云南产辣木叶挥发油化学成分的GC-MS分析

梁文娟，王 狮，夏越欣，钱自欣，王洪玲

(1.云南农业大学食品科技学院，云南昆明 650201;2.江西中医药大学中药资源与民族药研究中心，江西南昌 330004)

辣木(Moringaoleifera)为辣木科(Moringaceae)辣木属(Moringa)热带落叶乔木，原产印度，目前在亚洲和非洲热带和亚热带等地广泛种植；20世纪初，我国云南已从缅甸引种，并在云南多地种植[1]。2012年，我国卫生部批准辣木叶作为新资源食品。因此，作为一种新型的保健食品，辣木的营养成分、化学成分、药理和安全性等方面是国内外学者研究的重点。近年来，针对辣木营养成分研究结果显示其叶、种子和花中均富含蛋白质，且氨基酸组成丰富[2]，同时各部位均富含矿物质，包括钙、钾、硫、镁、铁和多种微量元素[3]。云南农业大学食品科技学院前期对云南不同产地辣木叶营养成分的研究发现，采自云南丽江、西双版纳、德宏、普洱和楚雄等地的辣木叶在营养成分上也存在差异[4]，这一发现与2015年Asghari等[5]对伊朗东南部野生辣木(Moringaperegrina)干叶及种子营养成分含量随季节和产地变化的研究结果相似。值得注意的是，人们针对辣木的化学成分和药理活性的研究也展开了大量工作。迄今为止，从辣木的不同部位分离得到的小分子化学成分超过70个[1]，其类型丰富，主要包括黄酮类、三萜类、甾体类、生物碱类成分。药理活性研究表明，辣木具有解痉、镇痛、降压、消炎、保肝、降血糖、降血脂、抑制肿瘤和拮抗阿尔兹海默症中氧化应激等活性[6-9]。基于不同产地之间化学成分的类型和含量上的差异以及云南农业大学食品科技学院前期的研究结果，笔者首次对云南普洱、西双版纳、德宏、丽江、楚雄5地产辣木叶挥发油的化学成分进行了GC-MS分析，以期为进一步优化种植栽培区域、促进其资源的合理利用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1材料Agilent 7890A/5975C 型气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)(美国安捷伦公司)；色谱柱为HP-50 石英毛细管柱(0.25 μm×250.00 μm × 30.00 m)；可调式电热套(北京科伟永兴仪器有限公司)；CP313型电子天平(广州市怡华新电子仪器有限公司)。

辣木叶于2014 年 10 月采自云南普洱、西双版纳、德宏、丽江、楚雄5地，由中国科学院张书东副研究员鉴定为MoringaoleiferaLam.。无水硫酸钠(西陇化工股份有限公司，分析纯)。

1.2挥发油的提取根据2010版中国药典提取挥发油方法[10]，在相同条件下对云南5个产地(普洱、西双版纳、德宏、丽江、楚雄)辣木叶进行挥发性成分的提取。普洱产辣木叶干叶经超微粉碎，得100目微粉，称取5个产地微粉各100.0 g，加入1 000 mL蒸馏水，浸泡1.0 h，借助水蒸气蒸馏装置，采用常压水蒸气蒸馏法提取其挥发油，微沸后保持4.0 h，提取时间为5.0 h，提取2次，收集合并所得挥发油并用无水硫酸钠脱水，4 ℃下保存备用；其他4个产地辣木叶超微粉均以相同方式提取，获得待测挥发油样品。

1.3气相色谱条件石英毛细管柱(0.25 μm×30 m×0.25 μm)，载气为纯度99.999%的氦气，选择气化室温度为250 ℃，初始温度设定为40 ℃，同时保持1 min；此后，以5 ℃/min速度升至200 ℃；达200 ℃后以4 ℃/min速度上升至 250 ℃，升温至250 ℃后保持 10 min。进样口温度设为 250 ℃，流速为1.0 mL/min；进样量设定为1 μL，分流比为5∶1。离子化方式为EI离子源，其温度设定为200 ℃，电离电压设为 70 eV，四极杆温度设定 150 ℃，溶剂延迟设定 3 min，扫描选择：m/z 40～350 amu。

2 结果与分析

2.1云南西双版纳产辣木叶挥发油的化学成分经GC-MS定性分析从云南西双版纳产辣木叶挥发油中共鉴定出15个化学成分(表1)，分别占西双版纳产辣木叶挥发油总量的99.71%，化合物类型以脂肪烃类、萜类、甾体类、芳香化合物为主，主要成分有乙基环戊烷(28.74%)、1，2，4-三甲基环戊烷(9.90%)、1，2，3-三甲基环戊烷(10.20%)、2-甲基庚烷(5.57%)、2-甲基戊基异戊酸(5.21%)、1，3-二甲基环己烷(8.33%)、亚麻酸乙酯(9.31%)等。

2.2云南楚雄产辣木叶挥发油的化学成分经GC-MS定性分析从楚雄产辣木叶挥发油中共鉴定出25个化学成分(表2)，分别占楚雄产辣木叶挥发油总量的94.98%，化合物类型以脂肪烃类、萜类、甾体类、芳香化合物为主，主要成分有乙基环戊烷(15.13%)、1，2，4-三甲基环戊烷(5.18%)、1，2，3-三甲基环戊烷(5.33%)、亚麻酸(4.65%)、亚麻酸乙酯(9.30%)、2，2′-亚甲基双[6-(1，1-二甲基乙基)-4-甲基-苯酚(22.24%)等。

表2 云南楚雄产辣木叶挥发油主要化学成分

2.3云南德宏产辣木叶挥发油的化学成分经GC-MS定性分析从德宏产辣木叶挥发油中共鉴定出17个化学成分(表3)，分别占德宏产辣木叶挥发油总量的69.18%，化合物类型以脂肪烃类、萜类、甾体类、芳香化合物为主，主要成分有乙基环戊烷(12.13%)、1，2，4-三甲基环戊烷(4.14%)、1，2，3-三甲基环戊烷(4.26%)、亚麻酸乙酯(3.85%)、去甲何帕烷(7.41%)、长叶烯(20.09%)等。

2.4云南丽江产辣木叶挥发油的化学成分经GC-MS定性分析从云南丽江产辣木叶挥发油中共鉴定出17个化学成分(表4)，分别占丽江产辣木叶挥发油总量的99.99%，化合物类型以脂肪烃类、萜类、甾体类、芳香化合物为主，主要成分有乙基环戊烷(24.98%)、1，2，4-三甲基环戊烷(8.55%)、1，2，3-三甲基环戊烷(8.90%)、1，3-二甲基环己烷(7.27%)、亚麻酸乙酯(13.91%)等。

表3 云南德宏产辣木叶挥发油主要化学成分

表4 云南丽江产辣木叶挥发油主要化学成分

2.5云南普洱产辣木叶挥发油的化学成分经GC-MS定性分析从云南普洱产辣木叶挥发油中共鉴定出20个化学成分，分别占普洱产辣木叶挥发油总量的99.99%，化合物类型以脂肪烃类、萜类、甾体类、芳香化合物为主，主要成分有乙基环戊烷(18.91%)、1，2，4-三甲基环戊烷(6.68%)、1，2，3-三甲基环戊烷(6.88%)、1，3-二甲基环己烷(5.78%)、亚麻酸乙酯(4.59%)、2，2′-亚甲基双[6-(1，1-二甲基乙基)-4-甲基-苯酚(6.47%)、2-(4a，8-二甲基-6-氧-1，2，3，4，4a，5，6，8a-八羟基-萘亚甲基-2-丙醛(9.27%)、羊毛甾醇(16.50%)等。

表5 云南普洱产辣木叶挥发油主要化学成分

由表6可知，经GC-MS定性分析从云南产辣木叶挥发油中共鉴定出31个化学成分，分别占普洱、西双版纳、德宏、丽江、楚雄5个不同产地的挥发油总量的99.99%、99.71%、69.18%、99.99%和94.98%，化合物类型以脂肪烃类、萜类、甾体类、芳香化合物为主，其中共同含有的成分11种，在4个以上产地中含有的成分16种，主要成分有2，5-二甲基己烷(1.58%、2.39%、0.98%、2.04%、1.21%)、2，4-二甲基己烷(2.31%、3.48%、1.46%、3.05%、1.79%)、乙基环戊烷(18.91%、28.74%、12.13%、24.98%、15.13%)、1，2，4-三甲基环戊烷(6.68%、9.90%、4.14%、8.55%、5.18%)、1，2，3-三甲基环戊烷(6.88%、10.20%、4.26%、8.90%、5.33%)、2-甲基庚烷(3.81%、5.57%、2.29%、4.79%、3.58%)、2-甲基戊基异戊酸(3.57%、5.21%、2.18%、4.55%、2.73%)、1，3-二甲基环己烷(5.78%、8.33%、3.52%、7.27%、4.41%)、1，4-二甲基环己烷(1.66%、2.47%、1.02%、2.11%、1.27%)、辛烷(2.37%、3.41%、1.44 %、2.98%、1.81%)、亚麻酸乙酯(4.59%、9.31%、3.85%、13.91%、9.30%)等。值得注意的是，普洱产辣木叶特异性的含有羊毛甾醇(16.50%)、维生素E(2.20%)，德宏产辣木叶中特异性含有长叶烯(20.09%)；德宏和楚雄辣木叶中含有去甲何帕烷(7.41%、1.99%)。丽江和楚雄辣木叶中含有巴卡林烷(1.53%、0.47%)。综上所述，云南不同产地间辣木叶挥发油成分差异较大，主要集中在分子量相对较大的成分差异，有待进一步系统的化学成分研究。

表6 云南5个产地辣木叶挥发油GC-MS 成分分析

3 结论与讨论

该研究选择云南普洱、西双版纳、德宏、丽江、楚雄5个产地的辣木叶干叶的挥发油成分为研究对象，借助GC-MS 对其中主要成分进行定性和初步定量分析，研究结果表明，云南产辣木叶挥发油中主要含有小分子脂肪酸和长链脂肪酸，且不同产地之间存在差异，普洱产辣木叶特异性的含有羊毛甾醇，作为胆固醇合成的中间体具有重要的生物学意义，羊毛甾醇的衍生物具有抗真菌活性[11]；德宏产辣木叶中特异性含有长叶烯(20.09%)，作为一种天然香料，长叶烯是香精香料调配的重要原料[12]。通过文献调研发现不同产地、不同提取部位、不同提取方法得到的辣木叶挥发油成分不同，比如Marrufo等[13]通过GC和GC-MS的分析方法检测了非洲东南部国家莫桑比克产辣木精油的成分，研究表明单其主要包括α-水芹烯，其次还含有二十六碳烷(13.9%)、二十五碳烷(13.3%)等。Gatade等[14]应用GC-MS法检测发现辣木叶含有棕榈酸、二十五烷、β-谷甾醇、植醇、十八酸甲酯和VE醋酸酯。Faizi等[15]应用GC-MS方法，指认了辣木根石油醚和二氯甲烷提取物中涉及脂肪酸、酯类、乙醇、硫代氨基甲酸酯类化合物、氨基酸、甾体等主要类型。Rigano等[16]报道辣木油可加速创面愈合、缩短愈合时间、减轻组织病理变化的作用，其主要活性成分有待进一步研究。前期研究发现云南不同产地间辣木叶在蛋白含量、氨基酸组成、黄酮类、多糖等成分差异较大[4]。

综上所述，云南普洱、西双版纳、德宏、丽江、楚雄5个产地辣木叶挥发油化学成分涉及脂肪烃类、萜类、甾体类等，但具体化学成分组成相差较大，该研究为云南产辣木叶产地整理和资源开发提供了一定的数据支持，后期有必要从药理活性的角度对辣木叶的化学成分进行深入研究，以期为进一步优化辣木种植栽培区域、促进其资源的合理利用提供参考。

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