糖尿病肾病患者血清Vaspin水平变化及其与炎症因子的关系

安仲武,冯小娟,蒋玲,李海英,冯小娟,史保强

(1 江苏大学医学院，江苏镇江 212013；2 连云港市东方医院)

糖尿病肾病患者血清Vaspin水平变化及其与炎症因子的关系

安仲武1,2,冯小娟2,蒋玲2,李海英2,冯小娟2,史保强2

(1 江苏大学医学院，江苏镇江 212013；2 连云港市东方医院)

目的探讨糖尿病肾病(DN)患者血清脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)水平变化及其与炎症因子的关系。方法选择2型糖尿病(T2DM)患者118例，按DN临床进展分期分组：糖尿病白蛋白尿正常组(DM组)38例、早期DN微量蛋白尿组39例(早期DN组)、临床DN大量蛋白尿组41例(临床DN组)，以同期45例体检健康者为对照组。采用ELISA法检测四组血清Vaspin、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6 )、单核细胞趋化因子1(MCP-1)和IL-10水平，比较各组水平，并进行相关分析。结果与对照组比较，其他各组Vaspin、TNF-α、IL-6、MCP-1水平高(P均<0.05)，DM组、早期DN组、临床DN组IL-6、TNF-α、MCP-1水平依次升高，Vaspin水平依次降低，各组间比较，P均<0.05。临床DN组IL-10水平高于对照组，其余各组间比较，P均>0.05。Vaspin与促炎因子IL-6、TNF-α、MCP-1呈负相关(r分别为-0.42、-0.42 、-0.46，P均<0.05)，与抗炎因子IL-10无关(r=0.21，P>0.05)。结论DN患者血清Vaspin水平升高，其与血清促炎因子呈负相关。

糖尿病肾病；脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂；炎症因子

糖尿病性肾病(DN)是糖尿病的慢性并发症之一，是糖尿病致死的主要因素。DN的发病机制复杂，涉及到包括遗传、环境、饮食等多因素共同作用而引发的一系列病理生理过程。越来越多研究证实，DN的每个阶段病变都有炎症因子参与，促炎因子、抗炎因子与DN的发生发展密切相关[1,2]。脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)是一种新近发现的脂肪因子，其在2型糖尿病的发生、发展中有重要作用[3]。最新研究表明,Vaspin能够抑制TNF-α表达，可能具有一定的抗炎功能[4]。2015年6月～2016年12月，本文通过分析DN患者血清Vaspin与炎症因子在DN不同时期的水平变化，以探讨Vaspin在DN发生、发展中的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2型糖尿病患者118例，均符合1999年WHO规定2型糖尿病诊断标准[5]。男63例、女55例，年龄46～60岁、平均54.4岁，病程2.4～13.5年、中位病程7.2年，无其他并发症。纳入标准：①血压≤130/90 mmHg；②空腹血糖(FPG)≤7.5 mmol/L；糖化血红蛋白(HbA1c)≤7.0%；③血脂控制水平：总胆固醇(TC)<6.0 mmol/L，甘油三酯(TG)<1.7 mmol/L，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)>1.0 mmol/L，低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)<3.0 mmol/L。排除标准：可能影响肾功能的疾病，如急慢性肾小球肾炎、肾盂肾炎、各种感染、尿路梗阻及使用肾毒性药物等；可能引起尿白蛋白排泄率(UAER)升高的疾病。按DN不同进展分期分为3组，糖尿病正常白蛋白尿组(DM组)38例，男20例、女18例,UAER<30 mg/24 h；早期DN微量蛋白尿组(早期DN组)39例，男20例、女19例,UAER 30～300 mg/24 h；临床DN大量蛋白尿组(临床DN组) 41例，男19例、女22例,UAER持续>300 mg/24 h。另选同期体检健康者40例作为对照组，男21例、女19例，年龄45～62岁、平均55.3岁，排除糖尿病、高血压、心血管系统疾病，家族中均无肿瘤或遗传病史，心、肝、肺、肾功能检查均正常。四组年龄、性别血压有可比性。

1.2 血糖、血脂的测定 入选者均空腹10 h以上。清晨空腹抽取静脉血10 mL，37 ℃放置30 min，3 000 r/min离心15 min分离血清。检测FPG、HbA1c、TG、TC、HDL-C、LDL-C,另一管分离血清后-70 ℃冷藏待用。

1.3 血清Vaspin及炎症因子水平检测 采用ELISA法。严格按照试剂盒说明书操作，Vaspin试剂由美国R&D公司提供，肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)和IL-10试剂由深圳晶美公司提供，用北京普朗新技术有限公司生产NDM-9602G酶标分析仪读取数值。

2 结果

2.1 四组FPG、HbA1c及血脂比较 四组、血脂比较，P均>0.05。DM组、早期DN组、临床DN组FPG、HbA1c水平高于对照组(P均<0.05)。见表1。

表1 四组FPG、HbA1c及血脂比较

注：与对照组比较，*P<0.05。

2.2 四组Vaspin、TNF-α、IL-6、MCP-1、IL-10水平比较 与对照组比较，其他各组Vaspin、TNF-α、IL-6、MCP-1水平高(P均<0.05)，DM组、早期DN组、临床DN组IL-6、TNF-α、MCP-1水平依次升高，Vaspin水平依次降低，各组间比较，P均<0.05。临床DN组IL-10水平高于对照组，其余各组间比较，P均>0.05。见表2。

表2 四组Vaspin、TNF-α、IL-6、MCP-1、IL-10水平比较

注：与对照组比较，aP<0.05；与DM组比较，bP<0.05；与早期DN组比较，cP<0.05。

2.3 Vaspin与各炎症因子的相关性 Pearson相关性分析结果显示，Vaspin与促炎因子IL-6、TNF-α、MCP-1呈负相关(r分别为-0.42、-0.42 、-0.46 ，P均<0.05)，与抗炎因子IL-10无关(r=0.21，P>0.05)。

3 讨论

Vaspin是最近研究较多的脂肪细胞因子，属于丝氨酸蛋白酶抑制剂家族成员，具有胰岛素增敏作用，参与多种疾病特别是2型糖尿病患者体内糖、脂代谢调节，在2型糖尿病的疾病进展中有重要作用。研究发现，Vaspin水平随着糖尿病并发症的发生而下降，推测在糖尿病初期Vaspin水平升高可能是IR的一种防御机制，可能参与抑制某些与胰岛素功能相关的蛋白激酶活性，随着并发症的发生，这种代偿机制减弱，导致Vaspin水平下降[6]。但具体机制是否如此，仍有待研究证实。最近研究发现，Vaspin在疾病的炎症反应进程中发挥一定的抗炎作用[4]。研究发现，肥胖小鼠给予重组Vaspin能显著减少炎症因子TNF-α的表达，增加抗炎因子和糖尿病保护性因子脂联素的表达[7]。有研究报道，Vaspin可能通过影响内皮细胞、血管平滑肌细胞和巨噬细胞来改变血管内环境，发挥重要的抗炎作用，有益于斑块的稳定，在动脉粥样硬化机制中扮演着重要角色[8,9]。这些研究报道均表明，Vaspin参与众多疾病的炎症反应进程。

DN作为2型糖尿病的主要并发症之一，其发病机制错综复杂，促炎因子和抗炎因子的相互作用在DN的发生发展中起重要作用。TNF-α、IL-6、MCP-1是体内重要的促炎因子，IL-10具有一定的抗炎作用，它们在DN患者机体的免疫与炎症反应调节中发挥重要作用。本文通过分析在DN炎症进展中血清Vaspin与4种炎症因子水平的变化及其相互关系，探讨Vaspin在DN炎症病变中的作用。

既往研究表明，血清Vaspin水平与体内糖脂代谢关系密切，较高的血糖、血脂水平导致的机体氧化应激反应会导致Vaspin水平升高[10]，较高的血压水平会激活体内的炎症因子[11]，本研究为减少这方面带来的影响，特别选择血糖、血脂、血压控制较好的2型糖尿病患者作为研究对象。在摒除上述因素影响后，本研究显示糖尿病患者血清IL-6、TNF-α、MCP-1水平比对照组高，并且随着白蛋白尿的增加而逐渐升高，说明糖尿病患者本身存在炎症反应，且严重程度与白蛋白尿量有关。血清Vaspin水平随着蛋白尿水平增加而降低，说明Vaspin参与了DN的炎症反应进程。IL-10水平有升高但不显著，与研究报道[12]有所差异，可能与选择病例不同有关。另外通过单因素相关分析显示，血清Vaspin水平与TNF-α、IL-6和MCP-1呈负相关，提示Vaspin及炎症因子相互影响、相互作用，共同参与DN患者病情的发生、发展，但具体机制有待进一步研究。总之，炎症反应始终伴随着DN的病情进展，脂肪细胞因子Vaspin有一定的抗炎作用，其水平变化与炎症因子密切相关，具体的作用机制有待进一步研究。动态监测2型糖尿病患者Vaspin及其他炎症因子水平并及早干预，对DN的预防与治疗有积极的临床意义，其也是反映DN患者病变进展的重要指标。

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连云港市卫生科技项目(局201524)。

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2017-06-07)