炎症因子IL-32、 IL-1β、 IL-18及EpCAM在肝细胞肝癌诊断和生存预测中的作用

曾明曦，康长明，王琼芳,李政伟

1.四川省人民医院消化内科(成都 610072)，2.陕西省神木市医院(神木719300)

炎症因子IL-32、 IL-1β、 IL-18及EpCAM在肝细胞肝癌诊断和生存预测中的作用

曾明曦1，康长明1，王琼芳1,李政伟2△

1.四川省人民医院消化内科(成都 610072)，2.陕西省神木市医院(神木719300)

目的：探讨血清IL-32、IL-18、IL-1β及EpCAM在肝细胞癌的诊断、预后的临床价值。方法：前瞻性入组60例肝细胞癌患者和15例健康志愿者，在患者入院后给予相应治疗前采血，采用酶联免疫吸附法测定血清IL-32、 IL-1β、 IL-18及EpCAM水平。结果： HCC组患者血清IL-32、IL-18、EpCAM水平均显著高于对照组(P<0.05)，HCC组与对照组的血清IL-1β水平无统计学差异(P>0.05)；血清IL-32、IL-18水平与MELD评分正相关；EpCAM曲线下面积(AUC)为0.985，截断点为3.40，为诊断肝细胞癌最有价值的标志物；除了EpCAM，其它细胞因子与HCC患者的生存率无关(P>0.05)。结论：虽然细胞因子可作为肝癌的诊断标志物，但其对肝细胞癌患者的预后没有参考价值；血清EpCAM可为肝细胞癌的诊断及患者的预后提供有效的参考价值。

肝细胞癌(HCC)预后与肿瘤分期和肝功能密切相关。白细胞介素(IL)-6和IL-32在肝细胞癌患者中高表达[1]，IL-32还与肝细胞癌患者预后密切相关[2]。除此之外，IL-18，IL-1β，上皮细胞黏附分子(EpCAM)可能也与肝细胞癌患者预后相关[3]。本研究通过酶联免疫吸附(ELISA)检测患者血清IL-32，IL-1β，IL-18及EpCAM水平，探讨其对肝细胞癌的诊断和预后价值,报告如下。

资料与方法

1 一般资料 前瞻性纳入2013年1月至2016 年12月我院收治的肝细胞癌患者(HCC)60例，其中男49例，女11例，平均年龄为(60±9)岁。均经MRI确诊为肝细胞癌，并伴有甲胎蛋白(AFP)逐渐升高。所有患者均合并肝硬化，评估患者肝硬化的病因-乙型肝炎肝病毒(HBV)，丙型肝炎病毒或其它病因，并计算患者的Chile-Pugh和终末期肝病模型(MELD)评分。并纳入15例健康患者作为对照组。HCC组60例患者的病因为酒精性4例，乙型肝炎病毒感染41例，丙型肝炎病毒感染12例，其他3例，Chile-Pugh分级中A级40例，B级18例，C级2例。HCC组与健康对照组在年龄，性别构成比上无显著性差异(P>0.05)，具有可比性。

2 研究方法 在患者入院后给予相应治疗前，空腹静脉采血，分离血清置-20℃保存待测。血清IL-32， IL-1β，EpCAM均采用固相ELISA检测，血清IL-18采用双抗夹心ELISA检测。对本组病例进行12～24个月的随访，每3个月随访1次，了解患者复发转移，死亡时间，死亡原因等。

3 观察指标 对比HCC组及对照组受试者血清IL-32，IL-18，IL-1β及EpCAM水平；对比HCC组幸存者和死亡者IL-32，IL-18，IL-1β及EpCAM水平。

结 果

1 两组血清IL-32，IL-18，IL-1β，EpCAM检测结果 HCC组患者血清IL-32， IL-18，EpCAM水平均显著高于对照组(P<0.05)，HCC组与对照组的血清IL-1β水平无统计学差异(P>0.05)。随后我们进行了相关性分析，结果表明甲胎蛋白(AFP)，临床诊断HCC的重要血清标记物，与IL-32， IL-18，EpCAM等负相关(P>0.05)，血清IL-32，IL-18水平与MELD评分正相关(r= 0.315，P= 0.03；r= 0.297，P= 0.04)。

2 IL-32，IL-18，EpCAM诊断HCC的ROC曲线 在肿瘤标志物的ROC分析中，血清AFP，IL-32，IL-18，EpCAM区别HCC组患者和对照组均表现出了有价值的截断水平(P<0.001)，所有肿瘤标志物均表现出了高灵敏度，特异性，准确性。血清EpCAM水平的截断点为3.40，为诊断HCC最有价值的标志物(AUC = 0.985，P<0.001)。

3 血清IL-32，IL-18，IL-1β，EpCAM水平对HCC患者预后的影响 随访期间，HCC组共有35例患者(58%)死亡，该组的中位生存期是7.3±1.4个月。随访期间死亡的肝细胞癌患者EpCAM水平显著高于幸存者(22.3 vs 17.9 pg/ml，P=0.01)。其它标记物与HCC患者的总体病死率没有相关性，肝细胞癌患者的生存率与血清甲胎蛋白(AFP)水平没有相关性，见表1。

表1 HCC组幸存和死亡者血清IL-32，IL-18，IL-1β，EpCAM水平比较( pg/ml)

注：与死亡组相比，*P<0.05

讨 论

肝细胞癌是一个重要的全球健康问题。为了改善患者预后和长期生存，早期诊断肝癌是实施治疗干预的关键。IL-32主要是由免疫调节细胞产生的一种促炎症细胞因子，在溃疡性结肠炎和其他多种炎症性疾病高表达[4]。在41%胃癌患者和29%的肺癌患者肿瘤组织可见IL-32高表达[5]，这与慢性炎症和肿瘤进展密切相关的共识一致。因此我们推测IL-32可能与HCC进展密切相关。在本研究中，我们发现HCC患者外周血中IL-32表达明显增高，这也进一步表明IL-32可作为HCC的诊断指标。

EpCAM在多种腺癌和鳞状细胞癌中高表达。正常情况下成熟的肝细胞不表达EpCAM，有研究发现75.9%的慢性酒精性肝炎、63.6%的丙型肝炎以及55.6%的慢性自身免疫性肝炎和乙型肝炎患者肝细胞表达EpCAM，而乙型和丙型肝炎病毒感染在HCC的发生发展中尤为重要，因此，我们推测EpCAM在HCC中也有重要作用，而基因表达测序研究也证实了这一点。本研究中，随访期间死亡的HCC患者EpCAM水平均显著高于幸存者，表明HCC患者EpCAM高表达者预后也较差。

综上所述，本研究HCC患者外周血中IL-32，IL-18，EpCAM表达显著增高，IL-32，IL-18水平与HCC患者MELD评分正相关，但其对HCC患者的预后没有参考价值，而血清EpCAM与患者生存率正相关，可为HCC患者的诊断及预后提供有效的参考价值。

[1] 张慧贤,马向明,付庆江,等.肝细胞癌患者血清IL-17细胞因子水平检测的临床意义[J].陕西医学杂志, 2016,45(10):1394-1395.

[2] 彭 莉,李 丹.血清IL-17和MMP-7检测在肝细胞癌诊断中的作用[J].中国医科大学学报, 2017, 46(3):248-250.

[3] 何海华,杨志奇,孙振纲,等.IL-10、IL-17及IL-18在肝细胞肝癌中的表达特点及其临床意义[J].标记免疫分析与临床,2016, 23(2):150-153.

[4] 李广云,陈政华,徐逢皇,等.肝癌患者血清中共刺激分子sB7-H3和炎症因子IL-17、IL-8相关性及临床诊断研究[J].中华微生物学和免疫学杂志, 2016,36(3):213-218.

[5] 陈 儒,沈关心.IL-32与肿瘤生物学行为[J]. 医学分子生物学杂志, 2017, 14(1):55-58.

RoleofIL-32,IL-1β,IL-18andEpCAMinthediagnosisandpredictionofsurvivalofhepatocellularcarcinoma

Zeng Mingxi，Kang Changmin，Wang Qiongfang，et al.

Department of Gastroenterology,People’s Hospital of Sichuan Province(Chengdu 610072)

Objective: To investigate interleukin (IL)-32,IL-1β, IL-18 and epithelial cell adhesion molecule(EpCAM) in the diagnosis and assessment of prognosis of HCC.Methods: Sixty patients with HCC and 15 healthy volunteers were enrolled into this prospective study. Serum samples were obtained at the first admission before any treatment was given. Serum IL-32, IL-1β, IL-18 and EpCAM levels were determined by ELISA kits.Results: The mean serum level of IL-32, IL-18 and EpCAM in patients with HCC were significantly higher than in the control subjects (P<0.05). The mean IL-1β level in the HCC group was not different from that in the control group (P>0.05). IL-32 and IL-18 levels showed positive correlation with MELD scores. EpCAM with a cutoff of 3.40 seems to be the most valuable marker for the diagnosis of HCC(AUC = 0.985).Cytokine levels except EpCAM did not correlate with survival (P>0.05). Conclusions: Although cytokines can be a diagnostic marker for HCC, they did not have any significant prognostic value in patients with HCC. Only EpCAM may be used to determine the prognosis of HCC,thereby assisting with treatment management.

Liver neoplasms/diagnosis Interleukin-8 Interleukin-1beta Epithelial cell adhesion molecule

△通讯作者

肝肿瘤/诊断 白细胞介素-8 白细胞介素-1β 上皮细胞粘附分子

R735.7

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.12.021

(收稿：2017-07-02)