饲用甜高粱青贮对绵羊血常规及血清内毒素浓度的影响

侯明杰,周恩光 ,付晓悦,尚占环,王虎成

(1.兰州大学草地农业生态系统国家重点实验室兰州大学农业部草牧业创新重点实验室兰州大学草地农业科技学院,甘肃 兰州 730020;2.兰州大学生命科学学院,甘肃 兰州 730000)

大力发展草产业,不仅关乎我国经济的发展,而且对国家粮食安全和生态保护具有重要的意义。近30年来,随着我国经济结构变化以及政府对草产业发展的大力支持,我国草业的产业化、现代化程度得以不断提高,已经基本形成了一个较为完善的产业体系。但是我国农业受美国现代农业模式影响,不顾国情片面追求规模化,导致养殖业与种植业严重脱节。这种种养分离的农业生产方式有很大弊病,是影响我国农业可持续发展的最大隐患。实行种养结合循环农业生产方式,不仅能够降低粮食种植成本,还能降低畜禽养殖成本[1]。饲用甜高粱适应性强、耐刈割、含糖量高,是优良的饲料作物[2-5],对有效解决我国人多地少的矛盾和推动我国种养结合循环农业生产方式的发展意义重大。目前在我国西北地区,甜高粱青贮在奶牛、肉牛饲粮中已经得到广泛的应用,青贮饲料由于其较低的pH值,过度采食可能会引起瘤胃酸中毒、拉稀、腹泻等症状,高比例饲喂甜高粱青贮是否会对绵羊健康产生影响,在种养结合背景下如何将甜高粱青贮科学应用于肉羊产业,未见系统研究。通过血常规,观察数量变化及形态分布,判断疾病,是兽医诊断病情常用的辅助检查手段,而血液内毒素(LPS)浓度是动物多种并发症的致病因子[6]。基于此,本研究以肉羊为研究对象,通过饲喂传统饲粮(玉米青贮)和甜高粱青贮,对比研究试羊在不同饲喂阶段(第30、第60、第90天)血常规参数及血液 LPS浓度的变化,为绵羊新型饲料资源的开发利用以及甜高粱在西北地区的推广提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 试验方案 2016年7月,于甘肃省定西市安定区“兰州大学肉羊养殖产学研基地”选取体况一致的3月龄杜泊羊、小尾寒羊各12只,随机将同一品种试羊等数分为2组,分别饲喂裹包青贮(玉米青贮或甜高粱青贮),青贮料自由采食,精饲料及苜蓿颗粒按动物体重的1%及0.5%补饲,准确计算日采食量。试验羊进行单栏饲养,自由饮水。甜高粱青贮、玉米青贮、苜蓿颗粒及精料补充料养分含量见表1和表2。于试验期第30、第60、第90天分别采取血液,测定血常规及LPS浓度。

1.2 样品采集与预处理 分别在试验期第30、60、90天,晨饲前用注射器经颈静脉采血,一部分于抗凝管,2小时之内测定血常规,另一部分经3 500 r/min离心15 min,收集血清,与-20℃保存,以备检测 LPS浓度。

表1 粗饲料养分含量 (g/kg DM)

表2 试验精料组成及营养水平 (干物质基础)

1.3 测定指标与方法 使用血常规自动分析仪(BC-2008,Mindray,深圳)测定血液中白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、血红蛋白含量(HGB)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞压积(HCT)、血小板数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、平均红细胞体积(MCV)、血小板分布宽度(PDW)。

血液内毒素(LPS)检测按照绵羊脂多糖/内毒素(LPS)酶联免疫分析试剂盒(上海润裕公司)方法进行。

1.4 数据处理与分析 各测试指标经Excel 2003初步整理后,利用SPSS 20软件对数据进行分析,对同一饲喂阶段组间血常规参数和LPS进行一般线性模型分析,不同阶段组内采进行单因素ANOVA分析。显著水平为P＜0.05。

2 结果分析

2.1 不同青贮饲粮对绵羊血常规的影响 由表3可知,WBC及MCHC高于正常值,但未受到绵羊饲喂时间、品种、处理及其交互作用的影响。RBC、HGB、MCHC、HCT、MCV、MPV、PDW 均未受到品种、处理及其交互作用的影响;但在饲喂6 d和90 d时,杜泊羊WBC显著高于小尾寒羊(P＜0.05);在饲喂90 d时杜泊羊PLT显著高于小尾寒羊(P＜0.05);RBC、HCT、HGB随着饲喂时间的增加而增加,且DY和HY组饲喂90 d时显著高于30 d(P＜0.05);但血小板随着饲喂时间的增加而减少,且DG和HG组饲喂90 d时显著低于30 d(P＜0.05);其他血常规参数均未发生显著变化。

2.2 不同青贮饲粮对绵羊血液内毒素浓度的影响 由表3可知,经过90 d的饲喂,血液LPS浓度未受到不同青贮饲粮处理及饲喂时间的影响,在饲喂90 d后杜泊羊血液LPS浓度显著高于小尾寒羊(P＜0.05),但均在正常范围之内(250 ng/L～965 ng/L)。

表4 不同青贮饲粮对绵羊血液内毒素浓度的影响

3 讨论

3.1 不同青贮饲粮对绵羊血常规的影响 血常规是最一般、最基本的血液检验。医生通过观察数量变化及形态分布,来判断疾病,其经常会受到品种、性别、年龄、季节等的影响与制约[7-9]。参阅卢宗藩[10]对健康绵羊生理指标的测定结果,本试验WBC和MCHC高于正常范围,但未受到绵羊饲喂时间,处理的影响。白细胞增高一般提示存在感染或其他炎症,如肠炎、胰腺炎、阑尾炎等;WBC除了疾病因素可以引起变化外,亦受生理因素及其他原因影响,餐后、剧烈运动、寒冷、疼痛、恐惧等影响。本试验研究发现,WBC高于正常值,且在饲喂60 d和90 d时,杜泊羊WBC显著高于小尾寒羊(P＜0.05),可能是由于在采血过程中,杜泊羊相较于小尾寒羊,由于疼痛、恐惧,导致剧烈运动引起或在饲喂高比例的青贮饲粮,绵羊存在感染或其他炎症,需进一步研究;MCHC是指每个红细胞内所含血红蛋白的平均值,研究发现,呕吐、腹泻等病理情况下,细胞缩水,体积变小,在抽血的过程中发生溶血等均可导致MCHC升高[12];此外,MCHC的升高及RBC和HGB的升高可能预示着巨幼细胞性贫血症的出现[13]。研究发现,RBC和HGB在正常范围内,表明不是贫血症状,且供试羊未发生呕吐、腹泻等病理情况,MCHC的升高可能是由于是在晨饲前采血,导致平均血红蛋白的升高或者在采血过程中发生溶血导致。其余各项血液生理指标均在参考值范围内,其中RBC、HCT、HGB随着饲喂时间的增加而增加,这与之前的研究结果相一致[7-9],且在饲喂玉米青贮90 d时显著高于30 d(P＜0.05),饲喂甜高粱青贮无显著差异(P＞0.05);PLT随着饲喂时间的增加而减少,符合动物生长规律[14],但小尾寒羊和杜泊羊在饲喂甜高粱青贮90 d时,显著低于30 d(P＜0.05),其原因有待深入研究;其他血常规参数均未发生显著变化。说明甜高粱青贮与玉米青贮相比并未对绵羊血常规产生显著影响,可作为绵羊优质饲粮。

3.2 不同青贮饲粮对绵羊血液LPS浓度的影响LPS主要是指当细菌死亡溶解或者人工方法破坏细胞后释放出来的一种对宿主有毒性作用的大分子物质,主要在胃肠道产生。当饲粮中精粗比提高,或者饲喂高比例的青贮型饲粮,使瘤胃pH值下降,导致瘤胃内革兰阴性菌的死亡以及细胞自溶,造成释放致使瘤胃LPS浓度增加,经瘤胃上皮吸收入血液,从而导致血液LPS浓度升高[15-17],研究发现,血液LPS浓度是动物多种并发症的致病因子[6],因此通过血液LPS浓度能够间接鉴定绵羊采食高比例甜高粱青贮是否会引起胃肠道微生物的变化及腹泻。研究结果表明,经过90 d的饲喂,血液LPS浓度未受到不同青贮饲粮处理及饲喂时间的影响,在饲喂90天后杜泊羊血液LPS浓度显著高于小尾寒羊(P＜0.05),但均在正常范围之内,说明甜高粱青贮并未对绵羊血液LPS浓度产生显著影响。

4 结论

本试验WBC(114.22×109/L～181.60×109/L)和MCHC(495.86～647.00 g/L)高于正常范围,但未受到绵羊饲喂时间、处理的影响。其余各项血液生理指标和血液LPS浓度均在参考值范围内,说明饲喂甜高粱青贮与玉米青贮相比,并未对绵羊健康产生影响,可作为绵羊优质饲粮进行推广。