Glypican-3和CD34免疫组化染色在肝细胞癌与良性肝细胞性病变鉴别诊断中的价值

李丽晖，许锦文

（开平市中心医院，广东 开平529300）

肝细胞癌是常见的恶性肿瘤，患者通常在晚期出现临床病变，丧失了最佳的治疗时机［1］。因此，对患者行早期诊断和治疗具有重要的临床价值。在早期诊断中，免疫组化方式具有较高的诊断率，Glypican－3（磷脂酸肌醇蛋白聚糖－3）与HCC（肝细胞癌）相关，且患者体内呈现高表达。CD34可以清晰地显现肿瘤性毛细血管化的肝窦结构。但是肝细胞癌与良性肝细胞性病变的免疫组化鉴别研究相对较少。本研究选择在我院接受治疗的150例患者，探讨Glypican－3和CD34免疫组化染色的临床诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2003年1月至2017年6月在我院接受治疗的150例肝病患者，男性患者90例，女性患者60例，年龄39～69岁，平均年龄 （58.2±2.1）岁。其中肝细胞癌患者63例，男性40例，女性23例，年龄40～68岁，平均年龄（58.0±2.0）岁。良性肝细胞性病变患者87例，其中肝硬化患者20例，肝炎患者56例，良性肿瘤患者11例。纳入标准：①患者符合疾病诊断标准；②同意参与本研究且签署知情同意书。所有患者均进行Glypican－3和CD34免疫组化染色。

1.2 方法

1.2.1 Glypican－3免疫组化 采集患者清晨空腹血5 mL，4 000 r／min离心处理5 min，分离后保存在－86℃环境下。Glypican－3试剂盒 （BioMosaics公司生产），检测前摇匀，将Glypican－3标准品及待测样品置于96孔微孔中，按照试剂盒说明书，制作 6个浓度， 分别为 0、 50、 150、 450、 1 350以及 4 050 ρg／mL。通过线性计算，确定浓度。

1.2.2 CD34免疫组化 将标本置于4%中性甲醛溶液中，常规石蜡包埋，制作4 μm的切片，采用免疫组化染色，经过微波修复抗原，一抗在4℃下孵育，二抗在37℃下孵育30 min，运用二氨基联苯胺底物显色。

1.3 判定标准 CD34阳性显示为微血管内皮细胞出现棕黄色染色，按照血管分布，分为局灶型、斑片型以及弥漫型。局灶型

为血管围绕纤维瘢痕两侧分布，斑片型为血管呈现片状分布，弥漫型为均匀分布。镜下随机选取5个中倍视野 （×200），每个视野计数100个细胞，计算阳性细胞占细胞数的百分比。0分：阳性细胞比例≤5%；1分：阳性细胞比例在6%~25%之间；2分：阳性细胞比例占26%~50%之间；3分：阳性细胞比例占51%~75%之间；4分：阳性细胞比例超过75%。阳性着色计分：0分：无色；1分：淡黄色；3分：棕黄色。两项目相加计算阳性情况：相加＜2分为 （－）；相加2~3分为 （＋）；相加 4~5分为 （＋＋）； 相加 6~7分为 （＋＋＋）。

1.4 统计学处理 采用SPSS 17.0软件处理数据，计数资料和计量资料分别采用n（%）和x±s表示，数据检验分别用χ2检验和t检验，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 血清Glypican－3表达水平 肝细胞癌患者的Glypican－3表达水平为明显高于其他良性病变 （P＜0.05），见表1。Glypican－3表达敏感度为 84.1%，特异度为 84.1%，阳性预测值为52.4%， 阴性预测值为 93.7%， 准确度为 77.8%。

表1 患者的血清Glypican－3表达水平

2.2 CD34的临床病理表现 肝细胞癌患者的CD34阳性表达水平显著高于良性肝细胞性病变患者 （P＜0.05）。见表2。

表2 CD34的临床病理表现情况 ［n（%）］

3 讨论

肝细胞癌属于恶性肿瘤之一，病死率相对较高，在对患者的诊断及治疗中，采用早期诊断方式具有重要的价值。Glypican－3以及CD34表达具有较好的诊断效果，在对肝细胞癌患者的诊断中，采用该诊断方式，可以准确地诊断患者的临床病变，具有较高的应用价值［2］。但是临床上对其鉴别诊断价值的研究相对较少，因而探讨其临床诊断价值具有重要的意义。

本研究结果显示，肝细胞癌患者的Glypican－3表达水平为（1 326.8 ± 121.4） ρg／mL， 明显高于其他良性病变， 差异有统计学意义 （P＜0.05），表明在肝细胞癌患者体内Glypican－3的表达水平明显高于良性肝细胞性病变，主要是由于Glypican－3属于膜糖蛋白，在氨基端面出现可溶性片段可以被检测出来，对于血清的检测具有较高的诊断价值。有研究［3］显示，Glypican－3在肝炎等良性细胞性病变的鉴别和诊断中具有较好的诊断效果，主要是由于该物质在良性细胞性病变患者中表达率相对较低，因而可通过免疫组化染色方式来确定患者的临床病变。还有研究［4］指出，Glypican－3对于肝细胞癌具有较高的诊断价值，主要是由于该物质在肝细胞癌患者体内具有较高的表达率，可以清晰反映患者体内的病变，从而可以提高诊断效果。

本研究中，Glypican－3表达敏感度为84.1%，特异度为84.1%，阳性预测值为52.4%，阴性预测值为93.7%，准确度为77.8%，表明在对肝细胞癌患者的检测中，Glypican－3的诊断率相对较高，主要是由于在对患者的检测中，Glypican－3可以作为敏感的肿瘤标志，通过动态的监测，可以提高对患者的诊断效果。有研究［5］指出，Glypican-3具有较高的表达敏感度和特异度，并且在对124例患者的临床诊断中，其敏感度为96%，特异度为88%。还有研究［6］指出，在对肝细胞癌患者的临床诊断中，Glypican－3具有较高的敏感度和准确度，其准确度高达85%左右，可为患者的临床诊断提供科学的依据。

本研究中，肝细胞癌患者的CD34阳性表达水平显著高于良性肝细胞性病变患者 （P<0.05）。在肝细胞癌患者的临床表现中，其存在高度异型增生结节，在临床诊断中，难以与常规的病变进行有效的区分，在此情况下，正常肝组织、慢性肝炎以及肝硬化等表现均为非肿瘤性，难以被CD34染色，而肝细胞癌患者体内出现新生毛细血管网，通过CD34染色，可以较为清晰地显现出来，具有明显的特征。有研究［7］指出，CD34在良性细胞性病变中缺乏诊断价值，主要是由于在良性病变中难以进行CD34有效染色，从而无法对疾病进行诊断；而在对肝细胞癌患者的诊断中，CD34可以清晰地染色，并且表达出来，可以有效提高对患者疾病的诊断。

综上所述，在对肝细胞癌与良性肝细胞性病变患者的诊断中，Glypican－3和CD34免疫组化染色具有较高的诊断价值，可以为患者的临床诊断和治疗提供依据。

[1] 毕海龙,祁萍.MRI动态增强定量参数对肝细胞癌和肝良性肿瘤鉴别诊断的价值 [J/CD].世界最新医学信息文摘 (电子版),2016,16(83):117-123.

[2] 白若冰,郭启勇,石喻,等.MR弥散加权成像在延迟期强化的肝脏恶性肿瘤与肝血管瘤鉴别诊断中的应用 [J].中国临床医学影像杂志,2011,22(5):316-320.

[3] 钟锐,张敏,何浩强,等.B值800s/mm2磁共振弥散加权成像 (DWI)在肝脏占位性病变鉴别诊断中的应用 [J].中国CT和MRI杂志,2011,9(6):1-4.

[4] 王丽杰,于钦森,于德新,等.DWI技术在肝脏占位性病变鉴别诊断中的价值 [J].中国中西医结合影像学杂志,2011,9(1):1-3.

[5] 王锋.DWI在肝脏占位性病变中的临床应用价值 [J].贵州医药,2015,39(5):457-459.

[6] 熊焕煜.DWI技术在肝脏占位性病变鉴别诊断中的价值 [J].中国现代药物应用,2015,9(20):73-74.

[7] Coston WM,Loera S,Lau SK,et al.Distinction of hepatocellular carcinoma from benign hepatic mimickers using Glypican-3 and CD34 immunohistochemistry[J].Am J Surg Pathol,2008,32(3):433-444.