妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中LXRα和Endoglin基因的表达

王则绯,姜 锋，暴 蕾

1.陕西省第四人民医院 (西安 710043)，2.空军军医大学唐都医院产科(西安 710000)，3.西安市第四医院(西安 710004)

妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中LXRα和Endoglin基因的表达

王则绯1,姜 锋2，暴 蕾3

1.陕西省第四人民医院 (西安 710043)，2.空军军医大学唐都医院产科(西安 710000)，3.西安市第四医院(西安 710004)

目的：探讨妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中肝X受体α(LXRα)和Endoglin基因的表达及其临床意义。方法：收集妇产科64例妊娠期高血压疾病患者及28例用作对照的正常妊娠妇女，胎盘娩出后即刻取胎盘组织处理后用RT-PCR法检测LXRα mRNA和Endoglin mRNA的表达水平。结果：妊娠期高血压疾病患者胎盘组织LXRα mRNA和Endoglin mRNA表达水平明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，轻度子痫前期患者明显高于妊娠期高血压患者差异有统计学意义(P<0.05)，重度子痫前期患者明显高于轻度子痫前期患者(P<0.05)。LXRα mRNA和Endoglin mRNA在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达呈正相关(r=0.473)。结论：研究表明LXRα和Endoglin基因的过度表达均能促进妊娠期高血压疾病的发病及发展，且二者可能共同参与疾病的发生发展过程。

妊娠期高血压疾病包括妊娠期高血压、子痫前期、子痫、慢性高血压并发子痫前期、妊娠合并慢性高血压5种类型。目前认为子痫前期滋养细胞缺血缺氧对妊娠期高血压疾病的发生有重要影响。医学研究发现，肝X受体α(LXR-α)和Endoglin均被认为与滋养细胞的增殖或侵蚀有一定关系[1-2]。本研究探讨了妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中LXRα和Endoglin基因的表达情况，以期提高对妊娠期高血压疾病发病机制的认识。

资料与方法

1 一般资料 收集我院妇产科自2014年1月至2017年1月间收治的妊娠期高血压疾病患者64例，年龄20～36岁，平均年龄29.62±3.19岁；孕龄250～292 d，平均(265.62±13.91) d，其中有妊娠期高血压23例，轻度子痫前期21例，重度子痫前期20例。选择同期产检正常的妊娠妇女28例作为对照，年龄21～38岁，平均年龄(29.21±2.98)岁；孕龄249～291 d，平均(265.48±13.22) d；所有孕妇均为单胎，并将孕前患有原发性高血压、糖尿病、肝肾功能不全等慢性病的患者排除在外，患者知情同意。

2 标本采集及方法 胎盘娩出后即刻取脐带对侧胎盘组织300 mg，不含羊膜层，剪成1 cm×1 cm×1 cm大小，吸干水分，后用冻存管盛装，投入液氮过夜后冻存。RNA提取与反转录：按总RNA提取试剂盒说明书提取RNA，将组织总RNA逆转录为cDNA，条件：30 ℃5 min，42 ℃ 60 min，99 ℃ 5 min，5 ℃ 5 min，建立20μLPCR反应体系。RT-PCR法：LXRα上游引物为5'-TGGAG-ACATCTCGGAGGTAC-3'，下游引物为5'-GCAATGAGCAAGGCAAACT-3'；Endoglin上游引物为5'-TAGCCCTGCGTCCCAAGA-3'，下游引物为5'-CGATGAGGAAGGCACCAAA-3'。以葡萄糖磷酸脱氢酶(GAPDH)作为内参照，上游引物为:5′-TCATGGGTGTGAACCATGAGAA-3′，下游引物为5′-GGCATGGACTGTGGTCATGAG-3′。采用SYBRGreen荧光染料法进行RT-PCR扩增，条件：94 ℃预变性5 min；94 ℃30 s，52 ℃30 s，72 ℃30 s，30个循环；72 ℃延伸10 min。经2%琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，用计算机扫描分析，用基于∆∆Ct的方法进行相对定量分析。

3 统计学方法 应用SPSS 13.0统计软件进行，计量资料以均值±标准差表示，采用t检验，相关性检验采用pearson线性相关分析，取P<0.05时差异具有统计学意义。

结 果

1 各组胎盘组织中LXRα mRNA和Endoglin mRNA表达水平比较 妊娠期高血压疾病患者LXRα mRNA和Endoglin mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05)，轻度子痫前期患者明显高于妊娠期高血压患者(t=3.550，P<0.05)，重度子痫前期患者明显高于妊娠期高血压患者(t=5.767，P<0.05)，重度子痫前期患者明显高于轻度子痫前期患者(t=3.432，P<0.05),见表1。

2 相关性分析 LXRα mRNA和Endoglin mRNA在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达呈正相关(r=0.473，P<0.05),见图1。

表1 各组胎盘组织中LXRα mRNA和Endoglin mRNA表达水平比较

图1 LXRαmRNA和EndoglinmRNA相关性分析

讨 论

妊娠期高血压疾病对母婴的危害大，如何预防及治疗该病一直以来都是临床医生十分关心的问题。目前妊娠期高血压疾病的发病是多因素共同作用的结果，近年研究发现它与子宫胎盘滋养细胞缺血、缺氧有关[3]。本研究发现，妊娠期高血压疾病患者LXRα mRNA的表达水平明显高于对照组，且从妊娠期高血压到重度子痫前期，LXRα mRNA的表达呈递增趋势，与既往研究相符，提示LXRα基因与娠期高血压疾病的发病、进展密切相关，可能是LXRα参与体内多种生理活动的调节，过度表达时通过细胞转导信号途径，引起一些因子水平变化，影响滋养细胞对子宫血管的浸润，影响螺旋动脉重塑，甚至出现粥样硬化[4-5]，从而降低胎盘血流灌注，出现妊娠期高血压疾病并加重。

此外研究也发现，妊娠期高血压疾病患者Endoglin mRNA的表达水平明显高于对照组，且从妊娠期高血压到重度子痫前期，Endoglin mRNA的表达呈递增趋势，与既往研究相符，提示Endoglin不仅参与了妊娠期高血压疾病的病理生理过程，而且还加速了疾病的进展。Endoglin参与妊娠期高血压疾病作用机制还不清楚。动物实验及临床研究均有发现，低氧可诱导Endoglin表达。故而推测可能为低氧环境下，Endoglin表达上调，从而进一步使具有诱导促血管形成作用的TGF-β信号途径受到阻断，减少胎盘血管生成，降低胎盘血流灌注，并且还可通过复杂的途径使具有舒张血管功能的NO减少，导致外周血管阻力增加，最终引起高血压、蛋白尿等临床症状[6-7]。

相关性分析结果表明，LXRα mRNA和Endoglin mRNA在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达呈正相关，提示二者可能存在一定的相互作用共同促进了妊娠期高血压病的发生发展。国外的研究也表明，用LXRα的激活剂T0901317处理绒癌细胞系JAR细胞，可提高Endoglin启动子的活性，上调Endoglin基因和蛋白的表达[8]。但二者相互作用的具体机制还需进一步研究。

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高血压, 妊娠 胎盘 @肝X受体α @Endoglin

R714.2

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.12.053

(收稿：2017-10-18)