TCF4、β-catenin和E-cadherin在卵巢癌癌组织中的表达水平及意义*

梁 琛，李小赏，刘焕娣

河北省衡水市第二人民医院(衡水053000)

TCF4、β-catenin和E-cadherin在卵巢癌癌组织中的表达水平及意义*

梁 琛，李小赏，刘焕娣

河北省衡水市第二人民医院(衡水053000)

目的：探讨TCF4、β-catenin和E-cadherin在卵巢癌癌组织中的表达水平及意义。方法：采用免疫组织化学染色法(SP)检测卵巢良性组织、卵巢交界性肿瘤组织及卵巢癌组织中TCF4、β-catenin和E-cadherin分子的表达情况。结果：与卵巢良性组织比较，卵巢癌组织和卵巢交界性肿瘤组织中TCF4、β-catenin阳性表达率和表达评分显著升高(P<0.05)，而E-cadherin阳性表达和表达评分显著降低(P<0.05)，与卵巢交界性肿瘤组织比较，卵巢癌组织TCF4、β-catenin阳性表达率和表达评分显著升高(P<0.05)，而E-cadherin阳性表达和表达评分显著降低(P<0.05)。结论：TCF4、β-catenin和E-cadherin异常表达可能参与卵巢癌的发生、发展过程，对三者联合检测能够提高患者早期诊断及判断预后的重要指标。

卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性中肿瘤之一，其病亡率居女性生殖系统肿瘤首位，其发病年龄逐渐趋于年龄化，严重威胁妇女健康和生命[1-2]。β-连环蛋白(β-catenin)、E-钙粘附素(E-cadherin)、T细胞因子4(TCF4)作为Wnt信号通路主要成员之一，其在肿瘤增殖、侵袭及转移过程中扮演着重要角色[3-4]。本研究通过利用免疫组织化学法检测TCF4、β-catenin和E-cadherin分子在卵巢良性组织、卵巢交界性肿瘤组织及卵巢癌组织中的表达情况，为寻找卵巢肿瘤转移特异标记物及其分子靶向治疗药物提供基础。

资料与方法

1 一般资料 收集衡水市第二人民医院2012年1月至2014年12月病理科确诊的306例卵巢肿瘤组织标本，其中102例卵巢良性组织(A组)、102例卵巢交界性肿瘤组织(B组)及102例卵巢癌组织(C组)，其中卵巢癌组织中患者年龄35～60岁，平均年龄(52.36±4.36)岁，按国际妇产科联盟(FIGO)标准分期：Ⅰ～Ⅱ期50例，Ⅲ～Ⅳ52例；根据组织病理分级：高分化者47例，中、低分化者55例；远处转移者61例，无远处转移者41例，病理类型：浆液性76例，黏液性26例。

2 方 法 采用免疫组织化学染色法(SP)检测卵巢良性组织、卵巢交界性肿瘤组织及卵巢癌组织中TCF4、β-catenin和E-cadherin分子的表达情况。收集所有组织标本经10%中性多聚甲醛浸泡，石蜡包埋后切片，60 ℃恒温烤箱烤片，二甲苯Ⅰ、Ⅱ进行脱蜡，各浓度梯度无水乙醇脱水，枸橼酸缓冲液抗原修复后用3% H2O2内灭活内源性过氧化物酶，封闭后滴加一抗(TCF4、β-catenin和E-cadherin工作浓度均为1∶100)，于4℃冰箱保存，然后滴加含生物素标记二抗及辣根酶标记链霉卵白素工作液，孵育后DAB显色5 min，自来水冲洗，终止显色，复染后分化返蓝，然后进行脱水、透明、晾干处理，并用中性树胶封片，镜下观察并摄像。

3 染色结果评定 染色结果采用阳性细胞染色比例和染色强度进行评价。随机选取5个高倍视野并计数100个细胞，计算阳性细胞比例。

4 观察指标 观察比较TCF4、β-catenin和E-cadherin分子在三种组织中(卵巢良性、交界性肿瘤组织及卵巢癌组织)的表达情况。

5 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件，计量资料采用均数±标准差表示，组间比较采用t检验，计数资料采用频数和百分比表示，组间比较采用卡方检验，检验水准α=0.05。

结 果

1 TCF4、β-catenin和E-cadherin在各组间阳性表达率比较 与卵巢良性组织比较，卵巢癌组织和卵巢交界性肿瘤组织中TCF4、β-catenin阳性表达率显著升高，而E-cadherin表达显著降低，差异具有统计学意义(P<0.05)，与卵巢交界性肿瘤组织比较，卵巢癌组织TCF4、β-catenin阳性表达率显著升高，而E-cadherin表达显著降低，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 TCF4、β-catenin和E-cadherin在各组间阳性表达率比较[n(%)]

注：与A组比较，*P<0.05；与B组比较，#P<0.05

2 TCF4、β-catenin和E-cadherin在各组间表达评分比较 与卵巢良性组织比较，卵巢癌组织和卵巢交界性肿瘤组织中TCF4、β-catenin表达评分显著增加，而E-cadherin表达评分显著降低(P<0.05)，且卵巢癌组织TCF4、β-catenin表达评分显著高于卵巢交界性肿瘤组织(P<0.05)，而E-cadherin表达评分显著低于卵巢交界性肿瘤组织，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 TCF4、β-catenin和E-cadherin在各组间表达评分比较

注：与A组比较，*P<0.05；与B组比较，#P<0.05

讨 论

癌症的发生是多种因素共同作用形成的，其中机体内原癌基因和抑癌基因表达失衡是主要的分子机制[5]。研究表明，Wnt信号通路于人类肿瘤密切相关，Wnt信号转导通路主要传到生长和发育有关信号，进而参与机体内细胞增殖、分化、粘附等过程[6]。大量文献报道显示，在肝癌、食管癌、胃癌、子宫内膜癌等实体性肿瘤内，均存在Wnt信号表达异常，使位于细胞膜上的E-cadherin蛋白表达含量降低，导致细胞膜稳定性发生改变，细胞内E-cadherin/β-catenin复合体分解，引起细胞质和细胞核β-catenin含量增加，进一步激活Wnt信号通路，同时异常激活Wnt信号通路能够与E-cadherin基因启动子结合，使E-cadherin基因转录下调，导致肿瘤细胞出现异常增殖，促进癌症的发生[7-9]。 β-catenin是表达于细胞膜的一种胞内蛋白，能够特异性结合跨膜黏附分子E-cadherin，正常生理条件下细胞质及细胞核中含量极少。细胞黏附分子E-cadherin是一种钙依赖性跨膜糖蛋白，主要存在于上皮细胞，参与形成和维持正常细胞间联系，其对Ca2+具有高度特异性，其蛋白结构胞内端能够通过连接蛋白与微丝、中间丝、激动蛋白相连接，形成稳定复合体并固定于细胞骨架，相邻细胞间E-cadherin分子能够紧密结合形成稳定连接。而TCF4作为TCF/LEF家族主要成员之一，TCF4是一种基础bHLH转录因子，具有双重调控作用，在Wnt/β-catenin信号途经中发挥着调控其下游基因的表达的作用，可表现为转录激活或转录抑制的作用，影响一系列下游靶基因的表达，在胚胎的分化及肿瘤的发生、发展具有明显调控作用。

本研究结果显示，与卵巢良性组织比较，卵巢癌组织和卵巢交界性肿瘤组织中TCF4、β-catenin阳性表达率显著升高，而E-cadherin表达显著降低，与卵巢交界性肿瘤组织比较，卵巢癌组织TCF4、β-catenin阳性表达率显著升高，而E-cadherin表达显著降低。同时比较三种分子在各组间表达含量评分，结果显示，卵巢癌组织中TCF4、β-catenin表达评分显著高于卵巢良性组织和卵巢交界性肿瘤组织，而E-cadherin表达评分显著低于卵巢良性组织和卵巢交界性肿瘤组织，提示TCF4与β-catenin的表达增高和E-cadherin表达降低与卵巢癌恶性转化密切相关，同时β-catenin信号异常会激活Wnt信号转导通路，最终导致肿瘤的发生，而随着病情发展，E-cadherin表达进一步降低，破坏维持上皮细胞极性和完整性中起重要作用的E-cadherin/β-catenin复合体功能异常，导致肿瘤的浸润和转移。因此，对卵巢良性组织、卵巢交界性肿瘤组织和卵巢癌组织中TCF4、β-catenin和E-cadherin表达的检测，能够成为揭示卵巢癌的发生、发展机制之一。考虑到本样本病例数较少，TCF4、β-catenin和E-cadherin分子与卵巢交界性肿瘤发生、发展的关系还需要进一步研究探讨。

综上所述，TCF4、β-catenin和E-cadherin的异常表达可能是通过上皮间质转化促进卵巢癌的发生、发展、侵袭及转移等生理过程，临床上对TCF4、β-catenin和E-cadherin联合检测将有助于提高卵巢癌患者的早期诊断的准确性及预后判断，可能为卵巢癌治疗提供一个新的方向。

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ExpressionlevelsandsignificanceofTCF4,β-cateninandE-cadherininovariancancertissues

Liang Chen，Li Xiaoshang，Liu Huanti.

Hengshui Second People 's Hospital in Hebei Province(Hengshui 053000)

Objective:To explore the expression levels and significance of TCF4, β-catenin and E-cadherin in ovarian cancer tissues. Methods: The expression levels of TCF4, β-catenin and E-cadherin in the ovarian benign tissues, the ovarian borderline tumor tissues and the ovarian cancer tissues were detected by immunohistochemical staining (SP).Results: Compared with those in the ovarian benign tissues, the positive expression rates and the expression scores of TCF4 and β-catenin were significantly increased (P<0.05) while the expression rate and the expression scores of E-cadherin were significantly decreased (P<0.05) in the ovarian cancer tissues and the ovarian borderline tissues. Compared with the borderline ovarian tumor tissues, the positive expression rates and the expression scores of TCF4 and β-catenin were significantly increased (P<0.05) in the ovarian cancer tissues while the expression of E-cadherin was significantly decreased (P<0.05). Conclusions: The abnormal expression of TCF4, β-catenin and E-cadherin may be involved in the development and progression of ovarian cancer, and the combined detection of TCF4, β-catenin and E-cadherin can improve the early diagnosis and prognosis of patients.

Ovarian Neoplasms @TCF4 @E-cadherin

*河北省衡水市科学技术局资助项目(2016014075Z)

卵巢肿瘤 @T细胞因子 @E-钙粘附素

R737.31

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.12.061

(收稿：2017-04-16)