Rh抗原分型检测对反复输血患者的临床意义

阳志勇 陈芝喜

(南华大学附属第一医院输血科，衡阳 421001)

Rh血型系统在临床上的重要性仅次于ABO血型系统，该系统非常复杂，所包含的抗原数目最多，共有54个抗原，但临床最主要、最常见的仅有5个抗原D、C、c、E、e，其中免疫原性最强的是D抗原，其次是c和E抗原[1]。由于D抗原的重要性，我们对于D抗原阴性的患者或者孕产妇，都给予了足够重视，因此近年来由于D抗原阴性导致的非同型输血已经很罕见了。但是笔者在工作中发现，很多血液系统疾病的患者，由于反复多次输血，不规则抗体筛查阳性，配血不合的现象越来越多，经过抗体鉴定后发现绝大部分患者是产生了Rh系统的同种抗体，其中以抗E最多见。在对免疫性红细胞同种抗体相对频率的研究中，发现我国临床上免疫性抗E比抗D更常见，这主要是与D、E等抗原分布有关[2]。为了尽可能避免需要多次输血患者产生同种抗体，在临床上可以采取Rh系统主要抗原同型输血，因此，该类患者首次输血前进行Rh抗原分型检测就尤其具有重要的意义。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1研究对象 2016年7月～2017年3月本院门诊、住院患者共19 845人次中检测出不规则抗体筛查阳性的患者共128例，其中男性38例，女性90例，年龄分布在2～86岁。

1.1.2试剂与仪器 Rh血型抗原检测试剂(单克隆抗体，上海血液生物医药有限公司，批号20163002，20163103，20163302，20163201)、抗人球蛋白检测卡(长春博迅生物技术有限责任公司，批号20160503，20161208，20170210)、抗体筛选细胞(3人份，上海血液生物医药有限公司，批号20160618，20160820，20161128，20170102)、红细胞血型抗体鉴定细胞(10人份，上海血液生物医药有限公司，批号20160718，20160927，20161201)，以上试剂均在效期内使用。FYQ型免疫微柱孵育器、TD-3A型血型血清学离心机(长春博研医学生物仪器公司)；KA-2200久保田离心机(日本)。

1.2方法

1.2.1不规则抗体的筛查 用盐水介质法和抗人球蛋白检测卡法这两种方法筛查患者血清中不规则抗体(任意1种方法有反应性就判定患者抗体筛查阳性)，检测出128例不规则抗体筛查阳性患者。

1.2.2红细胞Rh血型的抗原分型和不规则抗体特异性鉴定 分别检测这128例标本Rh抗原分型和红细胞单特异性抗体鉴定，并对Rh系统的意外抗体分布情况进行统计分析。

1.3统计学处理 数据采用GraphPad5.0软件进行统计分析处理，计数资料用百分率(%)表示，采用Fisher精确检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1128例不规则抗体筛查阳性患者的抗体特异性鉴定发现，Rh系统中抗E和抗c检出率达到60%以上，尤其以抗E更为多见，占总检出例数的56.25%，Rh系统的意外抗体(60.16%)与MNSs系统(10.94%)、Lewis系统(11.72%)、P系统(3.13%)比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。各种特异性抗体检出情况见表1。

2.2128例不规则抗体筛查阳性患者Rh抗原分型检测结果见表2，其中占绝大多数的表型是DCCee。

2.3128例抗体筛查阳性患者产生的不规则抗体属于Rh系统的所属病区分布情况见表3，从此表可见需要反复输血的科室如血液内科、消化内科、ICU的患者占多数。

表1128例患者中各种特异性抗体的占比

Tab.1Proportionofvariousspecificantibodiesin128patients

SpecificantibodynProportion(%)RhAnti⁃E7256 25Anti⁃c53 91MNSs⁃system1)Anti⁃M107 81Anti⁃Mur43 13Lewis⁃system1)Anti⁃Lea1511 72P⁃system1)Anti⁃P143 13Others1814 05Total128100

Note：Other antibodies include autoantibodies and those fail to identify specific ones.Compared with Rh system,1)P<0.05.

表2128例不规则抗体筛查阳性患者Rh抗原分型检测结果

Tab.2TestresultsofRhantigentypingin128patientswithirregularantibodyscreening

Antigentypingn(%)Anti⁃E(n)Anti⁃c(n)DCCee74(57 82)645DCcee10(7 81)60DccEE5(3 91)00DccEe2(1 56)00DCcEe34(26 56)00DCcEE1(0 78)00dCcee1(0 78)10dccee1(0 78)10Total128(100)725

表3128例不规则抗体筛查阳性患者所属病区的分布情况

Tab.3Distributionofpatientsin128patientswithirregularantibodyscreening

Departmentn(positive)ninRhsystem(%)Hematology3526(74 29)Digestive1611(68 75)ICU54(80 0)Obstetric106(60 0)Gynecology72(28 57)Gastrointestinal117(63 64)Spine85(62 5)Hepatobiliary106(60 0)Infection103(30 0)Neurosurgery74(57 14)Orthopaedic42(50 0)Urology51(20 0)Total12877(60 16)

3 讨论

Rh系统的血型抗体最初是从一名引起严重新生儿溶血病和发生溶血性输血反应的产妇血液中发现的。由于其重要的临床意义，人们对RhD抗原抗体反应给予了极大的关注，因此在日常工作中，抗D抗体已经很少见了。但是Rh系统其他几个抗体则经常出现在我们的视野中，这主要是由于对其他几个抗原的关注不够，Rh系统非完全同型输血普遍存在，当受者与供者间抗原存在差异时，可能会导致相应抗体的产生。为了了解其在安全输血以及有效输血中的作用，我们从19 845例门诊和住院患者中选取了128例抗筛阳性的患者，通过微柱凝胶法进行单特异性抗体鉴定，发现Rh系统的不规则抗体一共有77例，占60.16%其中尤以抗E为主(72例/77例)，而其他多个系统的不规则抗体共51例。由此可见，抗筛阳性患者所占的比率达到0.64%，与各地文献报道基本一致。而一直以来我们谈及色变的抗-D其实在日常工作中极为罕见，反倒是抗-E日渐成为引起溶血性输血反应的主要因素。

对这128例不规则抗体筛查阳性的患者进行Rh抗原分型的结果来看，表型分布为DCCee(74例，57.82%)>DCcEe(34例，26.56%)>DCcee(10例，7.81%)>DccEE(5例，3.91%)>DccEe(2例，1.56%)>DCcEE(1例，0.78%)、dCcee(1例，0.78%)、dccee(1例，0.78%)，C、c、E、e四种抗原的检出率分别为93.75%(120例)、42.19%(54例)、32.81%(42例)、95.31%(122例)。在检出的8种表型中，以DCCee表型最多占57.82%，其次是DCcEe表型占26.56%；四种抗原在人群的分布以E抗原阳性率最少仅32.81%，其次是c抗原阳性率仅42.19%，这与国内报道的检出情况一致[3-5]。根据我国《临床输血技术规范》要求，患者输血前要常规检测Rh(D)抗原，并对其阴性的患者采用自身输血、同型输血以及相容性输血，但是对于E抗原和c抗原并未要求常规检测，而且E、c抗原频率远低于其他三个抗原，使得E、c抗原阴性的患者产生同种免疫的可能性大大增加，因此，在不规则抗体鉴定中，抗-E抗体的检出率才会占据了所有检出特异性抗体的一半以上。

128例抗筛阳性的患者中，检出了77例Rh系统的同种抗体，我们发现，这些患者常见于ICU、血液内科和消化内科，这些病区的患者大都是血液系统疾病、消化道大出血以及危重大出血患者，临床治疗上对血液的需求很大，需要反复多次输血，因此接受外来抗原的机会比一般患者要大得多，从而导致抗原刺激产生意外抗体的机会更大。一旦产生了同种抗体，在后续的输血治疗上，难度将会加大，一方面是更难找到相合的血液，另一方面是发生各种迟发性或急性溶血反应的几率增加。同种抗体一旦产生，就不会消失，只会随着时间的改变效价逐渐降低，但是一旦再次接触相应的抗原，就会引起“回忆性反应”，抗体效价急剧上升，造成严重的溶血反应[6]。如果我国采供血机构对所有献血者检测RhD、C、c、E、e等抗原，并坚持采用Rh系统五个抗原同型输血，或者对预计需要反复输血的病人采用Rh系统五个抗原同型输血，那么患者产生Rh系统的同种抗体的几率就会显著降低。Rh系统不规则抗体的产生避免了，绝大多数的患者就不会出现抗体筛查阳性的现象，这将会极大地提高输血疗效和输血安全。

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