江西省269例脐血染色体核型临床分析

王欣荣，刘艳秋

(江西省妇幼保健院产前诊断中心，南昌 330006)

染色体疾病是导致胎儿出生后智力低下、生长发育迟缓的常见原因之一，是严重的先天性疾病，且目前缺乏有效的治疗方法[1]。因此通过产前诊断及时发现并阻止有染色体疾病胎儿儿的出生是优生工作的重点。由于绒毛穿刺和羊水穿刺的手术时间均有孕周的限制，而脐血穿刺的手术时间受孕周限制较小，因此对于较大孕周（孕22周以上）的有产前诊断指征的孕妇行脐血染色体检查已成为一种不可或缺的产前诊断方式。我中心自2014年在江西省率先开展脐血穿刺手术以来，已陆续为多例孕妇行脐血穿刺及染色体核型分析，本文对269例脐血染色体核型结果进行总结，探讨脐血染色体异常核型与产前诊断各指征的关系，从而为今后的产前诊断工作提供客观的实验数据。

1 对象与方法

1.1 临床资料 选择2014年1月-2017年8月在我院就诊具有脐血穿刺指征、自愿行脐血穿刺产前诊断的孕妇277例，年龄为18-45岁，孕周为24-30周。我们将脐血穿刺产前诊断的指征分为8组，分别是：高龄（≥35岁）、唐氏征筛查高风险、NIPT阳性、不良生育史、羊水染色体核型分析提示嵌合体、夫妇一方为染色体异常携带者、孕期不良接触史、孕中期或孕晚期B超胎儿异常，例如：心脏结构畸形，心室强光斑，脉络丛囊肿，脑室增宽，颈部皮肤层增厚，四肢畸形，唇腭裂，宫内发育迟缓，羊水过多或过少，鼻骨短小或缺失，肠管回声增强，胎儿水肿等情况。

1.2 方法 在无菌条件下，在B超引导下，经腹壁进行脐血穿刺，抽取脐血2ml，注入无菌肝素钠管中送实验室，进行常规染色体培养、制片、G显带，计数30个分散好、中等长度的中期分裂相染色体，用德国莱卡公司染色体自动分析仪分析3-5个核型，发现嵌合体时，计数100个核型后计算比例。根据国际人类细胞遗传学命名体系(ISCN2009)描述染色体核型。

1.3 统计分析 将数据录入excel，数据分析采用率和构成比表示。采用SPSS 18.0统计软件，组间计数和计量资料比较分别行χ2和t检验，P<0.05为有统计学差异。

2 结果

2.1 脐血穿刺不同指征异常染色体核型检出情况脐血细胞常规培养277例，8例培养不成功，培养成功率为97.11%。符合卫生部产前诊断实验室关于脐血细胞培养的要求。共发现异常核型59例，异常核型检出率为21.93%。其中NIPT阳性异常染色体核型检出率最高，为78.57%，而B超胎儿异常染色体异常核型检出例数最多，为45例。脐血穿刺各指征染色体异常检出情况具体情况见表1。

2.2 异常染色体核型类型分析 59例异常核型中，染色体数目异常最多，为26例，占44.07%，而其中21三体19例，占32.20%。其次是染色体多态性，为17例，占28.81%。结构异常中以倒位最多，是5例，占8.47%。具体见表2。

3 讨论

3.1 脐血穿刺术在产前诊断中的价值 产前诊断就是对胎儿进行先天缺陷和遗传性疾病的诊断。其目的不仅为符合产前诊断指征的孕妇提供可靠的信息，使她们能够在妊娠期间对胎儿的去留作出适当的选择，而且对于B超已确定畸形的胎儿进行染色体分析，还可以协助医生对孕妇的下次妊娠进行有效指导。由于脐血穿刺术相比绒毛穿刺和羊水穿刺术，具有⑴较大的孕周适用范围，孕22-32周；⑵较快的出具染色体核型结果：脐血从手术取样到出具染色体核型分析报告一般一周即可，较绒毛和羊水的时间要缩短很多；⑶培养成功率和特异性高：可对绒毛或羊水中培养失败进行补救，也可对绒毛或羊水中培养中出现的嵌合现象进行确诊等优点，因此对于孕中期错过唐氏筛查或羊水穿刺的高危孕妇，和孕中晚期B超提示胎儿异常的孕妇，以及绒毛及羊水培养失败或培养出现嵌合体时，行脐血穿刺进行染色体核型分析就显得尤为重要[2]。

表1 脐血穿刺各指征染色体检出情况

表2 染色体异常核型分类

3.2 胎儿异常核型分布分析 本中心脐血染色体异常核型检出率为21.93%，远远高于国内郭小宝等[3]报道5.5%的异常率，可能因为我们研究的样本里大部分都是B超胎儿异常的高危孕妇，而且我们将染色体多态性也归类为异常核型，所以异常检出率较高。在检出的59例异常核型中，三体检出率最高，占异常核型的44.07%(26/59)，其中21-三体19例、18-三体5例，13三体1例，说明三体核型仍然是胎儿最常见的异常核型，三体中又以21-三体为主，这与国内外的报道一致[4]。NIPT是运用高通量测序技术检测母血内胎儿游离DNA的一种新技术，目前主要用于胎儿21-三体、18-三体、13-三体的产前检测，也用于性染色体的非整倍体的检测。本中心对14例NIPT检测高风险的的孕妇行脐血穿刺染色体核型分析，发现11例异常核型 （检出率78.57%）：其中8例21三体高风险，脐血确诊6例（检出率75%）；1例NIPT18三体高风险，确诊1例（检出率100%）；2例性染色体高风险，确诊2例 （检出率100%）；3例其他异常（NIPT提示染色体微缺失或微重复或提示其他染色体数目异常等），确诊1例（检出率33.33%）。本中心的NIPT 21三体高风险经过脐血染色体检查，符合率仅75%，较国内其他中心明显偏低[5]，主要原因可能跟样本数较少有关。胎儿超声检查在产前诊断中有着重要的作用，特别是超声检查异常往往提示胎儿染色体异常的可能性较大，如本中心对246例妊娠中晚期超声提示异常的孕妇行脐带穿刺，发现45例异常核型，检出率18.29%，在8组脐血穿刺指征中异常染色体检出率排第二位。其中28例是染色体数目异常和结构异常，另外17例是染色体多态性，检出率为6.91%。染色体多态是一种常见的染色体结构变异，在人群中的携带率为2.6%[6]，主要是指染色体结构或带型强度的微小变异，常涉及遗传上相对不活跃、含高度重复DNA结构的异染色质区。以往的观点认为，染色体多态属于正常形态变异，不引起表型和功能的异常，因而不具有临床意义。但最近几年越来越多的研究表明，染色体多态性与反复稽留流产、胎死宫内、生育畸形儿、男性少精、弱精或无精、女性不孕等生殖异常有一定相关性[6，7]。本文B超胎儿异常中染色体多态检出率为6.91%，较普通人群携带率（2.6%）明显要高很多，提示我们要对B超胎儿异常合并染色体多态的情况引起重视，要密切观察和随访。我们相信，随着医学技术的不断进步和发展，染色体多态性作用机理及遗传效应将得到进一步了解，为产前诊断提供更好的理论依据。

综上，近几年随着新技术如NIPT和四维彩超在医院越来越普及，尤其是四维彩超在临床的大规模使用，越来越多的胎儿结构异常在妊娠中晚期即被发现，如本研究收集269例中就有多达246例因此原因来我院就诊，而脐血穿刺术相对绒毛取样及羊水穿刺而言，具有适用孕周广泛、过程简便快速等优点，将在今后的产前诊断工作中发挥更大的作用。