纯水。

1.2 标准溶液配制

标准储备液：精密取1.0 mL敌敌畏标准液于10 mL的容量瓶中，用丙酮稀释并定容至刻度，混匀，即得100 μg/mL敌敌畏贮备液，并储存于4 ℃冰箱中。

标准使用液：精密吸取100 μg/mL敌敌畏储备液0.1 mL置于10 mL的容量瓶中，得到1 μg/mL敌敌畏使用液。

基质标准工作溶液：用阴性大米样品提取作为溶剂，得浓度分别为0.008、0.01、0.02、0.05、0.08、0.10、0.15、0.2 μg/mL的基质标准曲线。

1.3 样品前处理

1.3.1 国标GB/T 5009.20-2003改进法

称取10 g已磨碎的大米样品于250 mL烧杯中，加入15 mL纯水浸泡30 min后，加入40 mL乙腈，匀浆2 min，混匀，在100 mL具塞量筒中加入10 g氯化钠，将匀浆后样品过滤入此量筒中，剧烈振摇2 min，静置30 min，取20 mL上清液于100 mL圆底烧瓶中，38 ℃旋转蒸发近干，用丙酮将圆底烧瓶内样液定容至5 mL，摇匀，过0.22 μm滤膜，上机检测。

1.3.2 QuEChERS法

称取10 g已磨碎的大米样品于50 mL离心管中，加入15 mL纯水浸泡30 min，再加入10 mL乙腈，振摇3 min，超声30 min，加入4 g无水硫酸镁和1 g氯化钠，涡旋2 min，8 000 r/min离心5 min。

取5 mL上清液于加入150 mg PSA吸附剂及150 mg C18和900 mg无水硫酸镁的15 mL离心管中，涡旋2 min，取2 mL上清液于10 mL玻璃离心管中，40 ℃水浴氮气吹至近干，然后用2 mL丙酮定容，过0.22 μm滤膜，待测。

1.4 色谱条件

DB-17色谱柱（30.0 m×0.32 mm×0.25 μm）；不分流方式自动进样1.0 μL，进样口温度220 ℃；FPD检测器温度250 ℃；载气为氮气，纯度99.999%，流速4.55 mL/min；氢气，62.5 mL/min；空气，90 mL/min；柱箱升温程序，初始100 ℃，以10 ℃/min升温至150 ℃，再以6 ℃/min升温至250 ℃保持2 min。本实验中，敌敌畏出峰时间4.033 min。

2 结果与讨论

2.1 两种前处理方法比较

针对国标GB/T 5009.20-2003中的提取溶剂选取，用乙腈代替丙酮及二氯甲烷。大米中含有大量的淀粉、蛋白质、脂肪等物质。丙酮及二氯甲烷会提取大米中更多的脂肪类杂质，乙腈对非极性成分如色素、脂肪等提取能力相对少，且旋蒸时乙腈能与水分形成共沸将水分蒸发，提取效率相对高[2]。

QuEChERS的前处理与国标GB/T 5009.20-2003改进法相比，多了净化过程，通过添加PSA吸附剂及C18除去大米基质中的脂肪类等非极性物质，加无水硫酸镁进一步除水，且不需要旋蒸。

比较国标GB/T 5009.20-2003改进法与QuEChERS法的色谱图，如图1、2所示，从色谱图可看出，QuEChERS法基线相对平缓，杂峰相对少，净化效果好些。

图1 国标GB/T 5009.20-2003改进法色谱图

图2 QuEChERS法色谱图

2.2 样品的加水量对残留提取的影响

大米为干制样品，为了让提取液与样品更好地接触，提取前需加水让其充分浸润。通过加不同水量（与样品量的比例）0.0%、20%、40.0%、60%、80%、100%，发现加水量对提取回收率没多大影响，但加水量为样品量的60%～80%时，效果较佳。

2.3 基质效应研究

基质效应在农药残留分析中不可避免[6-7]，为了减少基质效应的干扰，本实验用基质匹配标样进行校准。通过做溶剂标曲与基质标曲的比较，直接提取法用基质匹配标曲效果更佳，采用QuEChERS前处理方法，基质效果相对较小，也可直接用标样配制工作曲线。

2.4 线性范围，相关系数及检出限

分别按照国标GB/T 5009.20-2003改进法（方法一）及QuEchERS（方法二）得到阴性大米样品基质液，用基质液配制工作曲线，浓度范围在0.008～0.2 μg/mL时，两种方法检测结果与敌敌畏浓度都呈良好的线性关系，相关系数都大于0.999。分别以最低限加标样品的基线信噪值，按照信噪比S/N=3计算得敌敌畏的检出限（LOD），见表1。