不同中医辨证分型急性脑梗死患者血浆D-二聚体、纤维蛋白原水平及纤溶酶原活性变化及其与气虚血瘀型急性脑梗死的关系研究

许乐宜 ，王静予 ，孔令军 ，费智敏 ，龚帆 ，王骏 ，俞晓飞

急性脑梗死致死率较高［1］，主要与供应脑血液循环的动脉出现粥样硬化和血栓形成而使血管管腔狭窄甚至闭塞、导致局灶性急性脑供血不足或中断有关［2］，也可因异常物体（包括固体、液体、气体）沿血液循环进入脑动脉或供应脑血液循环的颈动脉而造成血流阻断或血流量骤减，继而造成相应支配区域的脑组织软化、坏死［3］。急性脑梗死患者常于情绪激动以及睡眠状态下突然发病，常存在凝血及纤溶活性异常［4］，其在中医学中归属为“中风”范畴，风、火、痰、瘀为常见病因［5］，因此有多种辨证分型［6-9］。本研究旨在分析不同中医辨证分型急性脑梗死患者血浆D-二聚体、纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）水平及纤溶酶原活性（plasminogen，PLG:A）变化，并探讨血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A与气虚血瘀型急性脑梗死的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年1月—2017年4月上海中医药大学附属曙光医院收治的急性脑梗死患者63例作为研究组，均符合《各类脑血管疾病诊断要点》［10］中急性脑梗死诊断标准并经颅脑CT、脑血管造影检查证实，中医辨证分型参照《中风病诊断疗效评定标准》［11］，均未服用抗凝、溶栓等药物；排除合并心、肾等功能不全患者及有器官移植术史者。研究组患者中男32例，女31例；年龄50～75岁，平均年龄（57.2±3.3）岁；中医辨证分型：痰湿蒙神型17例、风火上扰型22例、气虚血瘀型24例。另选取同期在本院体检健康者60例作为对照组，其中男31例，女29例；年龄51～76岁，平均年龄（58.1±3.6）岁。对照组受试者纳入标准：（1）年龄50～80岁；（2）自愿参与本研究。排除标准：（1）存在其他影响研究结果的疾病者；（2）妊娠期及哺乳期妇女。两组受试者性别（χ2=0.009）、年龄（t=1.446）比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经上海中医药大学附属曙光医院医学伦理委员会审核批准，患者均签署知情同意书。

1.2 观察指标

1.2.1 血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A 抽取两组受试者晨起空腹肘静脉血4 ml，注入含3.2%枸橼酸钠的抗凝管中，缓慢颠倒混匀4～5次，防止血液凝固，-4 ℃、3 000 r/min 离心 10 min（离心半径 15 cm），留取上清液并置于-80 ℃冰箱保存待测，现用现融，避免反复冻融。采用荧光免疫层析法检测血浆D-二聚体水平，试剂盒购自武汉明德生物科技股份有限公司；采用免疫比浊法检测血浆FIB水平，试剂盒购自中生北控生物科技股份有限公司；采用发色底物法检测PLG:A，具体方法如下：于血浆中加入链激酶（SK）（上海凯茂生物医药有限公司生产）和发色底物S-2251（宜昌众意泰贸易有限公司生产），血浆纤溶酶原（PLG）在SK作用下转变为纤溶酶（PL），后者作用于发色底物并释出对硝基苯胺（PNA）而显色，显色的深浅与PL水平呈正相关，进而计算PLG:A。

1.2.2 神经功能缺损程度 采用美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评定两组受试者神经功能缺损程度，包括11条项目，总分42分，其中0～1分为正常或近乎正常，1～4分为轻度卒中/小卒中，5～15分为中度卒中，15～20分为中重度卒中，21～42分为重度卒中，评分越高提示神经功能缺损程度越严重。

1.3 统计学方法 采用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，符合正态分布的计量资料以（x± s）表示，两组间比较采用成组t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间比较采用q检验；血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A与气虚血瘀型急性脑梗死患者NIHSS评分的相关性分析采用Pearson相关分析；绘制ROC曲线以评价血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A联合检测对气虚血瘀型急性脑梗死的诊断价值。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组受试者血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A、NIHSS评分比较 研究组患者血浆D-二聚体、FIB水平及NIHSS评分高于对照组，PLG:A低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05，见表1）。

2.2 不同中医辨证分型急性脑脑梗死患者血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A、NIHSS评分比较 不同中医辨证分型急性脑梗死患者血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A、NIHSS评分比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；气虚血瘀型急性脑梗死患者血浆D-二聚体水平、NIHSS评分高于痰湿蒙神型、风火上扰型急性脑梗死患者，血浆FIB水平高于风火上扰型急性脑梗死患者，PLG:A低于风火上扰型急性脑梗死患者，差异有统计学意义（P＜0.05，见表2）。

表1 两组受试者血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A、NIHSS评分比较（x± s）Table 1 Comparison of plasma levels of D-dimer and FIB，PLG:A and NIHSS score between the two groups

表2 不同中医分辩证型急性脑梗死患者血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A、NIHSS评分比较（x± s）Table 2 Comparison of plasma levels of D-dimer and FIB，PLG:A and NIHSS score in acute cerebral infarction patients with different TCM syndromes

2.3 相关性分析 Pearson相关分析结果显示，血浆D-二聚体、FIB水平与气虚血瘀型急性脑梗死患者NIHSS评分呈正相关（r=0.609、0.706，P＜0.05，见图1A、B），PLG:A与气虚血瘀型急性脑梗死患者NIHSS评分呈负相关（r=-0.718，P＜0.05，见图1C）。

2.4 诊断价值 设X1=血浆D-二聚体水平，X2=血浆FIB水平，X3=PLG:A，则气虚血瘀型急性脑梗死预测概率值的回归模型Y=1/（1+e0.921X1+0.996X2+1.474X3+8.368）；绘制ROC曲线发现，血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A联合检测诊断气虚血瘀型急性脑梗死的曲线下面积（AUC）为0.740〔95%CI（0.706，0.844）〕，灵敏度为59.2%，特异度为84.2%，最佳截断值为1.397（见图2）。

3 讨论

急性脑梗死指脑部供血突然中断引起的脑组织坏死，其发病机制为供应脑血液循环的动脉出现粥样硬化，使血管管腔内壁逐渐狭窄，动脉粥样硬化斑块破裂使血小板聚集而易形成血栓，导致血管管腔进一步狭窄，因血栓自身重力作用滑入管腔，堵塞脑动脉，导致脑组织供血不足及缺氧；也可因异物沿血液循环进入脑动脉或颈动脉阻塞血流而造成脑组织坏死［12］。有研究表明，凝血和纤溶异常是血栓性疾病的主要病理改变［13］，因此凝血机制与纤溶状态与急性脑梗死的关系成为重要研究课题。

图1 血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A与气虚血瘀型急性脑梗死患者NIHSS评分的相关性分析Figure 1 Correlations of plasma levels of D-dimer and FIB，PLG:A with NIHSS score in acute cerebral infarction patients diagnosed as Qi-deficiency and Blood-stasis syndrome

图2 血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A联合检测诊断气虚血瘀型急性脑梗死的ROC曲线Figure 2 ROC curve for diagnostic value of combined detection of plasma levels of D-dimer and FIB，and PLG:A on acute cerebral infarction diagnosed as Qi-deficiency and blood-stasis syndrome

中医学理论认为，急性脑梗死属“中风”范畴，常见病因为风、火、痰、瘀。中医的“风”指疾病起病急骤、变化迅速、头晕头痛，以突然昏迷、半身不遂、口歪眼斜、偏身麻木等中的一种或多种症状［14］。急性脑梗死的血瘀证是最基本证型，其与风证合并组成的风瘀证可作为急性脑梗死的基本中医证型，其中气虚血瘀型表现为“面色淡白或晦滞，身倦乏力，气少懒言，疼痛如刺且常见于胸胁，痛处不移，拒按，舌淡暗或有紫斑，脉沉涩”。杨利等［15］在研究急性中风中医证候分布情况时发现，气虚血瘀证型较为常见，占17.4%，且缺血性中风以阴证居多。D-二聚体是纤维蛋白与活化因子交联后经PL水解产生的降解产物，有研究表明，D-二聚体水平突然升高与血栓形成密切相关［16］。FIB也称凝血因子Ⅰ，相对分子量为 3 400 000，由 2 964个氨基酸组成，是肝脏内合成的具有凝血功能的蛋白质，血浆FIB水平升高提示血液处于高凝状态；此外，FIB还是一种炎性标志物，大量FIB聚集于脑血管内壁可促进动脉粥样硬化进展并刺激血小板聚集，继而导致血液黏稠度增加，血栓形成风险升高。司力等［17］研究表明，急性脑梗死患者血浆FIB水平高于正常人，且血浆FIB水平升高是急性脑梗死的危险因素，血浆FIB水平变化对急性脑梗死的诊断与病情评估具有重要指导意义。王兰桂等［18］研究表明，急性脑梗死患者血浆FIB、D-二聚体水平明显升高，且与病情严重程度相关；沈雪莉等［19］研究表明，急性脑梗死患者血浆FIB、D-二聚体水平明显高于正常人。本研究结果显示，研究组患者血浆D-二聚体、FIB水平高于对照组，与上述研究结果一致；且气虚血瘀型急性脑梗死患者血浆D-二聚体、FIB水平高于痰湿蒙神型、风火上扰型急性脑梗死患者，表明血浆D-二聚体、FIB水平与急性脑梗死中医辨证分型有关，有助于明确急性脑梗死病因病机、筛查气虚血瘀型急性脑梗死，分析其可能机制为：D-二聚体、FIB参与调节人体生理功能，血浆D-二聚体、FIB水平升高提示氧化应激反应及炎性反应较重，易导致血管损伤加重并激活凝血机制，从而造成机体高凝低溶状态。

PLG是水解纤维蛋白酶的无活性前体，其经组织激活物、尿激酶等多种酶共同激活后成为PL，可降解FIB以及多种凝血因子，可维持血管通畅，病理状态下因纤溶系统受损而不能有效清除FIB，致使FIB在血管内大量聚集，进而导致栓塞形成。机体纤溶过程中PLG在激活剂的作用下将会被激活为PL，而血液中PL被激活后将会迅速与α2-抗纤溶酶结合并形成纤溶酶-α2-抗纤溶酶原复合物，继而失去活性。本研究结果显示，研究组患者PLG:A低于对照组，提示急性脑梗死与纤溶和凝血异常有关，脑梗死急性期内有明显的纤维蛋白形成和降解，存在明显的血栓形成和继发性纤溶活性增高情况。

本研究中Pearson相关分析结果显示，血浆D-二聚体、FIB水平与气虚血瘀型急性脑梗死患者NIHSS评分呈正相关，而PLG:A与气虚血瘀型急性脑梗死患者NIHSS评分呈负相关，进一步绘制ROC曲线发现，血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A联合检测诊断气虚血瘀型急性脑梗死的AUC为0.740，灵敏度为59.2%，特异度为84.2%，最佳截断值为1.397，提示血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A与气虚血瘀型急性脑梗死患者神经功能缺损程度有关，且三者联合检测对气虚血瘀型急性脑梗死的诊断价值较高，临床可通过检测血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A而判断急性脑梗死患者神经功能缺损程度、辅助诊断气虚血瘀型急性脑梗死。

综上所述，不同中医辨证分型急性脑梗死患者血浆D-二聚体、FIB水平均升高，PLG:A均降低；血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A与气虚血瘀型急性脑梗死患者神经功能缺损程度有关，且三者联合检测对气虚血瘀型急性脑梗死的诊断价值较高；但本研究样本量较小且急性脑梗死患者中医辨证分型缺乏精准的标准，因此尚不能明确不同中医辨证分型急性脑梗死患者血浆D-二聚体、FIB水平及PLG:A变化机制，并可能存在一定选择偏倚，有待进一步扩大样本量进行深入分析。

作者贡献：许乐宜、俞晓飞进行试验设计与实施、资料收集整理、撰写论文并对文章负责；王静予、孔令军、龚帆、王骏进行试验实施、评估、资料收集；许乐宜进行结果分析和解释；费智敏、俞晓飞进行质量控制及审校。

本文无利益冲突。