肾功能正常的冠心病患者血清胱抑素C、超敏C 反应蛋白水平及内皮祖细胞数量变化及其临床意义

李明，张亚玲，赖金川，郑伟，谭刚 ，杨秀云，程标

冠心病属于临床常见疾病，是由冠状动脉粥样硬化导致管腔狭窄或阻塞引起的心肌缺血、缺氧或坏死性心脏病，其已成为严重威胁人类生命健康的重要疾病之一，而动脉粥样硬化、内皮功能损伤是促进冠心病发生、发展的重要因素［1-4］。胱抑素 C（cystatin C，Cys-C）是反映早期肾功能损伤的主要生物标志物之一，有研究表明其可通过抑制酶活性而参与动脉粥样硬化的发生、发展［1］。超敏 C 反应蛋白（hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP）是炎性因子，可通过炎性反应机制而参与动脉粥样硬化的病理生理过程［2］。内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）是一种能分化成血管内皮细胞的前体细胞，既可参与修复损伤血管内皮及血管新生，又可作为反映血管内皮功能损伤程度的临床指标［3-4］。为排除肾功能异常对血清Cys-C水平的影响，本研究选取肾功能正常的冠心病患者，并探讨其血清Cys-C、hs-CRP水平及EPCs数量变化及其临床意义。

1 资料与方法

1.1 纳入与排除标准 纳入标准：（1）肾功能正常者；（2）年龄41～75岁。排除标准：（1）估算肾小球 滤 过 率（eGFR）＞120 ml·min-1·1.72（m2）-1或 ＜90 ml·min-1·1.72（m2）-1，血肌酐≥ 132.6 μmol/L 者；（2）合并严重肝功能不全、感染性疾病、自身免疫性疾病、严重外周血管疾病、结缔组织疾病、肿瘤者；（3）近2周内服用过叶酸、维生素B12、肾上腺皮质激素者；（4）合并心肌病、瓣膜性心脏病、频发心律失常者。

1.2 一般资料 选取2016年5—12月在四川省医学科学院·四川省人民医院心内科就诊的疑似冠心病患者128例，均行冠状动脉造影检查，其中冠心病患者95例作为冠心病组，非冠心病患者33例作为对照组；根据冠状动脉病变支数将冠心病患者分为单支病变组27例，双支病变组36例，多支病变组32例；根据Gensini积分将冠心病患者分为高分组（Gensini积分＞82分）29例，中分组（Gensini积分32～82分）40例，低分组（Gensini积分＜32分）26例。本研究经四川省医学科学院·四川省人民医院医学伦理委员会审核批准，所有患者对本研究知情同意并签署知情同意书。

1.3 冠状动脉造影检查 采用Judkins法行冠状动脉造影，并由固定专业医师进行分析，以管腔狭窄率≥50%定义为冠状动脉病变，根据病变累及支数分为单支病变、双支病变（累及左主干纳入双支病变）及多支病变。采用Gensini积分评估冠状动脉狭窄程度，Gensini积分标准［5-6］：狭窄率＜25%记为1分，25%～49%记为2分，50%～74% 记为 4分，75%～89%记为 8分，90%～98%记为16分，99%～100%记为32分；不同冠状动脉分支系数：左主干×5，左前降支近段×2.5、中段×1.5、远段×1，第一对角支×1，第二对角支×0.5，左回旋支近段×2.5、远段和后降支均×1、后侧支×0.5，右冠状动脉近、中、远段和后降支均×1。冠状动脉狭窄程度计分乘以各冠状动脉分支系数为冠状动脉积分，所有冠状动脉积分之和为Gensini积分。

1.4 观察指标

1.4.1 一般资料 收集所有患者一般资料，包括性别、年龄、高血压发生情况及吸烟史。

1.4.2 实验室检查指标 采用贝克曼公司生产的S600型全自动生化分析仪检测总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、血尿素、血肌酐、血尿酸，采用免疫比浊法检测血清Cys-C及hs-CRP水平，试剂盒均购自北京利德曼生物科技有限公司。采用流式细胞仪检测CD34+细胞分数，具体如下［7］：（1）所有患者于冠状动脉造影检查时取动脉血2 ml；（2）吸取CD34单克隆抗体5 μl加入加样管底部；（3）吸取乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝管中全血25 μl加入加样管底部与CD34单抗混匀；（4）加样管中25 ℃下孵育20 min；（5）吸取溶血剂A液300 μl/B液133 μl加入加样管中混匀，常温下放置5 min后上CYTOMICS FC500流式细胞仪（美国BD公司生产）检测；（6）流式细胞仪自动分析计算出CD34+细胞分数。

1.5 统计学方法 采用SPSS 17.0统计软件进行数据处理，符合正态分布的计量资料以（x± s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用q检验，两组间比较采用两独立样本t检验；计数资料分析采用χ2检验；血清Cys-C、hs-CRP水平及CD34+细胞分数与肾功能正常的冠心病患者Gensini积分的关系分析采用Pearson相关分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对照组和冠心病组患者一般资料和实验室检查指标比较 对照组和冠心病组患者性别、年龄、高血压发生率、吸烟史、TC、TG、HDL-C、血尿素及血尿酸比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；冠心病组患者LDL-C、血肌酐及血清Cys-C、hs-CRP水平高于对照组，CD34+细胞分数低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05，见表1）。

2.2 不同冠状动脉病变支数冠心病患者血清Cys-C、hs-CRP水平及CD34+细胞分数比较 不同冠状动脉病变支数冠心病患者血清Cys-C、hs-CRP水平比较，差异有统计学意义（P＜0.001）；双支病变组、多支病变组患者血清Cys-C、hs-CRP水平高于单支病变组，多支病变组患者血清Cys-C、hs-CRP水平高于双支病变组，差异有统计学意义（P＜0.05）。不同冠状动脉病变支数冠心病患者CD34+细胞分数比较，差异无统计学意义（P＞0.05，见表2）。

2.3 不同Gensini积分冠心病患者血清Cys-C、hs-CRP水平及CD34+细胞分数比较 不同Gensini积分冠心病患者血清Cys-C、hs-CRP水平及CD34+细胞分数比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；中分组、高分组患者血清Cys-C、hs-CRP水平高于低分组，高分组患者血清Cys-C、hs-CRP水平高于中分组，高分组患者细胞分数低于低分组，差异有统计学意义（P＜0.05，见表3）。

表1 对照组和冠心病组患者一般资料和实验室检查指标比较Table 1 Comparison of general information and laboratory examination results between control group and CHD group

表2 不同冠状动脉病变支数冠心病患者血清Cys-C、hs-CRP水平及CD34+细胞分数比较（x± s）Table 2 Comparison of serum levels of Cys-C and hs-CRP，andcell percentage in CHD patients with different number of stenosed coronary vessels

表2 不同冠状动脉病变支数冠心病患者血清Cys-C、hs-CRP水平及CD34+细胞分数比较（x± s）Table 2 Comparison of serum levels of Cys-C and hs-CRP，andcell percentage in CHD patients with different number of stenosed coronary vessels

注：与单支病变组比较，aP＜0.05；与双支病变组比较，bP＜0.05。

组别 例数 Cys-C（mg/L）hs-CRP（mg/L）CD34+细胞分数（%）单支病变组 27 2.72±1.46 4.22±0.41 0.355±0.219双支病变组 36 3.79±2.09a 6.01±0.80a 0.308±0.280多支病变组 32 4.92±1.37ab 8.06±1.91ab 0.228±0.176 F值 12.285 71.602 2.305 P值 ＜0.001 ＜0.001 ＞0.05

表3 不同Gensini积分冠心病患者血清Cys-C、hs-CRP水平及细胞分数比较（）Table 3 Comparison of serum levels of Cys-C and hs-CRP，and ofcell percentage in CHD patients with different Gensini score

表3 不同Gensini积分冠心病患者血清Cys-C、hs-CRP水平及细胞分数比较（）Table 3 Comparison of serum levels of Cys-C and hs-CRP，and ofcell percentage in CHD patients with different Gensini score

注：与低分组比较，aP＜0.05；与中分组比较，bP＜0.05

+细胞分数（%）低分组 26 2.83±1.68 3.88±1.01 0.415±0.211中分组 40 3.86±2.65a 5.96±0.90a 0.275±0.235高分组 29 4.79±2.01ab 8.39±1.01ab 0.193±0.119a F值 22.223 292.958 19.954 P 值 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01组别 例数 Cys-C（mg/L）hs-CRP（mg/L）CD34

2.4 相关性分析 Pearson相关分析结果显示，血清Cys-C、hs-CRP水平与肾功能正常的冠心病患者Gensini积分呈正相关（r值分别为0.328、0.810，P＜0.01）；细胞分数与肾功能正常的冠心病患者Gensini积分呈负相关（r=-0.444，P＜0.01）。

3 讨论

目前，心血管疾病是导致我国城乡居民死亡的首位疾病，冠心病作为常见心血管疾病类型，近年来其发病率呈逐年上升趋势，已成为严重的公共卫生问题之一［8］。目前研究表明，冠心病主要由动脉粥样硬化斑块形成所致，而炎性反应、内皮功能损伤、应激反应等多种因素参与动脉粥样硬化形成过程［4］。

Cys-C是近年来发现的冠心病新危险因素，研究表明其可通过调节动脉管壁蛋白溶解与抗蛋白溶解而参与血管壁基质重构，其降解产物可通过影响中性粒细胞迁移、参与炎性反应过程而诱发动脉粥样硬化形成［9］。Cys-C是肾功能损伤的早期检测指标，近年研究报道其与冠心病患者冠状动脉狭窄程度密切相关［10-11］。本研究结果显示，冠心病组患者血清Cys-C水平高于对照组；双支病变组、多支病变组患者血清Cys-C水平高于单支病变组，多支病变组患者血清Cys-C水平高于双支病变组；血清Cys-C水平与肾功能正常的冠心病患者Gensini积分呈正相关，提示肾功能正常的冠心病患者血清Cys-C水平升高，且血清Cys-C水平与患者冠状动脉病变严重程度有关。

hs-CRP是一种经典炎性因子，国内外研究发现其不仅参与动脉粥样硬化形成过程，还与冠状动脉病变严重程度有关［12-14］。本研究结果显示，冠心病组患者血清hs-CRP水平高于对照组；双支病变组、多支病变组患者血清hs-CRP水平高于单支病变组，多支病变组患者血清hs-CRP水平高于双支病变组；血清hs-CRP水平与肾功能正常的冠心病患者Gensini积分呈正相关，提示肾功能正常的冠心病患者血清hs-CRP水平升高，且血清hs-CRP水平与患者冠状动脉病变严重程度有关。

EPCs是一种能分化为血管内皮细胞的前体细胞，其在维持内皮功能、修复损伤血管及血管新生过程中具有重要作用。内皮功能障碍被认为是动脉粥样硬化的始动环节，而EPCs数量减少及功能降低均影响血管内皮修复及血管新生，导致血管内膜完整性受损，促进动脉粥样硬化发生、发展［15-16］。既往研究表明，随着冠状动脉病变严重程度加重，EPCs数量减少、EPCs功能下降［16-17］。为EPCs表面标志物，本研究结果显示，冠心病组患者细胞分数低于对照组，高分组患者细胞分数低于低分组，且细胞分数与肾功能正常的冠心病患者Gensini积分呈负相关，提示肾功能正常的冠心病患者EPCs数量减少，且EPCs数量与患者冠状动脉病变严重程度有关；但不同冠状动脉病变支数患者细胞分数间无差异，具体原因尚需要进一步探究。

综上所述，肾功能正常的冠心病患者血清Cys-C、hs-CRP水平升高，EPCs数量减少，而检测血清Cys-C、hs-CRP水平及EPCs数量对冠心病及冠状动脉病变严重程度具有一定预测价值。但本研究样本量较小，结论还有待大样本量研究进一步证实。

作者贡献：李明进行试验设计与实施、资料收集整理、撰写论文并对文章负责；张亚玲、郑伟、谭刚、杨秀云进行试验实施、评估、资料收集；赖金川、程标进行质量控制及审校。

本文无利益冲突。