乙肝肝硬化对外周血T细胞亚群、免疫球蛋白及补体水平的影响

梁志军，李瑞娟，王素娜，连建奇

第四军医大学唐都医院感染科 (西安 710038)

乙肝肝硬化对外周血T细胞亚群、免疫球蛋白及补体水平的影响

梁志军，李瑞娟，王素娜，连建奇

第四军医大学唐都医院感染科 (西安 710038)

目的：检测乙型肝炎肝硬化患者外周血中T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白及补体水平的变化并探讨其临床意义。方法：选取67例乙肝肝硬化患者和20例健康对照者，采用流式细胞术检测其外周血中T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+)，采用免疫比浊法测定其血清中免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)及补体(C3、C4)水平。结果：乙肝肝硬化患者外周血中CD4+T、CD8+T淋巴细胞计数低于对照组(P<0.05)，免疫球蛋白IgG、IgM、IgA均高于对照组(P<0.05)，而补体C3、C4低于对照组(P<0.05)。结论：乙肝病毒可以影响T细胞亚群和免疫球蛋白水平，从而导致机体细胞和体液免疫功能紊乱，免疫功能的检测对评估乙肝肝硬化患者病情及判断预后有一定临床意义。

乙型肝炎病毒(HBV)感染人体后可有不同的发展，长期慢性感染可引起乙型肝炎肝硬化。乙肝肝硬化发病机制复杂，现主要认为机体免疫调节功能紊乱是其产生病理损害的主要原因[1-2]。我们选择了67例乙肝肝硬化患者和20例健康对照者，分别检测其外周血T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+)、血清免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)及补体(C3、C4)的水平，探讨它们在乙肝病毒导致的肝硬化发病中的作用及临床意义。

资料和方法

1 一般资料 收集2012年5月至2013年10月期间在本科就诊的乙肝肝硬化患者67例，依据2010年中华医学会制定的《病毒性肝炎防治方案》中的临床诊断与分期标准进行诊断，且患者在3个月内未经免疫调节剂及抗病毒治疗。对照组为20例健康献血者，均无肝炎病史、乙肝血清学标志呈阴性且肝功能正常。两组一般资料差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

2 方 法 ①标本采集：抽取静脉血10 ml，分为2份：一份EDTA抗凝用于淋巴细胞检测，一份离心分离血清，置-80℃待检。②仪器和试剂：检测由本科室检测中心专人负责，T淋巴细胞亚群采用流式细胞仪(美国BD公司)及BD公司配套试剂，血清免疫球蛋白和补体水平的检测采用免疫比浊法。

结 果

1 外周血T淋巴细胞计数分析 乙肝肝硬化组患者外周血T淋巴细胞计数明显低于对照组，且CD8+淋巴细胞降低程度较CD4+要高，差异具有统计学意义(P<0.05),见表1。

表1 各组外周血T淋巴细胞计数比较

注：与对照组比较*P<0.05

2 血清免疫球蛋白水平分析 乙肝肝硬化组患者的血清免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)水平明显高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 各组血清免疫球蛋白比较(lg/L)

注：与对照组比较*P<0.05

3 血清补体水平分析 乙肝肝硬化组患者的血清补体(C3、C4)水平明显低于对照组，差别具有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 各组血清补体水平比较(g/L)

注：与对照组比较*P<0.05

讨 论

乙型肝炎病毒的致病机制复杂，至今尚不完全清楚，目前普遍认为感染乙型肝炎病毒后致病的严重程度及预后差异与机体的免疫状态密切相关[3]。细胞免疫应答主要表现为单个核细胞在肝组织内的浸润，从而引起不同程度的肝组织损伤，而组织损伤也与体液免疫相关，体液免疫应答主要表现在抗体和补体或免疫复合物形成及在肝组织内沉积。乙肝病毒诱导的机体免疫应答是导致肝细胞损伤的主要机制[3]。乙肝病毒长期慢性感染可以导致肝脏纤维化。

T淋巴细胞是细胞免疫应答的主要执行者。张艳等[4]研究发现非活动性HBsAg携带者淋巴细胞低于健康对照者，他们认为慢性HBV携带者的免疫功能强于非活动性HBsAg携带者。本实验结果显示慢性乙型肝炎肝硬化患者CD4+、CD8+T细胞数量较对照组减少，提示机体参加免疫反应的免疫活性细胞已经发生改变，T细胞的减少可能导致机体细胞免疫功能下降。乙肝肝硬化组患者CD8+T细胞下降程度比CD4+T细胞程度多，从而导致CD4+/CD8+比值增高，可能与乙型肝炎病情进展致CD8+细胞耗竭有关，细胞免疫功能低下可能是慢性乙型肝炎发展为乙肝肝硬化的重要因素。

B细胞是机体体液免疫的主导者。周臣敏[5]发现乙肝肝硬化患者的血清IgG、IgE、IgA显著增高。实验结果显示乙肝肝硬化组血清IgG、IgM、IgA明显高于健康对照组，与其结果基本一致。血清中免疫球蛋白水平升高可能与肝功能损害有关，一方面机体为了清除病毒产生大量的抗体，另一方面乙型肝炎病毒导致的肝硬化致使肝脏细胞功能障碍，清除抗体能力下降，从而使得机体免疫球蛋白升高。由此，免疫球蛋白的水平升高可提示体液免疫功能亢进，且与乙肝肝硬化的病情程度相关。

补体系统也是机体免疫系统的重要组成部分。C3、C4是连接经典途径和旁路途径的枢纽。本实验结果显示乙肝肝硬化组血清C3、C4水平低于健康对照组，乙肝肝硬化C3、C4水平下降可能是由于乙肝病毒感染导致机体免疫功能紊乱，免疫复合物的形成促使补体过度激活，体内补体消耗增多；也可能与肝细胞受损，导致补体合成减少有关，提示补体水平的变化可能与肝脏损伤的程度及机体免疫状态有关。

本实验结果显示乙型肝炎肝硬化患者细胞免疫及体液免疫功能失调。T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+)、血清免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)、补体(C3、C4)的变化，可作为动态指标来反应机体细胞免疫和体液免疫功能，为乙型肝炎肝硬化患者的病情判断、临床治疗及预后评估提供依据。同时提示我们采用免疫制剂可以提高乙肝肝硬化患者的免疫功能，从而达到延缓乙肝肝硬化的病情进展的目的。

[1] Liaw YF,Chu CM. Hepatitis B virus infection [J]. Lancet,2009, 373(9663):582-592.

[2] 王 萍，胥 冰， 张丽君，等. 不同类型HBV感染者外周血Treg/Th17细胞的变化及意义[J]. 陕西医学杂志, 2013，42(11): 1456-1459.

[3] 王 姣，邓 洪，谢冬英，等. HBV特异性CTLs表面CD244和PD-1共表达与慢性乙型肝炎严重程度的相关性[J]. 中华病理生理杂志，2012， 28(12): 2254-2260.

[4] 张 艳，孙继红，刺 梅，等. IL-12、单核细胞、淋巴细胞在HBeAb阳性HBV携带者中的相关性研究[J]. 临床医学与检验, 2016，13(2): 244-246.

[5] 周臣敏. 免疫球蛋白检测在乙型肝炎患者病情及预后判断的临床意义[J]. 国际检验医学杂志, 2013，34(3): 376-377.

InfluenceofhepatitisBcirrhosisonperipheralbloodTlymphocytesubsets,immunoglobulinandcomplementlevels

Liang Zhijun，Li Ruijuqn,Wang Suna,et al.

Department of Infectious Diseases， Tangdu Hospital，The Fourth Military Medical University(Xi’an 710038)

Objective ：To study the changes of T-lymphocyte subsets, serum immunoglobulin and complement in patients with chronic hepatitis B (CHB)-related cirrhosis. Methods:The various T-lymphocyte subsets were detected by flow cytometry, serum immunoglobulin and complement by immune nephelometry in 67 patients with CHB-related cirrhosis and 20casesof healthycontrols. Results：Compared to the healthycontrol group, the CHB-related cirrhosis groups showed significantly less peripheral blood T cells percentages of CD4+(P<0.05) and CD8+(P<0.05). The levels of serum IgG、IgM and IgAin the patientswith CHB-related cirrhosis were significantly higher than those in healthy group (P<0.05).The levels of C3 and C4 in the patients with CHB-related cirrhosis were significantly higher than those in healthy group (P<0.05). Conclution：The immune function was disturbed in the patients with CHB-related cirrhosis. The detection of immune function has clinical significance in the diagnosis, treatment and predict prognosis of CHB-related cirrhosis.

Hepatitis B/complications Liver cirrhosis @T-lymphocyte subsets ImmunoglobulinComplement C3 Complement C4

乙型肝炎/并发症 肝硬化 @T淋巴细胞亚群 免疫球蛋白 补体C3 补体C4

R575.1

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.12.013

(收稿：2017-07-07)