Betatrophin在妊娠期糖尿病血清中的表达及临床意义

杜珂珂，徐峰，李喜梅

妊娠期糖尿病（GDM）是妊娠期间最常见的并发症，是导致不良妊娠结局的主要原因之一，同时被认为是2型糖尿病、高血压和动脉粥样硬化的先驱表现[1]。谢幸等[2]指出，随着人们膳食结构的变化及 GDM 诊断标准的重新设定，GDM的诊断率呈上升趋势。目前GDM的发病机制不明，近年来发现脂肪、肌肉因子和肝细胞分泌因子在GDM的发生发展中起着关键作用，促代谢因子（Betatrophin）作为新近发现的在人体肝脏组织表达的因子，已有多项临床研究表明其与代谢综合征密切相关[3-5]，并有学者认为Betatrophin参与了GDM的发生发展[6-7]。本研究拟选择前瞻性病例对照研究的方法，观察孕早期妊娠期糖尿病妇女、非糖尿病妊娠妇女及健康未孕育龄期妇女的血清Betatrophin水平，对Betatrophin与代谢指标的相关性进行研究，并探讨其对GDM的预测价值。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2016年 1月至2016年12月在浙江省温州市中心医院产科门诊进行定期的产前检查并在本院进行分娩的孕妇作为研究对象，于孕7～13周行早期唐氏综合征血清学筛查，同时预留空腹血标本。根据妊娠24～28周糖耐量试验（OGTT）的结果，孕妇的空腹，口服葡萄糖后1、2 h血糖结果中有一项超过上限值（上限值依次为5.1、10.0、8.5 mmol/L），则诊断为 GDM。采用电脑随机数字法从诊断为GDM的孕妇的总数中选取43例作为GDM组，同时随机选取同期匹配的糖耐量正常孕妇46例为糖耐量正常组（NGT），另外选取同期在本院体检中心体检的健康未孕育龄妇女37例为正常对照组（NC）组。多胎妊娠、妊娠期高血压、糖尿病合并妊娠、患有心肝肾疾病，短期内使用影响血糖、血脂药物者均不纳入本研究。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 所有参与试验的孕妇于孕7～13周清晨进行采血，要求试验对象需空腹8～12 h，抽取肘静脉外周血3 ml，在室温下静置后3 000 r/min离心20 min后，将血清置于EP管内，保存于－80℃冰箱待检。NC组妇女空腹8h以上体检时抽取空腹血，血液样本3 000 r/min离心20 min后，将血清置于EP管内,保存于－80℃冰箱备检。

1.2.2 一般临床资料的采集 对所有受试者首次入检时询问病史，记录年龄，脱去鞋袜、身体直立测定身高、体质量，身高精确至1 cm，体质量精确至0.1 kg，计算体质量指数（BMI）；GDM组与NGT组需记录采样孕周，孕晚期住院分娩前再次测量体质量，计算孕期体质量增加量，新生儿出生后记录体质量，精确至0.001 kg。

1.2.3 检测方法 血清Betatrophin水平测定使用的ELISA法，试剂盒购于武汉EIAab生物科技有限公司（该试剂盒批内和批间变异系数分别是 4.8%和7.2%）。血浆总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、空腹血糖（FBG）采用德国西门子公司ADVIA 1650自动生化分析仪测定；空腹胰岛素(FINS)采用美国雅培公司（ARCHITECT i2000SR）自动免疫分析仪测定；计算稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）=FBG（mmol/L）×FINS（mU/L）/22.5。

1.3 统计方法 应用SPSS18.0软件进行统计学分析。计量资料以均数±标准差表示，多组比较采用单因素方差分析，多组间两两比较采用LSD-比较；两组比较采用 检验。Betatrophin与糖脂代谢指标的相关性采用Pearson相关分析。采用Logistic回归分析方法对影响血清Betatrophin水平的相关因素进行分析测算，血清Betatrophin对GDM的发病预测分析采用曲线分析。＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组临床资料比较 GDM组和NGT组年龄、BMI与NC组差异均无统计学意义（均＞0.05）；GDM组与NGT组年龄、采样孕周、BMI差异无统计学意义（均＞0.05）；GDM组孕期增加体质量、新生儿出生体质量高于NGT组，差异均有统计学意义（均＜ 0.05）。见表 1。

2.2 3组糖脂代谢指标及血清 Betatrophin水平水平比较 GDM组及NGT组TG、TC、HDL-C及LDL-C水平均高于NC组（均＜0.05）；GDM组TG高于NGT组（＜ 0.05）；但两组TC、HDL、LDL水平差异均无统计学意义（均＞0.05）。GDM 组FINS、HOMA-IR高于NGT组及NC组，3组比较差异均有统计学意义（均＜0.05），3组FBG水平差异无统计学意义（＞ 0.05）。GDM组及NGT组血清Betatrophin水平均明显高于NC组（均＜ 0.01）；GDM组血清Betatrophin水平显著高于NGT组（＜0.01）。见表2。

2.3 血清Betatrophin水平与血糖、血脂、胰岛素相关性分析 Betatrophin与孕期体质量增加、TG、新生儿出生体质量呈正相关（ =0.673、0.658、0.532，均＜0.05）；Betatrophin与 TC、HDL-C、LDL-C、FBG、FINS及HOMA-IR无明显相关性（均＞ 0.05）。

2.4 Logistic回归分析 以GDM为因变量，血清Betatrophin为自变量，GDM孕早期Betatrophin显著高于非GDM孕妇，Logistic回归分析校正孕期体质量增加、TG、HOMA-IR、FINS的影响因素后，显示血清Betatrophin水平是GDM独立危险因素（：1.014；95%：1.002～1.026＜0.05）。见表3。

3 讨论

表1 3组临床资料比较

表2 3组糖脂代谢指标及血清Betatrophin水平比较

表3 Logistic回归分析各变量与GDM之间的相关性

图 1 妊娠早期血清 Betatrophin水平对GDM发病预测的曲线

国内外多项研究表明血清中 Betatrophin水平的升高与心血管疾病、糖尿病、肥胖、多囊卵巢综合征等疾病的发病风险增加有关[8-9]。有学者指出，与健康孕妇相比，GDM的Betatrophin水平明显升高，产后Betatrophin浓度显著下降，多变量统计分析GDM的状态是Betatrophin的独立正相关预测因素[7]。

以往关于孕期Betatrophin的研究，多选择妊娠24～28周行糖耐量试验同时抽取血标本进行检测，多项研究结果表明GDM患者外周血Betatrophin水平较糖耐量正常妊娠妇女明显升高[7,10-12]。本研究采用前瞻性病例对照研究的方法，发现妊娠早期Betatrophin明显高于非妊娠状态，妊娠期糖尿病孕妇血清Betatrophin水平在孕7～13周已明显高于糖耐量正常的孕妇，这表明GDM患者在妊娠早期阶段血清 Betatrophin水平已显著高于正常妊娠妇女，结合妊娠早期与妊娠中期研究结果，提示Betatrophin是GDM的重要血清标记物。

本研究表明血清Betatrophin水平与TG呈正相关，但与其他脂代谢指标TC、HDL、LDL无相关性。这与Trebotic等[10]及Wawrusiewicz-Kurylonek等[12]的研究结果一致，但与 Ebert等[7]及 Erol等[11]研究结论存在差异，可能与研究对象的种族、样本的体质量指数、样本量大小及测定方法差异相关。本研究认为Betatrophin水平上升与血脂变化关系密切，表明Betatrophin在脂代谢中存在一定的作用，推测 Betatrophin参与了脂代谢紊乱。Erol等[11]研究结果表明Betatrophin水平与FINS、HOMA-IR相关，但本研究未发现Betatrophin与FINS、HOMA-IR等指标存在相关性。鉴于 FINS与HOMAIR仅能评价空腹状态下的胰岛素水平和胰岛素抵抗水平，故两者无法全面地反映胰岛素抵抗程度。所以需进一步采用多种及更优指标来评定胰岛素抵抗，及其与Betatrophin的相关性，从而探讨Betatrophin是否参与了胰岛素抵抗。

临床与研究资料表明即使在孕妇血糖控制良好的情况下，仍然有较高的机会分娩出大于胎龄儿及巨大儿，这说明在GDM孕妇中，除了血糖以外，胎儿的生长发育还可能与其他因素相关[13]。笔者发现GDM组血清Betatrophin水平明显高于NGT组，且Betatrophin水平与新生儿出生体质量呈正相关，提示Betatrophin与GDM发生以及子代的生长发育密切联系，Betatrophin水平能够间接反映胎儿生长发育状况。

本文 Logistic回归分析显示血清Betatrophin水平是 GDM 独立危险因素。本研究提示以妊娠早期血清 Betatrophin＞246.08 pg/ml作为GDM早期诊断的界点，具有一定的准确性，且其灵敏度和特异度较高，阳性和阴性预测值较大，表明妊娠早期血清Betatrophin水平测定作为诊断试验真实性较好。妊娠期妇女在临床上诊断妊娠期糖尿病前其血清中Betatrophin水平已有变化，故通过对血清Betatrophin在孕早期的监测，能够对GDM发病的预测及预防提供有效的实验室依据。但本文提出的参考值与阴性预测值仅通过一次的断面研究得出，观察对象样本量较少，今后尚需要扩大样本量，并进行动态观察加以验证。

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