阿司匹林在肝癌的化学预防及治疗上的相关研究进展

卢静 韦忠恒 赵立峰 邱丽芳 林成

【關键词】 阿司匹林;肝癌;化学预防;治疗

中图分类号：R735.7 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2018.06.026

肝细胞癌（HCC）是最常见的恶性肿瘤之一，据相关流行病学统计显示肝癌在我国死亡率位居第二[1]，因此对于肝癌的早期预防、诊断及治疗仍是世界上共同关注与研究的方向。阿司匹林至今已应用百年，成为医药史上三大经典药物之一，是目前世界上应用最广泛的解热、镇痛和抗炎药。近些年，由于大量实验及流行病学统计分析显示阿司匹林具有预防及控制肿瘤发展的作用而备受大家关注，本文就近年来阿司匹林在肝癌的化学预防及治疗上的相关研究进行综述。

1 阿司匹林对HBV相关性肝癌的预防作用

1.1 HBV与肝癌相关性

乙肝病毒感染是原发性肝癌发病的主要因素，超过50%的HCC病例归因于潜在的慢性HBV感染[2]。HBV感染肝细胞后主要是通过体内适应性免疫应答途径介导所有与病毒性肝炎相关的肝脏疾病，病毒特异性CD8 T细胞应答在免疫应答途径中扮演着重要的角色，但它并不能消除肝脏中的HBV，从而使低水平细胞破坏持续循环，其产生的肝脏损伤促使了肝硬化和肝细胞癌的发生，几乎所有的HCC病例都是慢性肝炎在免疫介导多年后发生的[3]。在慢性免疫介导的乙型肝炎的小鼠模型实验中也强化了细胞免疫反应足以在慢性病毒性肝炎中诱发肝癌[4]。Aiolfi等[5]的研究指出，病毒特异性CD8 T细胞通过杀死HBV复制的肝细胞并通过再次募集致病性病毒非特异性炎性细胞而诱导肝损伤，血小板可以促进病毒特异性CD8 T细胞在肝内的积聚。而抗血小板药物阿司匹林可以抑制病毒特异性CD8 T细胞和病毒非特异性炎症细胞在肝内的积聚，持续使用阿司匹林可降低持续性肝损伤的严重程度并预防HCC的发生。

1.2 阿司匹林对肝癌的预防

Lee等[6]对1997年1月至2011年12月期间接受过肝切除的9461例HBV相关HCC患者的相关分析中指出：肝切除后使用阿司匹林与HBV相关HCC患者的无复发生存率和总生存率相关，但是，由于上消化道出血的不良影响，应谨慎使用这些药物。在美国进行的一项关于300 504名年龄在50～71岁的男性和女性的前瞻性数据分析中发现，在其队列研究中，只有阿司匹林的使用者发生HCC的风险降低49%，慢性肝脏疾病（chronic liver Disease，CLD，除外HCC）相比非使用者死亡风险降低50%;而非阿司匹林NSAIDs使用者的CLD死亡风险降低34%，也并没有降低患HCC的风险[7]，在此研究中，阿司匹林对HCC的预防方面的作用很突出，但由于研究人群的年龄局限于50～71岁，所以，对于其他年龄段人群的数据分析仍未明确。Petrick等[8]也指出，在每日服用一次阿司匹林者中，患HCC的风险降低32%。但是，在这些研究中尚未对阿司匹林的使用频率、持续时间、剂量等作出明确的阐述，因此，仍需要进一步的研究来阐明阿司匹林作为预防作用时的使用方法。

2 阿司匹林在HCC治疗上的作用机制

2.1 对肿瘤细胞的增殖、凋亡作用

目前已有不少体外细胞培养及动物实验证实阿司匹林可单独抑制肝癌细胞的增殖，并在实验范围内与药物浓度有关[9]。Raza等[10]对单一系统的HepG2细胞进行培养，表明阿司匹林诱导对肿瘤细胞的毒性是由于活性氧（ROS）产生增加、谷胱甘肽（GSH）库减少和伴随线粒体功能障碍的氧化应激增加引起。体外BEL-7402肝癌细胞的培养实验显示，与对照组相比，处理24 h时，小剂量（1 mM）阿司匹林不能抑制肝癌增殖，在作用48 h后可单独并协同干扰素-α（IFN-α）抑制细胞增殖及诱导部分肿瘤细胞凋亡[11]。在HCC-LM3细胞的实验中显示，低浓度阿司匹林对于肝癌细胞的增殖没有影响，高浓度（10 mM）才会抑制肿瘤细胞的增殖，因10 mM的剂量已经相当大，所以抑制肿瘤细胞增殖的作用也不排除是阿司匹林的细胞毒作用引起[12]。对小鼠腹水型肝癌H22细胞的研究中，阿司匹林对肝癌细胞有明显抑制作用，并呈现出明显的剂量依赖性，对小鼠肝癌也有明显的体内抑瘤效果，抑瘤率高达40.11%，且不影响小鼠的饮食、活动和体重，表明阿司匹林具备高效、低毒的抗癌特性[13]。Hossain等[14]在阿司匹林对体外HepG2人肝癌细胞系和BALB/c裸鼠HepG2细胞异种移植模型的实验研究中指出，口服阿司匹林（100 mg·kg-1·d-1）致裸鼠HepG2肿瘤的生长显著降低，且阿司匹林可以诱导肝癌细胞凋亡并降低体内外人肝癌细胞的生长。

阿司匹林抑制肿瘤生长的机制除了与其抑制环氧化酶-2（COX-2）有关[15]外，目前的研究也提出一些新的相关作用机制：阿司匹林可促凋亡蛋白Bax表达的增加[11];提高TIP30的表达[12];通过靶向肝癌细胞中Hsp70介导的COX信号通路[16];靶向核因子κB（NF-κB）[17];高效的诱导细胞中钙网蛋白的表达[18];基于Wnt/β-catenin信号通路，抑制thy-1增殖功能[19]，来诱导肝癌细胞的凋亡和细胞周期阻滞，并且对正常肝细胞的生长没有显著的抑制作用。即使阿司匹林诱导钙网蛋白高表达的机制尚不明确，但这些研究为肿瘤的靶向治疗及免疫治疗带来了新的思路，也让我们对阿司匹林的作用机制有了新的认识。阿司匹林参与肝癌细胞增殖、凋亡的机制复杂多样，仍是研究中的热点。

2.2 对肿瘤细胞的侵袭、转移作用

在关于阿司匹林对肿瘤细胞的侵袭及转移作用的研究中，陆录[12]提出：低浓度阿司匹林通过上调TIP30的表达，抑制肝癌细胞的侵袭，并且可以抑制肿瘤细胞的上皮间质转化（EMT），减少肝内播散。于松宁等[20]在构建的裸鼠人肝癌原位生长模型研究中发现：经阿司匹林治疗后肝癌大小无明显变化，但阿司匹林能够逆转肝癌生长和转移过程中发生的EMT，减少肝癌肺转移率。相关研究[21]证实，肝癌不完全射频消融（RFA）后，肿瘤热破坏引起的炎症可能是残留肝癌VX2快速进展的重要原因，阿司匹林的抗炎作用可以抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移，可作为RFA辅助治疗HCC的候选药物。除上述体外实验研究，在国外的一项大量数据回顾性分析中显示，在癌症诊断后15年，阿司匹林在阻止癌症发生临床转移的作用仍然很明显，降低了30%～40%的远处转移风险并降低了将近一半的转移性腺癌风险;对于初次诊断时未发生转移且在确诊或诊断后仍继续接受试验治疗的腺癌患者，随后随访中其转移风险降低约70%，以上为服用低剂量（每日≥75 mg）阿司匹林缓释制剂观察到的效果[22]。

2.3 對治疗肝癌相关药物的影响

在癌症治疗中，多种药物的联合治疗是常见手段，不仅可以达到比单一药物更好的治疗效果，而且可以减少耐药性。阿司匹林对治疗肝癌中常用化疗药物的影响及机制主要有以下几种。

2.3.1 阿司匹林与5-氟尿嘧啶

阿司匹林可能是通过下调COX-2的表达影响BCL-2的表达，促进细胞色素C释放，激活内源性凋亡途径Caspase-9，从而引起下游Caspase级联反应来增强 5-氟尿嘧啶对肝癌细胞的凋亡作用，其联合使用对肝癌细胞HepG2的增殖抑制及诱导凋亡作用较单独用药增强[9]。

2.3.2 阿司匹林与IFN-α

STAT1表达的降低或缺失会诱导肿瘤细胞对IFN-α耐药性的产生，小剂量阿司匹林通过促进其上游通路分子JAK2磷酸化，促进IFN-α作用下STAT1、促凋亡ISG XAF1的表达，抑制抗凋亡ISG G1P3的表达，因此，小剂量阿司匹林可协同IFN-α抑制肝癌细胞增殖，促进IFN-α诱导肝癌细胞的凋亡，且具有延缓甚至逆转IFN-α耐药性的作用[11]。

2.3.3 阿司匹林与阿霉素

阿司匹林可以增强阿霉素诱导的细胞凋亡并且在体内外降低人肝癌细胞的生长，阿司匹林和阿霉素联合使用可以使阿霉素以较低的剂量用于治疗癌症，从而使其剂量相关的副作用最小化，并在肿瘤生长抑制、细胞周期停滞和细胞凋亡方面产生了强大的协同作用[23]。

2.3.4 阿司匹林与三氧化二砷（As2O3）

胡亚男等[24]采用10 μmol/L As2O3和不同浓度（0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、8.0 mmol/L）的阿司匹林处理人肝癌细胞HepG2 24 h，发现低浓度的阿司匹林可能通过激活Nrf2-HO-1途径降低细胞内ROS的蓄积，减弱As2O3的凋亡诱导能力;只有较高浓度（5.0 mmol/L）的阿司匹林可以抑制Nrf2-HO-1途径对ROS的清除作用，诱导大量的ROS蓄积进而增强As2O3对肝癌细胞的杀伤能力[24]，此实验提出了阿司匹林的双面性，并非小剂量阿司匹林对所有的化疗药物均有协同作用。

2.3.5 阿司匹林与索拉非尼

目前用于肝癌患者的全身化疗药物中，索拉非尼是唯一被批准的用于HCC的分子靶向药物，但是目前相关的研究指出，索拉非尼在治疗过程中可导致肝癌细胞的肝内转移、增强肝癌细胞的侵袭能力及产生耐药，其机制主要包括：索拉非尼可上调癌旁和肿瘤微环境中鼠源性趋化因子SDFI-α的表达，并且索拉非尼在治疗过程中可以破坏肿瘤血管的完整性，导致血小板溢出管腔，激活的血小板对于肝癌细胞增殖的影响不明显，但是激活的血小板可明显促进肝癌细胞的侵袭，增加肝癌细胞与内皮细胞的黏附，促进肿瘤细胞EMT，并上调肿瘤细胞MMP9的表达[12];索拉非尼可以下调HTATIP2的表达，导致更大的侵袭和转移[25];高糖酵解和PFKFB3过表达在索拉非尼耐药性中占据主导地位[26]。然而相关实验也指出：阿司匹林通过抑制肿瘤微环境中SDFI-α的表达及抗血小板作用，来抑制索拉非尼引起的肝癌侵袭转移潜能的增加[12];阿司匹林通过抑制COX2的表达来上调HTATIP2表达，降低HCC的侵袭性和转移性，并且无论HCC肿瘤细胞中HTATIP2的表达如何，阿司匹林都可用于改善索拉非尼的疗效[25];阿司匹林可以进行靶向和克服高糖酵解和PFKFB3过表达，从而克服索拉非尼产生的耐药，阿司匹林联合索拉非尼诱导肿瘤细胞凋亡而不诱导体重减轻、肝毒性及炎症，可通过协同作用以及改善索拉非尼的副作用来增强常规癌症治疗的效果[26];阿司匹林影响AMPK/mTOR信号通路的多个组分，部分通过AMPK-TSC途径抑制mTORC1信号传导，并通过破坏mTOR-raptor相互作用直接抑制mTORC1激酶活性，mTORC1抑制有助于阿司匹林联合索拉非尼的协同抗肿瘤活性[27]。对于阿司匹林的抗肿瘤作用，最近一项实验证明：阿司匹林通过AMPK-mTORC2Akt/ERK轴诱导MCL-1的表达，mTORC2和MCL-1的上调可能会影响阿司匹林的抗癌作用，而索拉非尼可以阻断阿司匹林诱导的MCL-1上调[28]，此实验再次证明索拉非尼联合阿司匹林在治疗HCC时可以相互协同。

3 小结

阿司匹林作为最常用的解热、镇痛、抗血小板聚集药物，其在肝癌的预防、治疗及预后中也发挥着重要的作用，其与多种抗肿瘤药物的协同作用，可能会成为治疗肝细胞癌的一种有效方法，由于目前关于阿司匹林在预防及治疗肝癌中的使用剂量、频率等仍未完全定论，且大多数肝癌患者存在门静脉高压风险，导致阿司匹林在临床上的使用仍是一个难题，也是我们需要逐步探索的一个问题，总体而言，阿司匹林在肝癌方面的研究为我们提供了新的思路。

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