感染性T细胞检测在耐多药肺结核中的应用效果评价

张金凤

肺结核是因感染结核分枝杆菌而引发的慢性传染性疾病, 患者常在得到有效科学治疗后, 获得较好的治疗效果。但是近年来随着耐多药肺结核的出现, 其传播及蔓延再次成为医疗界关注的重点。肺结核是以体内变态反应及细胞免疫为基础的传染病, 其以T细胞调节为主。肺结核患者往往免疫力低下, 耐多药肺结核患者更为明显［1］。在结核病的诊断方法中, 结核菌素试验是常规的检查方法, 但是其假阳性率较高。相关研究显示, 感染性T细胞检测是一种特异性与敏感性均较高的新兴检查方法［2］。本研究围绕感染性T细胞检测在耐多药肺结核中的应用效果展开讨论, 取得了较为满意的结果, 现具体报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本次研究行回顾性调查法, 随机选取本院2016年1月～2018年1月收治的36例耐多药肺结核患者为A组, 同期78例健康者作为B组。A组中男20例, 女16例；年龄23～73岁, 平均年龄(39.2±11.8)岁；结核分类：10例为原发性肺结核, 26例为继发性肺结核。B组中男48例, 女40例, 年龄22～79岁, 平均年龄(40.1±13.5)岁。两组性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。本研究经本院伦理会讨论并通过, 所有研究对象知晓本次研究内容, 并愿意参与。

1.2 方法 两组研究对象分别进行感染性T细胞检测、结核菌素试验、血清抗结核抗体检测、结核PCR试验、结核分枝杆菌培养及抗酸杆菌涂片。

1.2.1 感染性T细胞检测 取两组研究对象各5 ml的静脉血, 添加枸橼酸钠抗凝, 分离单核细胞后将其放置于微孔板上［其内含有干扰素(IFN)-7抗体、早期分泌抗原靶蛋白-6(ESAT-6)及培养滤液蛋白10(CFP-10)抗原］, 于37℃的环境中恒温培养。24 h后, 洗脱抗原致敏效应T细胞, 并加入二抗(由生物素标记), 在酶联显色后, 于细胞因子处形成斑点, 其斑点数即为T淋巴细胞的数量。当阴性对照孔斑点数＜6时且测试孔斑点数减去阴性对照孔斑点数≥6, 为阳性；或当阴性对照孔斑点数≥6且测试孔斑点数≥2倍阴性对照孔斑点数 , 为阳性［3］。

1.2.2 其他检测方法 ①结核菌素试验：取0.1 ml 结核菌素纯蛋白衍生物(PPD), 即包括5单位结核菌素, 进行前臂尺侧皮内实验, 2～3 d后观察结果, 试验的硬结若≥10 mm即视为阳性；②血清抗结核抗体检测：通过酶标仪检测光密度值(OD值), 对照标准滴度曲线查询相应的抗结核抗体滴度, 其值＞400 U/ml即视为阳性；③结核PCR试验：对结核分枝杆菌进行DNA检测；④抗酸杆菌涂片；⑤结核分枝杆菌培养。

1.3 观察指标及判定标准 比较两组检测结果、A组患者不同检测方法检测结果, 分析不同检测方法敏感性、特异性与准确性。计算公式如下：①特异性=真阴性数/(真阴性数+假阳性数)×100%；②敏感性=真阳性数/(真阳性数+假阴性数)×100%；③准确性=(真阳性数+真阴性数)/总数×100%。

1.4 统计学方法 采用SPSS13.0统计学软件对研究数据进行统计分析。计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组研究对象检测结果、A组患者不同检测方法检测结果比较 A组患者感染性T细胞检测、血清抗结核抗体检测、结核PCR试验、结核分枝杆菌培养、抗酸杆菌涂片、结核菌素试验结果阳性率分别为94.4%(34/36)、13.9%(5/36)、16.7%(6/36)、27.8%(10/36)、2.78%(1/36)、55.6%(20/36),B 组分别为 2.56%(2/78)、23.1%(18/78)、5.13%(4/78)、0、0、25.6%(20/78)。A组患者感染性T细胞检测阳性率高于其他检测方法, 差异具有统计学意义(P＜0.05)；A组患者感染性T细胞检测、结核PCR试验、结核分枝杆菌培养、结核菌素试验结果阳性率均高于B组, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。

2.2 不同检测方法敏感性、特异性与准确性分析 感染性T细胞检测敏感性、特异性、准确性分别为94.4%(34/36)、97.4%(76/78)、96.5%(110/114), 血清抗结核抗体检测分别为13.9%(5/36)、76.9%(60/78)、57.0%(65/114), 结核 PCR 试验分别为16.7%(6/36)、94.9%(74/78)、70.2%(80/114), 结核分枝杆菌培养分别为27.8%(10/36)、100.0%(78/78)、77.2%(88/114),抗酸杆菌涂片分别为2.8%(1/36)、100.0%(78/78)、69.3%(79/114), 结核菌素试验分别为55.6%(20/36)、74.4%(58/78)、68.4%(78/114)。综合对比, 感染性T细胞检测是最理想的检查方式。

3 讨论

由WHO粗略统计, 每年全球大约有20亿人感染结核杆菌, 200万人因感染而导致死亡。我国是结核的高发地区,且近年来其发病率有上升的趋势, 因此如何有效控制结核杆菌的蔓延及预防耐药菌的产生是临床工作的重点［4-6］。

目前临床常用的筛查结核杆菌的方法是结核杆菌试验,但其假阳性率较高；结核PCR技术是一种较为新型的检测方法, 但其过程较为繁琐且结果并未呈现一个较为满意的可靠性而限制了其应用。血清结核杆菌抗体试验的敏感度较低,因检查费用昂贵而应用不广。相关研究报道, 近年来兴起的感染性T细胞检测具有较为理想的敏感性与特异性, 其应用原理是通过斑点数来推断患者体内的结核菌群数, 检测效应T细胞来诊断是否受到结核杆菌的感染［7,8］。当机体长期暴露于结核杆菌的感染下时, 当抗原再次侵犯能迅速激发体内的免疫反应, 从而分泌γ-干扰素, 对结核杆菌的判断及是否处于活动状态有较高的临床意义［9,10］。同时, 该检测方法简单易行, 价格便宜, 且属于体外试验, 患者更容易接受。综上所述, 对于耐多药肺结核而言, 感染性T细胞检测具有较为理想的特异性与敏感性, 对耐多药肺结核的检出更具优势, 值得在临床中进一步推广。