血小板计数假性减低的原因分析

刘春都

（南京市浦口医院检验科，江苏 南京 210031）

当前，血细胞分析仪在计数血小板时，常采用电阻抗原理，并且与红细胞在同一通道内检测，在计数血小板时，常受到干扰，使得血小板测定值假性降低。本文着重讨论血细胞分析仪在测定血小板时，出现假性降低的原因。

1 材料和方法

1.1 仪器和试剂

SysmexTX-4000i血细胞分析仪；Olypus双目显微镜；EDTA-K2抗凝管。试剂：血细胞分析仪配套原装试剂及高、中、低值质控品。草酸铵稀释液；瑞氏染液。

1.2 试验标本来源

试验所需标本来自本院2017年1月～2017年6月静脉血分析标本，共累计收集27416例，然后按本科室血小板复检标准，对于血小板数＜100×109/L或＞300×109/L或血小板直方图异常的标本均需涂片染色镜检及人工计数，共筛选出2164份。

1.3 方法

（1）在血分析仪上检测27416份标本，获得血小板数量及直方图。

（2）人工计数血小板，采用草酸铵溶血剂直接计数法，由2名有经验的检验人员按照《全国临床检验操作规程》的要求进行计数[1-2]，再取均值。

（3）制作血涂片，瑞氏染色后，显微镜观察血小板分布及形态。

本试验所需的仪器、试剂、操作均按照操作程序要求。仪器状态良好、稳定，试剂有效、在控，操作规范标准，室内质控在控。

2 结 果

（1）依据仪器上检测的血小板的数目及直方图，按照本科室的复检标准，共筛选出2164份标本进行复检，复检率为7.89%。

（2）将2164份需复检的标本进行人工计数，并将两种方法的结果相比较，结果有1428例标本出现两种方法不符。见表1。

表1 仪器法与人工法血小板数结果比较

（3）在这1428例标本中，有673例出现血小板假性减少，按其形成原因分类。见表2。

表2 原因分类（±s）

表2 原因分类（±s）

EDTA-PTCP6765±12197±238.425＜0.01血小板卫星现象273±19176±3112.341＜0.01大血小板5394±13204±197.658＜0.01冷凝集现象1675±18191±2211.574＜0.01药物诱发6292±14154±1810.521＜0.01高脂血症7587±11184±169.587＜0.01疾病引起11179±12135±218.683＜0.01血液采集方面17856±17214±2514.251＜0.01仪器吸样不足8765±15205±2412.541＜0.01其它原因2261±19167±2313.841＜0.01

3 讨 论

血细胞分析仪具有简便、快速、效率高、重复性好、检测指标多等优点，使得它在医院检验科具有无可替代的优势作用，但由于其本生设计原理的限制，红细胞和血小板在同一通道内检测，它们相互影响，血小板更易出现假性减少，常见原因分析如下。

3.1 EDTA-依赖性血小板假性减少（EDTAPTCP）

由表2可知，它占血小板假性减少的10.0%，虽然比例不小，但其发生机制尚不确定，有报道[3-4]认为是EDTA诱导了血小板表面隐匿性抗原，与抗血浆中的抗血小板抗体和抗心磷脂抗体结合而形成血小板聚集团块，本来是几个、几十个甚至更多的血小板，仪器误认为是一个血小板，当血小板团块大小达到红细胞检测阈值，仪器误认为为红细胞，这样就导致了血小板明显假性减少（P＜0.01），这容易引起临床上的误诊误治，带来严重的后果。因此，需要尽早发现EDTA-PTCP，常采用手工法计数和染色镜检，重新采集用肝素抗凝的静脉血及时仪器法检测，可以纠正这种情况。

3.2 血小板卫星现象

本试验共发现2例，是血小板通过其表面的GPⅡb/Ⅲa与中性粒细胞或其它白细胞表面的IgG Fc段结合[5-6]，在这些细胞周围形成一圈血小板，有的血小板还被这些白细胞吞噬，使得血小板计数假性降低，可通过染色镜检观察到，用枸橼酸盐更换EDTA后，可以克服。

3.3 巨大血小板造成的血小板假性降低[7]

在本次试验中共有53例。当血小板体积过大，大小超过25 fl时[8]，血小板会被仪器认为是红细胞，使得血小板计数减少。通过人工法计数得到纠正，涂片染色镜检观察到血小板的形态。

3.4 冷凝集现象使得血小板假性减少[9]

一些病人体内冷凝集素效价高，当采集的抗凝血在室温低的特殊情况下，可以使得血小板聚集在一起，导致仪器法计数减少，当遇到这种情况时，可将标本置于37℃的水浴箱30分钟后，聚集的血小板可以分开，从而得到纠正。

3.5 药物

某些药物，如甲基多巴、青霉素可以诱发血小板聚集，当仪器法计数血小板时，出现假性减少。这时涂片染色镜检可看到有多少不一的血小板聚集在一起。

3.6 高脂血症

当血液处于高脂状态[10]下，血小板聚集性增强，使某些患者血小板聚集，而引起血小板仪器法计数时减少。从上表2可知，在本次试验中，仪器法血小板计数为87±11，而人工计数为184±16，有极显著性差异（P＜0.01）。

3.7 疾病

某些疾病如糖尿病、高血压等，容易引起血管内膜损伤，血小板聚集在破损处，引起循环血液中的血小板减少。由表2可知，两种方法有极显著差异（P＜0.01）。

3.8 采集血液时不顺利

过分挤压周围组织，或血液没有充分混匀，使血液凝固，使得血小板消耗掉。虽然，我们也强调了操作要标准，但本文还是有178例不合格的标本，所以当涂片镜检有血小板聚集，就要想到可能是人为技术性的问题，这时需要重新抽血，再次仪器法计数，同时需镜检，综合分析引起血小板假性减少的原因。

3.9 仪器吸样量不足

当采集的血液有少量不足，或是吸样针内壁有少许残渣，或其它原因影响了血小板的吸样量，使得血小板计数减少，往往也伴随有红细胞计数的减少，通过人工计数就可以纠正。

3.10 其它原因

本文共有22例标本，没有找到可以解释的原因，仪器法计数为61±19，而人工计数为167±23，两者有极显著差异（P＜0.01），至于引起的原因，可能是自己还没有发现而已。

综上，引起血小板假性减少的原因很多，当结果与患者临床表现，症状体征不相符时，要考虑到血小板假性减少的情况，结合血小板直方图及报警提示、人工计数、涂片染色镜检找到合理解释的原因，纠正假性减少的结果，获得准确的数据，供临床医生的诊断治疗提供有力的帮助。

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