PI3K/AKT/mTOR通路及免疫球蛋白参与的肉芽肿性小叶乳腺炎发病机制研究

赵阳 王西京 张淑群 康华峰 管海涛 靳耀锋 单昌友 刁岩

[摘要] 目的 分析PI3K/AKT/mTOR通路及免疫球蛋白参与的肉芽肿性小叶乳腺炎发病机制，为相关治疗提供参考。 方法 选取2015年6月～2016年6月西安交通大学第二附属医院（以下简称“我院”）收治的60例肉芽肿性小叶乳腺炎患者作为观察组，选取我院同期健康体检者30名作为对照组，分析患者PI3K/AKT/mTOR通路蛋白及免疫球蛋白水平变化。 结果 与对照组比较，观察组PI3K、AKT、mTOR及白细胞介素-2（IL-2）、IL-6、IL-10水平明显升高，IgA、IgM及IgG水平明显降低，且差异均有统计学意义（P < 0.05）。 结论 PI3K/AKT/mTOR通路及免疫球蛋白与非肉芽肿性小叶乳腺炎发病过程密切相关。

[关键词] PI3K/AKT/mTOR信号通路；免疫球蛋白；白细胞介素；肉芽肿性小叶乳腺炎

[中图分类号] R655.8 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2018）10（c）-0008-03

[Abstract] Objective To analyze the pathogenesis of granulomatous lobular mastitis involved in PI3K/AKT/mTOR pathway and immunoglobulin， and provide reference for related treatment. Methods Sixty patients with granulomatous lobular mastitis diagnosed and treated from June 2015 to June 2016 in the Second Affiliated Hospital of Xi′an Jiaotong University （“our hospital” for short） were selected as the observation group. Thirty healthy subjects in our hospital were selected as the control group. The patient′s PI3K/AKT/mTOR pathway protein and immunoglobulin levels were analyzed. Results Compared with the control group， the levels of PI3K， AKT， mTOR and interleukin-2 （IL-2）， IL-6， IL-10 were significantly increased in the observation group， and the levels of immunoglobulin IgA， IgM and IgG were significantly decreased， the differences were statistically significant （P < 0.05）. Conclusion PI3K/AKT/mTOR pathway proteins and immunoglobulin have a close relationship with the pathogenesis of granulomatous lobular mastitis.

[Key words] PI3K/AKT/mTOR pathway； Immunoglobulin； Interleukin； Granulomatous lobular mastitis

非哺乳期乳腺炎是一組发生在女性非哺乳期的病原学证据不明的非特异性炎症，其病理类型多样，临床上最常见的为肉芽肿性小叶乳腺炎和导管周围乳腺炎[1-2]。肉芽肿性小叶乳腺炎发病率呈逐步增高趋势，临床上此病易被误诊为乳腺增生，与乳腺癌亦难以区分。肉芽肿性小叶乳腺炎治疗方法多样，疗效区别较大，且容易反复发作，也有不少患者因就诊较晚或治疗不当而导致病变范围扩大，以至于切除乳房，严重影响患者的生活质量，对广大女性的身心健康造成巨大影响[3-4]。PI3K/AKT/mTOR信号转导通路参与了多种乳腺疾病的病理过程[5]，但尚未见到其与肉芽肿性小叶乳腺炎相关性的报道。本研究分析了PI3K/AKT/mTOR通路及免疫球蛋白参与的肉芽肿性小叶乳腺炎发病机制，以期为相关治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年6月～2016年6月西安交通大学第二附属医院（以下简称“我院”）诊治的肉芽肿性小叶乳腺炎患者60例作为观察组，年龄21～49岁，平均（30.6±6.4）岁。选取我院同期健康体检者30名作为对照组，年龄17～48岁，平均（28.8±7.9）岁。两组研究对象年龄比较，差异无统计学意义（t = 0.546，P > 0.05）。

1.2 纳入标准

观察组纳入标准：①临床高度怀疑且术前病理证实是肉芽肿性小叶乳腺炎；②未合并先天性心脏病、严重颅内损伤、乳腺癌、糖尿病、严重肝肾功能不全等疾病；③已签署知情同意书且符合医学伦理委员会基本要求。对照组纳入标准：①各项体检健康者；②未合并先天性心脏病、严重颅内损伤、严重肝肾功能不全等疾病；③已签署知情同意书且符合医学伦理委员会基本要求。

1.3 治疗方法

根据最新共识意见及我院肿瘤科经验，患者予以左氧氟沙星0.6 g/d，共1周，并口服醋酸泼尼松30 mg/d，见效后继续按此剂量口服2周，每2周减量5 mg，如病情好转或痊愈，征求患者意见行手术治疗或继续治疗至少6周。如治疗1周后效果不佳，加用甲氨蝶呤10 mg/周。

1.4 主要试剂

全波长酶标仪（RT6100型，深圳雷杜生命科学有限公司），PI3K检测试剂盒（上海广瑞生物科治疗前技有限公司），AKT检测试剂盒（R&D;公司），mTOR检测试剂盒（Sigma Aldrich公司），白细胞介素2（IL-2）检测试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司），IL-6检测试剂盒（BD公司）；IL-10检测试剂盒（eBioscience公司），IgA、IgG检测试剂盒（Mabtech公司），IgM检测试剂盒（Abcam公司）。

1.5 观察指标检测方法

抽取所有研究对象治疗前的空腹静脉血，1500 r/min离心10 min，分离上层血清，采用酶联免疫吸附测定法检测各组研究对象血清中PI3K/AKT/mTOR通路蛋白PI3K、AKT、mTOR、IL-2、IL-6、IL-10水平，并分析其变化。所有检测均按试剂盒说明书进行。

1.6 统计学方法

采用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组PI3K、AKT和mTOR水平变化分析

与对照组比较，观察组PI3K、AKT和mTOR水平明显升高，差异均有统计学意义（P < 0.05）。见表1。

2.2 两组免疫球蛋白水平变化分析

与对照组比较，观察组IgA、IgM及IgG水平明显降低，差异均有统计学意义（P < 0.05）。见表2。

2.3 两组炎症因子水平变化分析

与对照组比较，观察组IL-2、IL-6及IL-10水平明显升高，差异均有统计学意义（P < 0.05）。见表3。

3 讨论

3.1 肉芽肿性小叶乳腺炎发病情况及本研究结果

肉芽肿性小叶乳腺炎的发病率逐年增高，城市和农村发病率均明显升高。多数患者及医疗机构对此病缺乏正确认识，致使发生漏诊、误诊及病变范围扩大，或治疗后复发，从而导致治疗时间延长，甚至需行乳房切除术，这对患者的身心健康及生活质量带来灾难性的影响。因此，分析肉芽肿性小叶乳腺炎的发病机制对临床诊断和治疗具有重要的参考价值。本研究分析了PI3K/AKT/mTOR通路及免疫球蛋白参与的肉芽肿性小叶乳腺炎发病机制，发现观察组PI3K、AKT、mTOR、IL-2、IL-6、IL-10水平明显升高，而IgA、IgM、IgG水平明显降低，差异均有统计学意义（P < 0.05）。提示PI3K/AKT/mTOR通路蛋白及免疫球蛋白与肉芽肿性小叶乳腺炎发病过程密切相关。

3.2 PI3K/AKT/mTOR通路异常及其与乳腺疾病发病的相关性

PI3K/AKT/mTOR通路异常与乳腺的多种病理过程密切相关[6-7]。PTEN调控的该信号通路与乳腺癌细胞的凋亡过程密切相关[8]。PI3K/AKT/mTOR信号通路调控了突变难治性晚期乳腺癌的病理学过程[5]。本研究发现观察组PI3K、AKT、mTOR水平明显升高，提示PI3K/AKT/mTOR通路及免疫球蛋白与非哺乳期乳腺炎发病过程密切相关。

3.3 乳腺疾病的发病与免疫球蛋白水平异常的相关性分析

免疫球蛋白是机体免疫功能的主要参与者和调控者，其水平异常与乳腺炎的发病有关[9]。非哺乳期乳腺炎患者血液中免疫球蛋白及补体水平异常，患者外周血自身抗体ANA、AHA阳性率高，揭示非哺乳期乳腺炎是一种免疫功能紊乱的自身免疫性疾病[10]，且非哺乳期乳腺炎患者外周血T淋巴细胞、免疫球蛋白及补体水平与正常人有显著差异[11]。非哺乳期乳腺炎患者的免疫功能紊乱，其紊乱程度与发病年龄、生育状况及乳房炎性结块面积有关系[12]。本研究也发现，观察组IgA、IgM、IgG水平明显降低，提示免疫球蛋白与肉芽肿性小叶乳腺炎发病过程密切相关。

3.4 白细胞介素水平异常与乳腺疾病的关系分析

白细胞介素调控的炎性反应也是乳腺疾病发生的重要因素，其水平异常与乳腺炎的病理过程有关[13-14]。除癖消溢散治疗浆细胞性乳腺炎的疗效确切，其作用与降低乳腺组织和血清IL-6、TNF-α水平，减轻急性炎性反应有关[15]。IL-2、IL-4在浆细胞性乳腺炎过程中发挥重要作用，浆细胞性乳腺炎组织中免疫平衡可能向Th1方向偏移[16]。祛腐生肌方内服外敷肿块型浆细胞性乳腺炎效果良好，能有效改善症状，调节白细胞介素水平[17]。浆细胞性乳腺炎组织中的IL-1β、TNF-α高表達，两者对浆细胞性乳腺炎的发展发挥了协同作用，且乳腺炎血清IL-18水平较正常显著升高，乳腺炎越严重则血清IL-18水平越高，血清IL-18水平可能为乳腺炎的诊断和预测提供依据[13，18]。本研究中观察组IL-2、IL-6、IL-10水平明显升高，提示白细胞介素与肉芽肿性小叶乳腺炎发病过程密切相关，与上述研究一致。

3.5 研究结论及下一步的研究工作

本研究发现PI3K/AKT/mTOR通路的激活、白细胞介素水平的升高和免疫球蛋白水平的降低均参与了肉芽肿性小叶乳腺炎发病过程，推测可能是PI3K/AKT/mTOR通路的激活导致机体发生明显的炎性反应，即表征为白细胞介素水平的明显升高，而同时PI3K/AKT/mTOR通路的激活和炎性反应的发生共同引起了机体免疫机能的降低，即IgA、IgM、IgG水平明显降低。进一步从细胞水平上对该假设进行验证，以期为临床肉芽肿性小叶乳腺炎的诊断及治疗提供更多的参考依据。

综上所述，PI3K/AKT/mTOR通路蛋白及免疫球蛋白与肉芽肿性小叶乳腺炎发病过程密切相关。

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（收稿日期：2018-08-07 本文编辑：任 念）