化学发光法检测人免疫缺陷病毒抗体价值的Meta分析

朱有森，曾艳华，张朝霞

(新疆医科大学第一附属医院医学检验中心，乌鲁木齐 830054)

·循证医学·

化学发光法检测人免疫缺陷病毒抗体价值的Meta分析

朱有森，曾艳华，张朝霞△

(新疆医科大学第一附属医院医学检验中心，乌鲁木齐 830054)

目的系统评价化学发光法检测人免疫缺陷病毒(HIV)抗体作为HIV初筛方法的价值。方法通过计算机检索和手工检索方法，收集万方、维普、中国知网(CNKI)、CBM、Pubmed、Web of Science等数据库发表的采用化学发光法检测HIV抗体的中文和英文研究，检索时限截止至2016年11月。由2位研究者按照纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料和评价纳入研究的方法学质量后，应用Meta-disc1.4和Stata12.0软件进行Meta 分析。结果共纳入8篇文献，共计26 168例受试者。Meta分析结果显示：化学发光法检测HIV抗体的合并敏感度为100%(95%CI：1.00～1.00)，合并特异度为100%(95%CI：0.99～1.00)，合并阳性似然比为237.79(95%CI：80.50～702.42)，合并阴性似然比为0.00(95%CI：0.00～0.02)，诊断比值比(DOR)为48 911.05(95%CI：8 257.50～289 711.20)，曲线下面积AUC为0.999 4(SE=0.000 2)。结论化学发光法可作为HIV初筛方法在临床推广应用。

化学发光测定法；人免疫缺陷病毒；Meta分析；诊断性试验

艾滋病又称获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)，是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)引起的病死率极高的恶性传染病，我国于1985年首次报告艾滋病病例以来，HIV感染人数呈逐年上升趋势[1-2]。目前，AIDS是全球15～59岁人群的主要致死原因，已成为全球严重的公共卫生问题[3]。目前我国多采用ELISA检测HIV抗体，但因其易受检测环境、试剂等多种因素的影响，存在诸多的局限性[4]。近年来，具有高灵敏度、自动化的化学发光法在HIV抗体检测中的应用越来越广泛，为系统评价其价值，本研究收集相关中英文文献进行Meta分析，以期为临床应用提供可靠的依据。

1 资料与方法

1.1检索策略 通过计算机检索和手工检索方法，收集万方、维普、中国知网(CNKI)、中国生物医学文献数据库、Pubmed、Web of Science等数据库发表的采用化学发光法检测HIV抗体的中文和英文研究，检索时限截至2016年11月。同时筛选纳入研究的参考文献，以补充相关文献。中文检索词包括：化学发光法、人免疫缺陷病毒抗体、HIV抗体；英文检索词包括：chemiluminescence immunoassay、human immunodeficiency virus antibody、HIV antibody、anti-HIV、Western blot、WB、sensitive、specificity等。采用主题词与自由词相结合的方式进行检索，所有检索策略通过多次预检索后确定。

1.2纳入和排除标准 纳入标准：(1)国内外已发表的化学发光法检测HIV抗体的诊断性试验；(2)包括HIV感染者及HIV非感染者(健康体检者、献血者等)；(3)待评价方法为化学发光法，诊断金标准为蛋白免疫印迹试验(Western blot)和核酸扩增检测(nucleic acid amplification test,NAAT)；(4)结局指标：化学发光法检测HIV抗体的灵敏度、特异度、诊断比值比(diagnostic odds ratio，DOR)和受试者工作特征曲线下面积(area under the curve,AUC)。排除标准：(1)未用化学发光法检测的文献；(2)无金标准或未与金标准比较的文献；(3)数据不全或无法获取四格表数据的文献；(4)综述、文摘或个案报道等文献；(5)非中英文文献；(6)重复发表的文献。

1.3文献筛选、资料提取与质量评价 由2位研究者根据纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料和评价纳入研究的方法学质量，如遇分歧则讨论解决或交由第三方帮助决定。资料提取内容主要包括：(1)研究的基本特征，包括第一作者、发表时间、国家；(2)纳入研究的检测方法，金标准方法；(3)纳入研究的数据信息，包括研究例数、真阳性值、假阳性值、真阴性值、假阴性值。采用诊断准确性研究的质量评价工具(quality assessment of diagnostic accuracy studies，QUADAS)-2[5]对纳入研究的方法学质量及偏倚风险进行评价，包括病例的选择、待评价试验、金标准、病例流程和进展情况4部分，所有组成部分在偏倚风险方面都被评估，前3部分也在临床适用性方面被评估。

1.4统计学处理 采用Meta-disc1.4软件进行Meta分析。通过计算敏感度对数与特异度对数的Spearman 相关系数来检验阈值效应，采用I2对纳入研究进行异质性分析，同时使用I2评估异质性的大小，以P≤0.1为差异有统计学意义。若各研究之间不存在统计学异质性(P>0.1，I2≤50%)，则采用固定效应模型进行Meta分析，反之则采用随机效应模型进行Meta分析。若存在非阈值效应引起的异质性，则采用敏感性分析评估研究结果的稳定性[6]，采用Stata12.0软件绘制Deeks漏斗图评估纳入研究的发表偏倚，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1文献检索结果 通过计算机和手工方法初步检索共获得相关文献256篇，排除重复发表的文献53篇，余203篇文献根据纳入与排除标准，通过阅读题目和摘要进行初筛，剩余64篇文献，仔细阅读全文复筛，排除不同方法、数据不全、综述等文献后最终纳入符合条件的8个研究[7-14]，共计26 168例受试者，包括HIV感染者5 485例，HIV非感染者20 683例。文献筛选流程及结果见图1。

图1 文献筛选流程及结果

2.2纳入研究的基本特征与偏倚风险评估 纳入研究的基本特征见表1。偏倚风险评估结果见图2。

表1 纳入研究的基本特征

TP：真阳性；FP：假阳性；FN：假阴性；TN：真阴性；WB:Western blot-：此项无数据

偏倚风险判断：(1)病例选择：选择的病例是否会产生偏倚；(2)待评价试验：待评价试验的实施或解释是否会产生偏倚；(3)金标准：金标准的实施及解释是否会产生偏倚；(4)病例流程和进展情况：病例的流程是否会产生偏倚；临床适用性评价：(1)病例选择：纳入相关的患者和背景与评价问题匹配情况；(2)待评价试验：待评价试验的实施和解释与评价问题的匹配情况评价；(3)金标准：金标准的适用性评价

图2纳入研究的偏倚风险评估

2.3Meta分析结果

2.3.1异质性检验 通过计算敏感度对数与1-特异度对数的spearman相关系数为0.204(P=0.629)，表明纳入研究不存在阈值效应。以诊断比值比(DOR)探讨非阈值效应引起的异质性，Cochran-Q=46.00(P=0.000 0)，I2=84.8%，表明纳入研究存在非阈值效应引起的异质性。进一步采用随机效应模型进行Meta分析。

2.3.2Meta分析 随机效应模型Meta分析结果显示，化学发光法检测HIV抗体的敏感度为98%～100%，合并敏感度为100%(95%CI：1.00～1.00)，P=0.000 9；特异度为96%～100%，合并特异度为100%(95%CI：0.99～1.00)，P=0.000 0；合并阳性似然比为237.79(95%CI：80.50～702.42)；合并阴性似然比为0.00(95%CI：0.00～0.02)；DOR为48 911.05(95%CI：8 257.50～289 711.20)。绘制ROC，AUC为0.999 4(SE=0.000 2)，Q*=0.995 4(SE=0.002 0)，见图3。

2.3.3亚组分析 为进一步探讨非阈值效应引起的异质性来源，本研究对样本量和金标准数量的不同进行亚组分析，结果提示按照样本量的不同进行分组产生的异质性较低，详见表2。

2.3.4敏感性分析 分别单个排除纳入质量较差的文献，重新计算合并的敏感度、特异度、DOR等数据，与排除前结果相比，结果均未发生明显改变，提示纳入文献的稳定性较好。

2.3.5发表偏倚 采用STATA12.0软件绘制Deeks漏斗图评估纳入研究的发表偏倚，结果显示，t=-1.32，P=0.234，差异无统计学意义，提示存在发表偏倚的可能性较小。见图4。

表2 纳入研究的亚组分析结果

图3 纳入研究的ROC曲线

图4 Deeks漏斗图

3 讨 论

目前HIV感染一般仍以血清或血浆中检测到HIV特异性抗体为诊断依据[15]。而化学发光法与ELISA相比，对于抗体效价较低的弱阳性血清样本具有明显优势，有利于早期发现HIV感染[16]。本研究按照纳入与排除标准对相关文献进行系统性分析与评价，为其临床应用提供循证医学依据 。

本研究共纳入8个相关研究，根据QUADAS-2工具进行质量评价，结果表明：在偏倚风险方面，有3个研究[8,11,13]存在偏倚风险的可能性较低，其余5个研究[7,9-10，12,14]均存在部分未知偏倚风险；在临床适用性方面，有3个研究[9,12,14]存在未知或较高风险。总体来说，本研究纳入的文献质量中等，今后需要更多地开展一些设计严谨、大样本量的相关研究，以获得可信度高的循证医学证据。

由于纳入研究之间存在非阈值效应引起的异质性，采用随机效应模型进行数据分析，结果显示，化学发光法检测HIV抗体的敏感度为98%～100%，合并敏感度为100%，特异度为96%～100%，合并特异度为100%，表明该方法具有较好的临床应用价值。合并阳性似然比为237.79，合并阴性似然比为0.00，合并DOR为48 911.05，表明该诊断试验具有很高的诊断效力。ROC的AUC为0.999 4，说明化学发光法对HIV抗体检测的准确性很高。

为探讨非阈值效应引起的异质性来源，本研究以纳入标本量和诊断金标准对不同亚组进行分析，结果显示，研究的标本量小于或等于3 000和标本量大于3 000的合并敏感度分别为99%和100%，合并特异度分别为99%和100%，I2分别为29.5%和5.0%，与总的I2(84.8%)相比，异质性均有明显的下降；而以诊断金标准的不同分亚组进行分析，结果显示异质性仍较高，提示纳入研究的标本量不同可能为引起异质性的来源之一。

本次Meta分析仍存在以下不足之处：(1)仅检索中、英文已正式发表的文献，存在语种偏倚的可能；(2)纳入的研究数量较少，且部分研究的质量不高，不排除假阳性结果的可能；(3)在选择研究对象时，部分研究仅选取了HIV高发人群，存在选择性偏倚；(4)部分研究未明确说明检测时是否使用了盲法，存在测量偏倚的可能。

综上所述，化学发光法检测HIV抗体具有很高的灵敏度和特异度，同时也具有自动化及高通量的优势，且检测快速，非常适合急诊筛查。但其作为初筛试验，仍存在假阳性的可能，因此，对每一位初筛阳性的被检者，应结合临床资料及确认试验结果综合判断，必要时应定期复检，以便最大限度地预防艾滋病的传播。

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Valueofchemiluminescenceassayfordetectinghumanimmunodeficiencyvirusantibodies:aMeta-analysis

ZhuYousen,ZengYanhua,ZhangZhaoxia△

(DepartmentofClinicalLaboratory,FirstAffiliatedHospitalofXinjiangMedicalUniversity,Urumqi,Xinjiang830054,China)

ObjectiveTo systematically evaluate the value of chemiluminescence assay for detecting human immunodeficiency virus(HIV) antibodies as a HIV preliminary screening method.MethodsThe Chinese and English studies on chemiluminescence assay for detecting HIV antibodies published by the databases of WanFang,VIP,CNKI,CBM,Pubmed and Web of Science were collected by computer retrieval and manual retrieval.The retrieval time limit was from the database establish to November 2016.Two reviewers independently screened the literature,extracted the data and assessed the methodological quality of included studies.Then the meta-analysis was performed by using Meta-disc1.4 and Stata12.0 software.ResultsA total of 8 studies involving 26 168 patients were included.The meta-analysis results showed that the pooled sensitivity of chemiluminescence assay for detecting HIV antibodies was 100%(95%CI：1.00-1.00),the pooled specificity was 100%(95%CI：0.99-1.00),the pooled positive likelihood ratio was 237.79(95%CI：80.50-702.42),the pooled negative likelihood ratio was 0.00(95%CI：0.00-0.02),the diagnostic odds ratio(OR) was 48 911.05(95%CI：8 257.50-289 711.20),and the area under the curve(AUC) was 0.999 4(SE=0.000 2).ConclusionChemiluminescence assay can serve as a HIV preliminary screening method for promotion and application in clinic.

] chemiluminescent measurements;HIV;Meta analysis;diagnostic test

朱有森(1969-)，副主任技师，本科，主要从事急诊检验工作与研究。△

，E-mail:285715300@qq.com。

2016年度重庆市出版专项资金资助项目

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.36.031

R446.6

A

1671-8348(2017)36-5134-03

2017-08-12

2017-09-26)