玛咖不同提取物对雄性小鼠交配能力的影响

陈恺 韦会平(通讯作者)

（攀枝花学院医学院 四川 攀枝花 617000）

玛咖（LepidiummeyeniiWalp）为十字花科独行菜属一年生草本植物，原产于海拔3500米以上的秘鲁安第斯山脉地区，在原产地作为当地主要农产品已有上千年的栽培历史，因其具有增强生育力和提高性功能的作用而闻名于世[1]。上世纪80年代联合国粮农组织(FAO)建议世界各国推广玛咖种植[2]，2011年开始，该作物被卫生部作为新资源食物被引入国内，开始在我国大量推广人工种植。2012-2014年，玛咖被引入到四川攀枝花市高山地区进行规模化种植，并因其稳定的产量和较高的品质闻名国内外。2015年后，因为我国各地盲目大规模发展玛咖种植及国内外市场变化等原因，玛咖产业一落千丈，面临破产。目前，关于玛咖的实际药用保健价值众说纷纭。有人认为玛咖较高的药用价值不容否认，也有人认为玛咖根本就没有什么真正的药用功效。本文以攀枝花产玛咖为研究对象，通过动物试验观察其对雄性动物交配能力的影响，研究期药效活性部位，为进一步深入研究其化学成分和药效提供参考。

1.材料与方法

1.1 药品与试剂

玛咖由攀枝花三博士科技有限公司提供，为产自四川省攀枝花市海拔3300的格萨拉风景区的正品晒干黄玛咖。苯甲酸雌二醇由宁波第二激素厂生产（批号20151121）。万艾可由美国辉瑞公司生产（批号1183028）。其它试剂均为市售分析纯。SZX7型体视显微镜(日本，Olympus公司)；DMIL-LED 型倒置显微镜（德国，Leica 公司），SC-100-01-02-C 型一次性精子计数板（荷兰，Leja 公司），Direct-Q5 型MilliQ 超纯水器（美国，Millipore 公司）。其它有低温高速离心机、电子天平、微量移液器、手术器械、眼科剪、眼科镊、持针钳、酒精灯等。

1.2 试验动物

6～8周龄清洁级昆明系小鼠，购于重庆市中药研究所动物中心（动物合格证号SCXK(渝)20150006），雌、雄各半，体重18-22g。雌鼠群养，雄鼠单笼饲养，控制光照时间为每日7∶00～18∶00，饲喂普通饲料，自由饮水。

1.3 玛咖提取物的制备

玛咖样品粉碎，过40目筛，依次分别用10倍体积的石油醚、无水乙醇、蒸馏水在50℃下磁力搅拌回流提取3次，每次30min，回收溶剂，再分别用1%聚山梨酯溶解，得到醚提取物、醇提取物、水提取物三种不同的混悬剂。另取等量玛咖粉末样品，混合用蒸馏水作溶剂进行提取，同样的方法制备得到混合水提取物的混悬剂。所有混悬剂玛咖含量均相当于生药250mg/mL.

1.4 试验方法

60只成年雄性小鼠随机平均分为6组：对照组（0.9%生理盐水）、万艾可组（0.013g/kg BW）、醚提取物组（5 g生药/kg BW）、醇提取物组（5g生药/kg BW）、水提取物组（5g生药/kg BW）及混合水提取物组（5g生药/kg BW）。除万艾可组于试验前1h灌胃给药外，其余各组均连续灌胃给药28d。灌胃容积均为0.2mL/10gBW，qd。实验前48h雌鼠皮下注射苯甲酸雌二醇（0.02mg/只），再于晚上7～11时将雄性小鼠混合放入笼中5min，使其适应环境，然后每笼加入1只雌鼠，观察并记录捕捉潜伏期（雄鼠第1次捕捉雌鼠的时间）、20min内雄鼠捕捉雌鼠的次数、交配潜伏期（雄鼠第一次与雌鼠交配的时间）、20min内交配次数[3]。数据以（±s）表示，使用SPSS 17.0 版软件，通过t检验进行组间比较。

2.结果与分析

试验结果见表1。玛咖醚提取物组、醇提取物组对雄鼠捕捉潜伏期、捕捉雌鼠次数、交配潜伏期及20min内交配次数无显著影响（P＞0.05），而水提取物组、混合水提取物组均可显著降低雄鼠捕捉潜伏期和交配潜伏期，并增加捕捉雌鼠次数和20min内交配次数。混合水提取物组和水提取物组相比，前者的捕捉潜伏期和交配潜伏期显著低于后者，前者的捕捉雌鼠次数和20min内交配次数显著高于后者。

表1 玛咖不同提取物对雄性小鼠交配能力的影响（±s，n=10）

表1 玛咖不同提取物对雄性小鼠交配能力的影响（±s，n=10）

注：与对照组比较，*代表P＜0.05，**代表P＜0.01

组别 捕捉潜伏期（s） 捕捉次数 交配潜伏期（s） 交配次数对照组 132.3±12.14 8.7±1.42 317.3±14.26 4.2±1.23醚提取物组 133.1±14.51 8.4±2.11 322.4±19.21 4.5±1.45醇提取物组 132.8±12.65 8.8±1.47 318.4±15.39 4.4±1.12水提取物组 119.5±11.12* 9.9±1.22* 300.2±10.54* 5.9±0.89*混合水提取物组 105.3±10.16** 11.1±1.83** 283.4±18.21** 7.2±1.64**万艾可组 94.6±11.21** 13.5±1.79** 251.3±12.66* 8.3±1.25**

3.结论与讨论

本试验中，玛咖醚提取物组、醇提取物组对雄鼠捕捉潜伏期、捕捉雌鼠次数、交配潜伏期及20min内交配次数无显著影响，而水提物则能显著降低雄鼠捕捉潜伏期和交配潜伏期、增加捕捉雌鼠次数和20min内交配次数。这说明，玛咖水提物能显著提高雄性小鼠的性功能。以往的很多试验都证明，玛咖能显著提高试验动物的性功能[3-9]。本试验结果与曹东、王曦晨等人的研究结果相同[3-4]。

本试验中，玛咖在用石油醚、乙醇先行提取后，再用水提取得到的水提取物，和不用石油醚、乙醇先行提取，而直接用水提取得到的混合水提取物的药用功效存在显著差异。后者的雄鼠捕捉潜伏期、交配潜伏期均显著低于前者，捕捉雌鼠次数、20min内交配次数均显著高于前者。这充分说明在用石油醚、乙醇和水依次提取玛咖的过程中，可能有部分药用活性成分进入了石油醚或乙醇的提取物中，导致水提取物的药用功效显著降低。而混合水提取物中，存在多种成分的共同作用，导致其对雄鼠性功能的影响更为显著。

有研究资料表明，关于玛咖提高雄性小鼠精子数量的机制，可能与其中含有的玛咖酰胺、玛咖烯以及丰富的精氨酸和果糖等关系密切[10-11]。王曦晨等人的研究表明，玛咖水提浸膏具有提高半去势大鼠的交配能力和阴茎勃起功能的作用，其机制可能与调整失衡的血清性激素水平有关[4]。我们以往对攀产玛咖的测定分析表明，玛咖中生物碱、水溶性多糖、精氨酸、Zn的含量都较高[12]。现代科学研究证明，这些成分本身与动物的性能力、精子的生成或活力等都有一定关系。本试验中，玛咖混合水提取物对雄性小鼠性交配能力的影响要显著高于水提取物，这证明玛咖对小鼠性功能的影响极有可能是这些成分共同作用的结果。

综上所述，本试验充分表明，玛咖能显著提高雄性小鼠的交配能力，药用活性成分主要存在于水提物中，且可能是多种成分共同作用的结果。

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