新疆阿勒泰垦区规模化羊群弓形虫病血清流行病学调查

李 伟，侯小林，王正荣，韩猛立，黄佐兴，蒲新竹，李守江，张 宾，黄 新

（1. 新疆生产建设兵团第十师北屯市畜牧兽医工作站，新疆北屯 836000；2. 新疆农垦科学院，省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室，新疆石河子 832000；3. 新疆生产建设兵团第十师一八一团，新疆阿勒泰 836001；4. 新疆生产建设兵团第十师一八八团，新疆北屯 836003）

弓形虫（Toxoplasma gondii）是真球虫目弓形虫科弓形虫属的一种人兽共患寄生虫[1]。它可寄生于哺乳类、鸟类、爬行类和鱼类动物中的，除红细胞外的所有有核细胞内[2]。免疫力正常的人群感染弓形虫后常表现为隐性感染[1-4]，但免疫缺陷者、先天性感染的新生婴儿或器官移植者等特殊患者，常会出现严重症状，甚至死亡[5]。动物感染弓形虫后，可引起繁殖障碍包括流产，对养殖业造成重大经济损失[6-7]。目前，弓形虫病呈全球性流行，对人类健康和畜牧业生产造成严重威胁。

人和动物多由食入弓形虫卵囊或被包囊污染的食物或水而感染，含有弓形虫包囊的未煮熟肉类和肉产品，以及含有弓形虫卵囊的食物或水是人类弓形虫病的主要感染来源。其中，肉类是人或动物怀孕期原发感染的主要风险因素[8-10]。因此，了解羊弓形虫感染情况对人类健康及养羊业的发展具有重要意义。

近年来，美、法、韩等国家相继报道了因食用生肉而导致的弓形虫病暴发[11-13]。在我国，虽未见相关报道，但研究发现，从事动物屠宰、动物饲养和肉食品加工人群的弓形虫感染率较高[14]。新疆生产建设兵团第十师北屯市所在的阿勒泰地区，是新疆最重要的畜牧业基地之一。因兵团所属地区的弓形虫病流行病学资料较少，为摸清规模化羊群弓形虫病流行情况，开展了本次血清学调查。

1 材料与方法

1.1 样品采集

2016年9—11月，以第十师北屯市周边4个团场的7个规模化羊场或养殖合作社为调查对象，结合第十师所辖的7个农牧团场及其规模化养殖情况（2016年底存栏约2万只，养殖场和合作社约30家），按照周边地区阳性率5%～7%估算[15-20]，根据羊群生产性能，按25 %的抽样比例进行分组随机抽样，共计采集血样955份，获得有效血清890份（表1）。抽样时确保了单位全覆盖，并选取养殖结构、品种、方式、时间较为一致的群体进行。

表1 抽样数量及其分布

1.2 试验试剂

弓形虫IHA抗原、标准阴性血清和阳性血清均购于中国农业科学院兰州兽医研究所。

1.3 主要仪器

离心机、微量移液器及其吸头、1.5 mL离心管、微量振荡器、冰箱、恒温培养箱、96孔1100V型板。

1.4 试剂准备

将弓形虫IHA抗原用等量双蒸水稀释，2 000 r/min离心5 min，弃上清；加等量稀释液混匀，置4 ℃冰箱备用。

1.5 血清准备

将采集的血液样品，3 000 r/min离心5 min，分离血清，置于−20 ℃冰箱保存，备用。

1.6 操作方法

按照弓形虫间接血凝试验（IHA）试剂使用说明书和农业行业标准（NY/T573—2002）的相关规定进行。

1.7 结果判定

在弓形虫阴性/阳性标准血清及稀释液对照均成立（阳性对照血清滴度≥1∶1 024、阴性对照血清除第 1 孔允许存在前带现象“+”外，其余各孔为“−”，稀释液对照为“−”）的情况下，被检血清抗体效价≥1∶64时，判为阳性。

2 结果与分析

2.1 不同团场

在890份血清中，共检出阳性血清55份，阳性率为6.18%；各养殖场均存在不同程度的弓形虫感染，表明感染分布广泛；感染率最高的为B团，阳性率为8.54%，感染率最低的为G团，阳性率为3.66%（3/82）；感染率最高的养殖场为A2，阳性率为9.46%，感染率最低的为 A1养殖场，阳性率为3.30%（表2）。

表2 不同团场弓形虫血清学调查

结合各团场的地理位置和养殖情况分析发现，感染率最高和最低的均处于A团场。A团场无论从养殖规模、养殖方式、饲养品种、养殖理念、育肥数量、流通速度等均位居十师首位，同时拥有兵团级种羊场。而这可能正是出现这种情况的主要因素；F团场和G团场位于边境地区，饲养数量、养殖规模、流通速度等均较少，基本上处于满足周边人群肉食品消费需求的状态，感染率相对较低；B、C、D、E团场均处于养殖业迅速发展和扩大时期，人们的养殖理念、饲养管理水平均处于适应学习的上升阶段，感染率高低不一。这些应引起广大畜牧兽医技术人员和养殖户的重视。

2.2 不同年龄

各年龄段的羊均存在弓形虫感染，且3岁以上的阳性率最高，为8.82%；0～6月龄的最低，为3.91%（表3）。

表3 不同年龄阶段弓形虫血清学调查

检测结果显示，随着羊群年龄的增长，羊弓形虫感染率呈上升趋势。经询问养殖场负责人得知，目前普遍采用舍饲与放牧相结合的养殖模式，冬春季节集中舍饲，夏秋季节草场放牧。因此，这可能与羊只在放牧过程中接触被污染的草场、水源，以随行的狗、猫等有关。随着年龄的增长，羊群接触的机会增加，从而导致感染率上升。

2.3 不同生产性能

母羊群平均阳性率为9.36%，断奶羔羊平均阳性率为2.13%，育肥羊群平均阳性率为5.88%；种羊群中的未检出（表4）。

表4 不同生产性能弓形虫血清学调查

检测结果显示，母羊群感染率最高，羔羊群最低，育肥羊群介于中间。分析得知：母羊群年龄普遍较高，所以感染率较高；而育肥羊群分为规模化养殖场同群内分群集中育肥与养殖合作社多家参与集中育肥，由当年的羔羊、淘汰的母羊以及市场收购的羊组成，故感染率高于羔羊群而低于母羊群。

3 讨论

国内外有关弓形虫病的研究报道较多，大多数以血清阳性率来表示感染率，感染率在3%～95%之间[21]。我国羊弓形虫感染率普遍较国外低，但羊弓形虫病零散分布于各省市。据调查，我国羊弓形虫感染率为2.8%～33.3%[15-20，22]。本次调查显示，弓形虫血清阳性率介于3.30%～9.70%之间，平均血清阳性率为6.18%，阳性率较低。这可能与近年来大力发展畜牧业，鼓励职工将传统的庭院养殖转化为规模化养殖，以及加强饲养管理有关。

羊弓形虫感染受羊年龄、性别，以及饲养管理、周边环境及地域等因素影响。Figliuodo等[23]对巴西São paulo州进行羊弓形虫调查时发现，绵羊弓形虫感染率为34.7%（IFAT），感染率与羊龄有关；Ragozo等[24-25]对该州进行羊弓形虫病调查发现，羊弓形虫抗体阳性率为24.2%，其中母羊感染率（43.7%）高于公羊（21%），成年羊（63.2%）高于幼龄羊（21%），高密度饲养管理羊高于低密度饲养管理羊；该州Jaboticabal地区的羊弓形虫感染率为52%，感染率与羊性别、饲养管理、猫的接触有关。祖阿力娅等[15]对吐鲁番地区的调查结果显示，羊弓形虫感染与羊年龄和性别有关，2岁以上羊感染率为11.8%，高于l岁以内羊（2.4%），母羊感染率（9.6%）高于公羊（2.61%）。本调查结果显示，随着羊年龄增长，弓形虫感染率呈现出上升趋势，与上述结果基本一致。

另有报道表明，弓形虫感染与气候因素有关，气候温暖地区的羊弓形虫感染率高于半干旱地区[26]。本研究在采集样品时未做相应的标注加以区分羊性别和品种，故未进行相应的统计和数据分析。这一点需在以后的研究和工作中加以重视。

4 结论

此次调查共计采集7个团场的890份羊血清进行弓形虫抗体检测，共检测出55份阳性样品，平均抗体阳性率为6.18%；弓形虫感染与羊年龄、养殖环境、养殖地域、养殖方式、饲养管理有关。此次调查的羊弓形虫感染率相对于国内其它地区而言，处于较低水平。分析其主要原因可能是阿勒泰属于干旱地区，戈壁荒漠化草场居多，干旱的土壤不利于弓形虫卵囊生长和传播；其次该地区土地资源辽阔，饲养区域相对较大，感染弓形虫的概率相对较小。还有最重要的一点就是，畜禽的规模化、集约化养殖，改变了以往的牛、羊、鸡、狗、猫混养的方式，减少了弓形虫传播的机会，同时加上管理部门的科普宣传和技术人员的努力，提高了人们的思想意识和防控观念，使得弓形虫病处在一个相对较低的感染水平。虽然第十师北屯市羊弓形虫总体感染率不高，但感染分布较广，也不平衡，应引起有关部门重视。

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