食用植物油中黄曲霉毒素B1调查分析

周子焱，邢家溧，应 璐，周鑫达，张书芬，李湘江，沈 坚(宁波市食品检验检测研究院，浙江 宁波 315048)

食用油是居民必需的一类重要食品，是人体重要能源和营养源。随着我国经济高速发展和人们生活水平不断提高，食用油消费量呈明显上升趋势。我国常见的食用植物油主要有大豆油、玉米油、菜籽油、花生油、油茶籽油、芝麻油等。近年来，市场上食用植物油质量参差不齐，存在问题较多，已日益成为大众关注的焦点。为此，国家和各级政府对食用植物油安全高度重视，通过抽检监测和风险评估等方式，对食用植物油质量进行监控。由于食用植物油的原料和加工属性，极易受到黄曲霉毒素(AFs)的污染[1]。AFs主要是由黄曲霉菌和寄生曲霉菌代谢产生的一类天然生物毒素，其广泛存在于霉变的粮食、油料及其制品中，是迄今发现的生物毒性最强的一类毒素[2-3]。其中黄曲霉毒素B1(AFB1)毒性最强、污染最广、危害最大，其毒性为氰化钾的10倍、砒霜的68倍，目前已被国际癌症研究机构(IARC)列为I类致癌物[4]，对人类生命健康的潜在威胁极大，引起世界各国的高度重视[5]。

食用植物油质量安全不但影响着居民的健康，一定程度上也影响了社会的稳定和谐，因此是国务院食品安全重点工作安排中关注的主要食品[6]。鉴于浙江省食用植物油生产销售企业和品种众多，消费特点明显，了解当前浙江省食用植物油情况，展开食用植物油中AFB1含量的调查分析，以期较为全面掌握浙江地区食用植物油安全水平和污染状况，从而为相关部门提供风险评估、预警以及决策，为群众理性科学选择食用植物油提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 原料与试剂

2016年9—12月在浙江省各市销售市场(包括超市、批发市场、餐饮业、小作坊等场所)随机采集食用植物油样品共计1 208个，样品种类涵盖花生油、玉米油、大豆油、菜籽油、油茶籽油、葵花籽油、芝麻油、调和油，分批采集封存后4℃保存，采样当月20 d内完成样品检测。

甲醇、苯、乙腈，色谱纯：美国Fisher公司；氯化钠、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、氯化钾等，均为分析纯；AFB1标准品(1.00 μg/mL)：国家标准物质研究中心；超纯水(电阻≥18.2 MΩ)：超纯水制备系统制备。

1.1.2 仪器与设备

Agilent 1260 infinity高效液相色谱仪、Zorbax SB C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)：美国Agilent公司；101-1型干燥箱；TGL-16C离心机；EL3002型电子天平、EL204型分析天平、Delta320-S型pH计：梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司；AFs免疫亲和柱：北京华安麦科生物技术有限公司；Milipore Mili-RO Plus and Mili-Q Systems超纯水制备系统：美国Millipore公司。

1.2 实验方法

1.2.1 食用植物油中AFB1含量的测定

食用植物油中AFB1含量的测定方法根据 GB/T 18979—2003做适当调整。准确称取5.0 g油样于50 mL均质管中，加入1.0 g氯化钠并加入甲醇水溶液(7∶3)至25.0 mL，均质器高速均质2 min，滤纸过滤收集滤液，取15.0 mL滤液加入30 mL水稀释，用玻璃纤维滤纸过滤2次，备用。经过含有AFB1特异抗体的免疫亲和柱净化，取10 mL水去除免疫亲和柱上的杂质，加入2 mL甲醇洗脱免疫亲和柱，收集1 mL洗脱液，氮气吹干，流动相溶解后放入4℃冰箱保存，待高效液相色谱测定。

色谱条件：流动相为乙腈-水(45∶55)；流速1.0 mL/min；激发波长360 nm，发射波长440 nm；进样量20 μL。

1.2.2 标准曲线的绘制

将AFB1标准溶液(100 μg/L)用乙腈配制成不同质量浓度梯度的标准工作溶液，并进行测定，根据响应值与标准工作溶液质量浓度关系，绘制标准曲线，得到线性方程y=1.756 01x，r2=0.999 9。AFB1检出限为0.1 μg/kg。

1.2.3 数据处理

采用Excel 2010和SPSS 16.0数据统计软件处理分析实验数据。

2 结果与分析

2.1 浙江省食用植物油中AFB1的总体情况

本次共采集浙江省11个地市151家经销企业食用植物油样品，包括8类食用植物油，1 208个样品。调查结果显示，22份样品检出AFB1，含量范围为2.2～4.9 μg/kg，检出率为1.8%，参照GB 2761—2011规定，所调查食用植物油中AFB1含量均未超过国家限量标准(≤20 μg/kg)，不合格率为0.0%。进一步随机选取了20%的样品进行平行验证，控制平行样的绝对差值不超过算术平均值的10%，以上检测的样品都采用SN/T 3868—2014《出口植物油中黄曲霉毒素的检测》进行了复查，复查结果与初次结果一致。调查结果表明，此次调查的食用植物油总体质量状况优良，大多数食用植物油生产和销售企业、政府相关部门，对AFs指标非常关注，有效地保障了食用植物油的安全。

2.2 不同种类食用植物油中AFB1含量分析

不同种类食用植物油样品中AFB1总体污染水平如表1所示。

表1 食用植物油样品AFB1总体污染水平

注：“-”表示未检出。

由表1可知，在这8类植物油中，花生油、葵花籽油、玉米油和调和油中均有AFB1检出，平均值分别为4.0、3.4、3.1、2.2 μg/kg，检出率分别为5.2%、1.6%、0.8%、1.0%。另外，调查结果表明，花生油中AFB1的检出率最高，为5.2%，而葵花籽油、玉米油中AFB1检出率分别为1.6%和0.8%，显著低于花生油，这可能是因为花生原料在收获、储藏、加工过程中，更容易遭受黄曲霉或寄生曲霉菌的感染，而生产花生油使用了存放时间过长或霉变的花生仁为原料，从而造成AFB1污染。但是调查结果显示，所有食用植物油中AFB1超标率为0.0%，说明AFB1污染水平较低，安全性较高。

调和油中AFB1检出可能是由于调和油的成分中含有花生油、葵花籽油或玉米油，而这几类食用植物油中AFB1有检出，推测可能是原料受AFB1污染所致。陆晶晶[6]、李可[7]等研究表明，食用植物油产品中存在AFB1污染，与其原料有很大关系，这也与本研究推测相一致。作为浙江省特产，在此次调查检测中，菜籽油和油茶籽油均未检出AFB1，表明虽然浙江省菜籽油和油茶籽油生产加工企业规模较小，但是各企业对原料和加工过程把控较好，确保了产品质量过关。而对于大豆油，当前原料以进口大豆为主，原料品质较好，未检出AFB1。

2.3 不同地区食用植物油中AFB1含量分析

受原料及消费习惯的影响，浙江省食用植物油企业生产的产品品种呈现明显的地域性，浙江省西部地区是我国油茶的重要产地[8]，现有油茶面积1.67万hm2，其中常山、青田、莲都、云和、仙居等25个县占总面积的90%，油茶加工企业经过几年的优胜劣汰，目前主要集中在衢州地区[9-10]。浙江油菜种植区域比较广，萧山、仙居、开化、遂昌等地都有大面积种植，目前菜籽油生产企业主要集中在萧山地区，不过规模相对较小。除了油茶籽油和菜籽油主要生产地区外，其他地区如沿海地区的企业分为两类：一类是规模企业[11]，该类型企业产量较大，不但生产自主品牌的小包装成品油，还是周边地区小油厂的原料供应商；另一类则为分装企业，产量小，多以销定产，并以小型食品生产企业、餐饮企业或集体食堂为主要销售对象。

各地市食用植物油检验结果见表2。

表2 各地市食用植物油检验结果

由表2可知，绍兴、宁波、嘉兴、金华、温州、丽水、舟山7个地市采集的食用植物油均未检出AFB1；杭州、湖州、衢州、台州4个地市采集的食用植物油均有AFB1检出，检出率分别为2.22%、4.17%、3.85%和10.00%。

2.4 不同包装食用植物油AFB1含量比较

此次调查过程中，根据采样样品包装材料，统计了散装油和定型包装油样品的AFB1含量水平，结果如表3所示。

表3 不同包装方式食用植物油中AFB1检测结果

由表3可知，散装油和定型包装油均有不同程度AFB1检出，其中散装油的检出率(3.8%)显著高于定型包装油(0.9%)，这与刘辉[12]、王朝霞[13]、 Lee[14]等的研究结果是一致的，在他们的研究中也发现散装油中的AFB1检出率明显高于定型包装油。这可能是由于散装油使用的原料品质较差，无严格的质量控制条件，且散装油在加工、储藏、销售过程中，无密封或密封条件不好，食用油长期暴露于外环境中，增加了黄曲霉菌等真菌污染繁殖的机会，造成AFB1检出率较高。结果表明，散装油中AFB1风险较高，建议今后对散装油的调查及相关部门监督力度应加大。

3 结 论

本次调查遵循样本种类“覆盖面广、多点采样、兼顾包装类型和生产工艺”的原则，样本覆盖全省11个地市的151家食用植物油经销企业，包装类型为散装和定型包装，采样涉及花生油、玉米油、大豆油、菜籽油、油茶籽油等8大类1 208个样品，能够代表群众购买食用油的主要渠道。对样品中AFB1检测分析结果表明，浙江省食用植物油AFB1污染水平较低，总检出率为1.8%，超标率为0.0%，但花生油、散装油产品中的AFB1检出率分别为5.2%和3.8%，显著高于平均水平(1.8%)，建议监管部门特别加强散装花生油生产、流通环节的监管。虽然本次调查受数据采集和分析时间的限制，不够全面，但能在一定程度上体现浙江省食用植物油的总体质量状况。本研究下一步将更全面地调查食用植物油中危害因子水平，并开展分析影响食用植物油质量的因素，为建立更为完善的食用油质量安全保障体系，保障群众的生活质量提供依据。

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