实验动物山羊血型鉴定初探

王振芳,武永霞,胡佳丽

(冀中能源邢台矿业集团总医院,河北 邢台 054000)

随着人们对健康指数期盼越来越高,临床医生在防病治病岗位上,不断探索新技术、新术式。在探索新术式时,某些高难度的术式,需要先在动物身上做实验。本院骨科研究中心,选用当地山羊开展新术式,在开展新术式中有的山羊因出血过多而导致实验延长,甚至山羊死亡。此时输血在山羊生命支持中扮演着重要作用。因此,快速和准确鉴定血型,是保证山羊安全有效输血的首要任务。现将山羊术前血型鉴定情况报告如下。

1 材料与方法

1.1 被检山羊 被检山羊来自河北省邢台县当地,共31只山羊。其中公羊12只,母羊19只。山羊年龄为1～2岁;体重为23.34 kg,平均体重为28.5 kg。

1.2 主要试剂与仪器 A型红细胞、B型红细胞及抗筛红细胞(批号20170907、20171029)为长春博德生物技术有限责任公司生产;微柱凝胶血型卡(批号20170815),FYQ免疫微柱孵育器,TD-3A型血型血清学离心机均为长春博德生物技术有限责任公司生产,2005-2型血库专用离心机(BaSo贝索)。

1.3 方法

1.3.1 血样采集及处理 山羊颈静脉采集3 mL EDTA抗凝全血,3 400.r/min离心,将血浆分离移入另一试管待检。

1.3.2 血型检测 (1)将山羊血标本的压积红细胞洗涤3次,配成0.8%红细胞悬液;(2)取出微柱凝胶血型卡,标记检测号,撕开封口膜;(3)微柱凝胶血型卡前三孔从左到右依次各加入山羊红细胞悬液50 μL;微柱凝胶血型卡后三孔从左到右依次加入山羊血浆各50 μL,再分别加入0.8%O型红细胞、A型红细胞、B型红细胞各50 μL,离心5 min观察结果。

2 结果

山羊红细胞血型结果 山羊红细胞血型检测结果见表1,从表1可知,山羊红细胞血型正反定型类似人类红细胞A B O系统的O型。Rh(D)阴性;

3 讨论

过去人们认为只有人才有血型,现在随着社会的进步,检测方法越来越先进,发现动物的血型也很复杂,如猫有6种血型,马有9～10种血型,猪有15种血型,牛有40多种血型。山羊有几种血型至今未见详细报道。目前尚无市售山羊的血型抗原抗体检测专用试剂,笔者选用微柱凝胶血型卡对当地山羊进行了血型检测。微柱凝胶卡是近年来兴起的一项免疫学检测新技术,其原理是微柱管中的凝集间隙可利用凝胶的浓度来调节,使其间隙只能允许单个红细胞通过,可将聚集红细胞与游离红细胞分开,在通过离心作用,若红细胞沉于凝胶管底部为阴性,在管上部为阳性【1-3】。用山羊的红细胞分别加入微柱凝胶的单克隆抗-A、抗-B及抗-D中,再用山羊的血清分别加入Oc、Ac、Bc出现类似人类“O”型,Rh(D)阴性血型。由表1发现山羊抗原抗体反应结果有悖于人类O型血清学反应格局,即所选实验山羊血清加入人的O型红细胞后,在血型检测和抗体筛查中均出现凝集现象,这一异常现象进一步证明了山羊的血清中存在着抗人类红细胞抗体。由于实验的标本数量少,还有待于今后继续扩大检测范围,做大数据深入研究,不断发现山羊的其他血型。

总之,了解掌握山羊的血型有其重要意义,尤其有助于山羊在新术式实验过程中提高实验效果,延长山羊的生命,也有助于山羊的优种优育以及创伤输血救治。

表1 31只山羊血型检测结果