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高效抗菌硬表面洗涤剂的制备与性能分析

2018-01-19郭锦棠薛雪雪代明雪郁培云

关键词:三氯洗涤剂原液

郭锦棠,薛雪雪,代明雪,郁培云



高效抗菌硬表面洗涤剂的制备与性能分析

郭锦棠,薛雪雪,代明雪,郁培云

(天津大学化工学院,天津 300350)

针对目前液体洗涤剂功能单一的问题,研究设计了一种高效抗菌硬表面洗涤剂,该洗涤剂兼具抗菌和硬表面洗涤的双重效果.经去油率实验结果表明:脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)、直链烷基苯磺酸钠(LAS)和椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)质量比为7∶3∶1,总活性物质量分数为22%时,去污力可达到79.6%,.采用悬液定量杀菌实验和持续抑菌实验对含三氯生0.5%,(质量分数)的抗菌硬表面洗涤剂进行抗菌测试.抗菌结果表明,洗涤剂样品原液对大肠杆菌的杀灭率为98.08%,,对金黄色葡萄球菌的杀灭率为96.90%,,与同类产品中的其他杀菌成分相比,用量少,杀菌效果好,原液50倍稀释后持续杀灭率分别为63.74%,和83.23%,.储存稳定性实验结果表明,抗菌硬表面洗涤剂的有效期为1年.

抗菌硬表面洗涤剂;三氯生;表面活性剂;去污力;抗菌;稳定性

绿色化学是当今国际化学科学研究的前沿[1],采用绿色化学设计、绿色化工技术和绿色生产工艺是洗涤用品科研和生产部门的重要研究课题.目前,洗涤用品逐渐朝着绿色环保、功能化、专业化、系列化的方向发展[2].近几年,国内液体洗涤剂市场发展迅速,但由于多数产品效果单一,难以满足洗涤和消毒的双重需要,而且传统的洗涤剂配方易造成环境污染,因此,与国际洗涤剂发展水平仍存在差距.洗涤剂根据应用领域不同,可分为3类,分别是硬表面清洗剂、洗衣粉/液、餐具洗涤剂[3].由于地板、桌椅等物质表面极易吸附灰尘、细菌等,甚至细菌会增殖形成生物膜[4],更不易清除,或转移到食物表面而引起食品变质[5],从而威胁着人们的身体健康.刘俊杰等[6]研究了环境条件对微生物滤料表面繁殖的影响.因此,高效抗菌性硬表面洗涤剂的开发就成为了当前的研究热点.

三氯生,化学名称三氯羟基二苯醚,作为洗涤剂的杀菌成分,是一种绿色环保杀菌剂,能够与多种表面活性剂进行复配,在各类洗涤产品中均可使用,具有广谱抗菌性[7-9].李俊萍[10]、孟庆增等[11]分别简单介绍了三氯生在洗涤剂中的应用和杀菌效果.表面活性剂是洗涤剂的主要活性组成部分.在环保要求更为严格以及资源日趋紧张的今天,低成本、可再生、环境友好的表面活性剂的应用是目前洗涤行业的发展趋势之一.其中,直链烷基苯磺酸钠(LAS)去污效果好、成本低,但抗硬水能力较差,通过引入脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)进行复配可弥补LAS的这一不足之处[12].

本文研究以三氯生辅以直链烷基苯磺酸钠(LAS)、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501)、乙醇等成分设计了一种兼具硬表面洗涤和抗菌双重功效的洗涤剂,其原液三氯生添加量为0.5%,(质量分数),低于国标中允许物体表面消毒应用液中三氯生的最高含量2.0%,[13].该产品去污力高、稳定性好、抗菌效果好,而且安全高效,具有广谱抗菌性,有效地解决了洗涤剂产品功能单一的问题.

1 实验材料和方法

1.1 材料

直链烷基苯磺酸钠(LAS,纯度为70%),、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES,纯度为70%),和椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(6501,纯度为99.5%),山东临沂绿森化工有限公司;三氯生,纯度为99%,,山东奥友生物科技股份有限公司;乙醇、氯化钠、无水磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、硫代硫酸钠、甘氨酸和吐温-80,分析纯,天津江天化工技术有限公司;胰蛋白胨、营养琼脂,生化试剂,北京奥博星生物技术有限责任公司;卵磷脂,生化试剂,天津江天化工技术有限公司;大肠杆菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌(S.aureus),中国科学院微生物研究所.

1.2 实验仪器

pH计,PHS-3C型,上海精密科学仪器有限公司;旋转黏度计,NDJ-79型,同济大学机电厂;立式压力蒸汽灭菌器(YXQ-LS-50A型)和超净工作台(SW-CJ-1FD型),上海博讯实业有限公司;恒温恒湿箱,LHS-150SC型,上海一恒科学仪器有限公司.

1.3 设计思路

(1) 将一种杀菌剂——三氯生引入到硬表面洗涤剂中,使其同时具有洗涤和抗菌功能.该杀菌剂具有用量少,对高温、酸碱稳定性好,绿色环保,配伍性好等优点.

(2) 直链烷基苯磺酸钠(LAS)成本低,清洁能力强,但对水硬度敏感,水硬度会影响其去污效果.作为一种绿色环保型的阴离子表面活性剂,脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)的去污效果极佳,温和不刺激,并且易降解,最重要的是具有极佳的抗硬水性能.两者按一定比例复配,改善了LAS的抗硬水能力,降低了洗涤剂的成本,并且与单一的LAS或AES相比,去污效果更好.

(3) 硬水会大大降低表面活性剂的洗涤功效,而且洗涤剂中大量表面活性剂的加入,也会造成环境污染.为了除去硬水和污物中的Ca2+和Mg2+,降低洗涤剂配方中表面活性剂的含量,另外,泡沫也有利于清除硬表面上的油污以及灰尘等,所以,实验中加入洗涤助剂6501来提高泡沫稳定性和去污效果,并且有助于提高三氯生的溶解性.

(4) 上述配方解决了传统洗涤剂配方不环保的问题,并且兼具洗涤和抗菌的双重功效,有效解决了产品功能单一问题.

1.4 抗菌硬表面洗涤剂的制备

(1)将一定量的LAS溶于盛有一定量去离子水的烧杯中,控制水浴温度为45,℃,搅拌5,min,缓慢加入AES,边加边搅拌,充分混合30,min.

(2)将0.5%,(质量分数,下同)的三氯生分散于2%,的6501中,控制水浴温度为45,℃,搅拌5,min.

(3)将两种溶液倒在一起混合均匀,加入1%,乙醇调节样品黏度,柠檬酸调节样品pH至中性即可.

1.5 抗菌硬表面洗涤剂的黏度测试实验

将盛有适量样品的烧杯置于恒温水浴锅中,温度为25,℃,旋转黏度计的剪切速率为344,s-1,进行样品洗涤剂的黏度测试.

1.6 抗菌硬表面洗涤剂的去污力测试实验

将改良里那兹法与仲裁法相结合[14],测试该洗涤剂的去污力.油污是由5,g单硬脂酸甘油酯和95,g植物油制备而成.取1个洁净干燥的载玻片,称量,记为0;载玻片单面均匀涂抹油污,放置4,h,称量,记为1,载玻片油污量控制在(0.65±0.05)g范围内.然后将其置于洗涤装置的卡槽中,设置转速为250,r/min,洗涤液温度为30,℃,洗涤3,min晾干,称量,记为2.实验重复3次,满足相对平均偏差≤5%,[15-16]的要求.去油率计算式为

   (1)

1.7 细菌实验方法

1.7.1 菌悬液的制备

实验菌株为大肠杆菌(ATCC6538)、金黄色葡萄球菌(ATCC2592),均由中国科学院微生物研究所提供.将各实验菌进行增菌培养,分离培养单个菌落,取典型菌落接种在琼脂培养基斜面上,培养24,h.取24,h新鲜斜面培养物,用5,mL胰蛋白胨生理盐水(TPS)洗下菌苔,涡旋混合仪混合20,s制备成菌悬液.

1.7.2 中和剂鉴定实验

实验菌为大肠杆菌与金黄色葡萄球菌,实验设6组(见表1),按悬液定量杀菌实验操作程序进行.由表1可知,第1组无菌生长或菌数远少于第2组,第2组菌数超过50,CFU/mL时,第3、4、5组组间菌落数相差不超过15%,,第6组无菌生长,表明所选中和剂及其浓度适宜[17-18].实验重复3次.

表1 中和剂鉴定实验结果

Tab.1 Results ofverificationtest for neutralizer

1.7.3 抗菌硬表面洗涤剂的杀菌实验

以标准无菌硬水将抗菌硬表面洗涤剂按所需浓度配制成试样,置(20±1)℃水浴中待用.在无菌试管中加入0.1,mL菌悬液和5.0,mL试样(阳性对照为TPS),立即混匀计时.作用至规定时间,取0.5,mL菌药混合液加入4.5,mL中和剂试管中混匀,中和作用10,min.用稀释液进行10倍梯度稀释,选2~3个合适的稀释度样液.取1.0,mL样液接种和倾注培养基,置于37,℃恒温箱中培养24,h,活菌计数,计算杀灭率[19].实验重复3次.杀灭率计算式为

   (2)

式中:为未含样品的平均菌落数;为含样品的平均菌落数.

1.7.4 抗菌硬表面洗涤剂的持续抑菌实验

取无菌平皿,用稀释至一定浓度的抗菌洗涤剂浸泡5,min,去离子水冲洗3次,自然风干.取含102~103,CFU/mL的菌悬液1,mL接种和倾注培养基,置于37,℃恒温箱中培养24,h,活菌计数,计算杀灭率.实验重复3次.

1.7.5 抗菌硬表面洗涤剂的微生物总数测定实验

以无菌操作,取样品放于灭菌生理盐水中进行10倍逐步梯度稀释,分别吸取1,mL各稀释度的样品(阳性对照为灭菌生理盐水)接种和倾注于灭菌培养基上,置于37,℃恒温箱中培养48,h.每个稀释度做两组平行试验,活菌计数.阳性对照组需要无菌落生长,否则,说明生理盐水被污染,应更换无污染的生理盐水重新进行实验.实验重复3次.

1.7.6 抗菌硬表面洗涤剂的储存有效期测定实验

将样品密封于54,℃恒温箱内14,d.观察放置前后样品的外观状态,并进行抑菌实验.结果表明,在54,℃恒温环境下存放14,d后,杀菌效果下降率≤10%,,贮存有效期可定为1年.杀菌效果下降率的计算式为

   (3)

式中0和t分别表示样品放置前后的抑菌圈直径.

1.7.7 抑菌实验

取无菌棉签将菌悬液(5×105~5×106,CFU/mL)分别均匀涂抹在营养琼脂培养基平板表面,室温下自然干燥后备用.分别滴加20,μL不同稀释浓度的抗菌硬表面洗涤剂于直径为5,mm的无菌滤纸片上,置于洁净操作台中,自然干燥,分别贴附于染菌培养基平板表面,置于37,℃的恒温箱中培养16~18,h,测量抑菌圈直径,以抑菌圈(含纸片)直 径>7,mm,判定为有抑菌作用[20-21].阴性对照组应无抑菌圈产生,否则实验无效.实验重复3次.

2 实验结果与讨论

2.1 抗菌硬表面洗涤剂的黏度和去污力测试分析

对于液体洗涤剂的黏度并未给出国家标准,基于使用要求和生产控制的角度,一般控制产品黏度为1.0~4.5,Pa·s[22].

去污力是考察洗涤剂质量的一个重要指标,实验采用了去油率法评价硬表面洗涤剂.表2为5种不同配方的抗菌硬表面洗涤剂.

表2 5种抗菌硬表面洗涤剂配方

Tab.2 Five kinds of formulations of antibacterial hard surface detergent

注:D-1~D-5代表抗菌硬表面洗涤剂.

D-1~D-5的外观及其稳定性测试结果:样品均为淡棕色的澄清透明溶液,放置前后无气味改变; -5,℃环境中放置24,h,取出于室温条件下缓慢溶解,未出现沉淀和结晶;(40±1)℃环境中放置24,h,取出立刻观察,未出现浑浊和分层,所以样品外观及其稳定性合格.

由表3抗菌硬表面洗涤剂黏度测试结果可以看出,D-1~D-5中,随着AES加量的逐渐减少,LAS加量不断增多,但二者总的添加量不变,黏度也是随之逐渐增大,但均满足1.0~4.5,Pa·s的范围要求.

表3 抗菌硬表面洗涤剂的黏度测试结果

Tab.3 Results of viscosity test for antibacterial hard sur-face detergent

由表4抗菌硬表面洗涤剂去污力测试的数据可知,样品重复测试3次,样品D-1~D-5的去污力测试的相对平均偏差≤5%,,实验数据可行.当表面活性剂中AES、LAS、6501质量比为7∶3∶1时,硬表面洗涤剂的去污效果好,即D-3去污效果最佳.样品D-3去油率结果取3次平均值为79.6%,,去污力测试数据的相对平均偏差为 0.9%,,满足标准要求.所以,选取样品D-3进行细菌实验.

表4 抗菌硬表面洗涤剂去污力测试结果

Tab.4 Results of detergency test for antibacterial hard surface detergent             %

注:SD为平均偏差.

2.2 中和剂鉴定实验结果

中和剂鉴定的实验结果表明,中和剂:1.00,g卵磷脂、1.00,g甘氨酸、3.00,g吐温-80、0.50,g硫代硫酸钠,加入0.03,mol/L的磷酸盐缓冲液(PBS)至100,g[23],能有效中和含0.5%,的三氯生抗菌硬表面洗涤剂的残留毒性,中和剂及其中和产物对实验菌和培养基均无影响(见表1)

2.3 抗菌硬表面洗涤剂的杀菌实验结果分析

根据图1抗菌硬表面洗涤剂的杀菌实验结果可知,用实验菌悬液与D-3抗菌硬表面洗涤剂原液及其制成的10倍稀释液和50倍稀释液作用5,min, D-3原液对大肠杆菌的杀灭率为98.08%,,对金黄色葡萄球菌的杀灭率达到96.90%,.随着样品的逐步稀释,三氯生的质量分数逐渐降低,其杀菌效果也有所减弱,当质量分数降为0.01%时,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀灭率分别为93.10%和92.67%,但仍在90%以上.此结果满足国标[24]中对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀灭率均≥90%的抗菌要求.

图1 抗菌硬表面洗涤剂的杀菌实验结果

将抗菌硬表面洗涤剂D-3原液做50倍稀释,其作用5,min杀灭率与同类产品中使用其他杀菌成分的相比,均表现出优异的抗菌能力[25].根据表5中不同杀菌成分洗涤剂的杀灭率数据比较可以看出,抗菌硬表面洗涤剂的杀菌成分质量分数为0.01%,远低于同类产品的杀菌成分质量分数0.75%和5.90%,其杀灭率却高于表5中列举的两种同类产品.所以,与同类产品相比,D-3在用量与杀菌方面存在明显优势.

表5 不同杀菌成分的洗涤剂的杀灭率比较

Tab.5 Comparison of bacterial inactivation rate for de-tergent containing different antiseptics

2.4 抗菌硬表面洗涤剂的持续抑菌实验结果分析

取抗菌硬表面洗涤剂D-3的原液、10倍稀释液、50倍稀释液,并用不含抗菌成分的抗菌硬表面洗涤剂做阳性对照,进行持续抑菌实验.

由表6持续抑菌实验结果可以看出,抗菌硬表面洗涤剂原液浸泡过的无菌平皿能够100%,地持续抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长.随着D-3原液稀释倍数的逐步增加,持续抑菌能力也随之减弱.对样品原液进行50倍稀释,浸泡无菌平皿,持续杀灭率对大肠杆菌为63.74%,对金黄色葡萄球菌为83.23%.阳性对照组,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的持续杀灭率分别为5.25%和 7.18%.结果表明,此抗菌硬表面洗涤剂具有对细菌的持续抑制作用,其中起抗菌作用的主要成分为三氯生.

表6 抗菌硬表面洗涤剂的持续抑菌实验结果

Tab.6 Results of continuous bacterial inactivation for antibacterial hard surface detergent

2.5 抗菌硬表面洗涤剂的微生物总数测定

洗涤剂标准要求产品中存在的菌落总数<200,CFU/mL[24],根据细菌总数测试方法[28]对D-3进行细菌总数的测定.结果表明,D-3原液、10倍稀释液和50倍稀释液中微生物总数均为0,CFU/mL,满足低于200,CFU/mL的标准要求.

2.6 抗菌硬表面洗涤剂的储存有效期测定实验

储存稳定性实验方法包括微生物和化学测定两种方法.微生物测定法是在某些特定条件下,样品放置前后对微生物杀灭率的测定;化学测定法是在某些特定条件下,样品放置前后对有效杀菌成分含量的测定.本实验通过微生物测定法测定样品D-3的稳定性.

由表7样品D-3抗菌硬表面洗涤剂50倍稀释液(放置前后)的抑菌实验结果可以看出,抗菌硬表面洗涤剂50倍稀释液在54,℃恒温箱内放置14,d前后,对大肠杆菌的抗菌作用没有减弱,对金黄色葡萄球菌杀菌效果下降率为1.28%,符合杀菌效果下降率≤10%的要求.所以,抗菌硬表面洗涤剂的杀菌稳定性合格,其贮存有效期可定为1年.

表7抗菌硬表面洗涤剂50倍稀释液(放置前后)的抑菌实验结果

Tab.7 Results of bacteriostatic tests for antibacterial hard surface detergent diluted 50 times(before and after placement)              mm

3 结 论

(1) 本实验通过LAS、AES两种表面活性剂的复配,并以三氯生作为杀菌剂,制备了一种高效抗菌硬表面洗涤剂.

(2) 黏度和去油率测试结果表明,D-1~D-5均符合感官要求的黏度范围;总活性物质量分数为22%,AES、LAS、6501质量比为7∶3∶1,即D-3的去污效果最佳,为79.6%,AD-3的黏度为2.9,Pa·s.

(3) 实验菌株为大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,D-3原液对大肠杆菌的杀灭率为98.08%,原液50倍稀释液对大肠杆菌的持续杀灭率为63.74%;D-3原液对金黄色葡萄球菌的杀灭率为96.90%,原液50倍稀释液对金黄色葡萄球菌的持续杀灭率为83.23%.与同类产品相比,D-3在用量、杀菌效果及持续抑菌方面具有明显优势,发展前景非常可观.

(4) 样品微生物总数测定和储存稳定性的测定实验结果表明,样品D-3微生物总数为0,CFU/mL,满足标准要求,样品D-3贮存有效期为1年.

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(责任编辑:田 军)

Preparation and Performance Analysis of a New High-Efficiency Antibacterial Hard Surface Detergent

Guo Jintang,Xue Xuexue,Dai Mingxue,Yu Peiyun

(School of Chemical Engineering and Technology,Tianjin University,Tianjin 300350,China)

With regard to the monofunction of detergent,a high-efficiency antibacterial hard surface detergent was designed which presents hard surface washing and antibacterial effects.The deoiling rate of the detergent could reach 79.6% when the mass ratio of alkyl ethoxy ether sulfate(AES),sodium n-alkyl benzene sulfonate(LAS) and cocoanut fatty acid diethanolamide(6501) is 7∶3∶1 with 22%,(mass fraction)of the total surfactant content.Antibacterial activities of the detergents were demonstrated by suspension quantitative germicidal test and continuous bacterial inactivation tests.The test bacteria were Escherichia coli(E.coli)and Staphylococcus aureus(S.aureus).Results show that when 0.5%,(mass fraction)triclosan is added,the bacterial inactivation rates reach 98.08%, and 96.90%, and the continuous bacterial inactivation rates of detergent after being diluted 50 times are 63.74%, and 83.23%,.Compared with other germicides in similar products,this detergent has much higher efficiency with minor dosage of triclosan at removing and/or killing bacteria on the hard surface.The results of storage stability test show that the sample would be valid for one year.

antibacterial hard surface detergent;triclosan;surfactants;detergency performance;antibacteria;stability

10.11784/tdxbz201702048

TQ649.6

A

0493-2137(2018)01-0034-07

2017-02-24;

2017-04-14.

郭锦棠(1968—  ),女,博士,教授.

郭锦棠,jtguo@tju.edu.cn.

2017-04-27.

http://kns.cnki.net/kcms/detail/12.1127.N.20170427.0926.004.html.

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