HPV E6/E7 mRNA与HPV—DNA检测技术在宫颈病变筛查中的诊断效度比较

沈丽蕊　游平弟　毛瑛玉　王海月　吴秋珍　韦翠花

【摘要】 目的：比较HPV E6/E7 mRNA与HPV-DNA两种检测技术在宫颈病变筛查中的临床效度。方法：回顾性分析笔者所在医院妇产科门诊在笔者所在科行HPV检测并行组织活检病理学检查的患者826例，其中HPV E6/E7 mRNA组420例，HPV-DNA组406例，比较两组方法在筛查CIN1及以上病变的阳性率、灵敏度、特异度。结果：两种方法在筛查CIN1及以上病变的阳性率的效果相当，两组间阳性率比较差异无统计学意义（P>0.05），而HPV E6/E7 mRNA检测组的灵敏度（96.1%）高于HPV-DNA组（90.9%），特异度（89.4%）明显高于HPV-DNA组（71.4%），两组间灵敏度及特异度比较，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：HPV E6/E7 mRNA作为一种新型的检测技术，其假阳性率低，结果更靠性切实，更能精准地筛查宫颈癌前病变，值得临床推广应用。

【关键词】 HPV E6/E7 mRNA检测； HPV-DNA检测； 宫颈癌前病变； 效度

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.29.037 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2017）29-0075-03

The Diagnostic Validity of HPV E6/E7 mRNA and HPV-DNA Testing in Screening of Cervical Lesions/SHEN Li-rui，YOU Ping-di，MAO Ying-yu，et al.//Chinese and Foreign Medical Research，2017，15（29）：75-77

【Abstract】 Objective：To compare the clinical validity of HPV E6/E7 mRNA and HPV-DNA in screening of cervical lesions.Method：Regression analysis outpatient obstetrics and gynecology hospital in our department of HPV testing in parallel biopsy pathology examination of 826 cases，including HPV E6/E7 mRNA group 420 cases，HPV DNA-group 406 examples.The positive rate，sensitivity and specificity of the two groups were compared in the screening of CIN1 and above lesions.Result：The effect of two methods on the screening of the positive rate of CIN1 and above lesions was comparable，the positive rate comparison between the two groups had no statistical significance（P>0.05），and HPV E6/E7 mRNA detection sensitivity（96.1%） than HPV-DNA group（90.9%），specific degrees（89.4%） were significantly higher than those of HPV-DNA group（71.4%），sensitivity and specific comparison between the two groups， the significant difference（P<0.05）.Conclusion：HPV E6/E7 mRNA as a new kind of detection technology，has low false positive rate，and results in more sexual and accurate screening of precancerous lesions，which is worthy of clinical application.

【Key words】 HPV E6/E7 mRNA detection； HPV-DNA testing； Precancerous lesion； Validity

First-authors address：The Affiliated Mindong Hospital of Fujian Medical University，Fuan 355000，China

宫颈癌是女性妇科疾病中最常见恶性肿瘤疾病之一，其发病率高居第二位[1]，给女性身心健康带来极大威胁。对宫颈癌前病变进行准确的早期筛查及合理地干预是降低宫颈癌发生率的有效方法。因而对其进行早期筛查需要更有效的筛查技术。目前研究表明，高危型HPV感染与宫颈癌密切相关[2-3]，而HPV E6/E7 mRNA检测作为一种宫颈癌前病变早期筛查的新型技术，是否更适合于宫颈癌前病变的初筛手段仍有待于进一步研究，故本研究回顾性分析闽东地区826例宫颈病变患者的资料，比较两组检测方法在宫颈癌病变早期筛查中的临床诊断效度。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究回顾性搜集笔者所在医院2014年8月-2017年1月在闽东地区妇科门诊就诊并行HPV E6/E7 mRNA及HPV-DNA检测，并有行组织病理学检查及诊断结论的826例患者，年龄20～60岁，平均（39.5±9.1）岁，不包括妊娠患者，将826例患者分为HPV E6/E7 mNRA组420例，年龄23～55岁，平均（39.05±10.10）岁及HPV-DNA组406例，年龄25～58岁，平均（40.02±9.30）岁。本研究收集患者的年龄、吸烟情况、饮酒情况、分娩次数（≥2次）、人流次数（≥1次）、有性生活3年以上等资料，并对以上资料进行比较，两组患者年龄、吸烟情況、饮酒情况等基本资料间比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。endprint

1.2 纳入、排除标准

1.2.1 纳入标准 （1）HPV E6/E7 mRNA、HPV-DNA检测及阴道镜下宫颈活检均在笔者所在医院进行；（2）无子宫切除史、宫颈手术史、盆腔放化疗史及HPV感染治疗史；（3）无临床妊娠症状或妊娠结束8周以上者。

1.2.2 排除标准 （1）病例资料完整低于80%；（2）月经期、严重内外科疾病或无法配合调查者；（3）既往有宫颈局部不明肿瘤病史或宫颈癌史或标本量过少或标本不合格者。

1.3 方法

1.3.1 样本采取 按照知情同意原则，患者须被告知并自愿接受检查，患者行HPV E6/E7 mRNA及HPV-DNA检测需符合以下条件：检查前3 d内避免行阴道镜检查及放置阴道内栓剂；检查前24 h内避免性生活；检查者应在非月经期内进行。宫颈脱落细胞标本均由有经验的妇产科医师采集的。将宫颈刷紧贴宫颈口黏膜，沿着顺时针方向用宫颈刷旋转6～8圈，然后将宫颈刷放入细胞保存液中充分漂洗后丢弃，装入有专用收集瓶内，旋紧瓶盖，写好患者姓名及编号备用，放置4 ℃冰箱保存待检。

1.3.2 检测方法 HPV-DNA检测，应用HPV-DNA专用试剂盒进行分型检测，将细胞保存液中HPV提取后进行PCR扩增和导流杂交，所有步骤均严格按照操作手册进行检测；另外E6/E7 mRNA检测采用Gen-Probe Technology and the PANTHER System进行检测。将HPV保存液中的HPV提取后采用E6/E7 mRNA试剂盒进行检测，其结果为光子数，利用计算机软件判断结果，低风险（<4000拷贝）；中度风险（4000～10 000拷贝）；高度风险（>10 000拷贝），将低风险以上的病例定为阳性。

1.3.3 其他 所有患者均用阴道镜下多点活检，然后进行病理组织学检查，然后根据病理结果进行分型。

1.4 统计学处理

对本研究临床资料的所有数据均采用SPSS 18.0系统进行统计学分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，计数资料采用字2检验，检验水准设定为0.05，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

HPV E6/E7 mRNA组及HPV-DNA组对CIN1及以上类型诊断的阳性率分别为75.9%及73.1%。，两组间阳性率比较差异无统计学意义（P>0.05）。从方法学方面比较，HPV E6/E7 mRNA组的灵敏度为96.1%，特异度为89.4%；而HPV-DNA组灵敏度为90.9%，特异度为71.4%；与HPV-DNA组相比较，HPV E6/E7 mRNA组的灵敏度及特异度更高，差异有统计学意义（P<0.05）；另外HPV E6/E7 mRNA组假阳性率明显低于HPV-DNA组，两者相比差异有统计学意义（P<0.05），见表2和表3。

3 讨论

目前宫颈癌是女性生殖系统中最容易发生病变的肿瘤，其发病率高居第二位，对女性身心健康带来极大威胁，对社会生活带来严重负担，根据有关资料统计，在美国14～60岁的女性当中有2900万患者感染HPV，且超过80%的女性在50岁前有关获得感染机会[4]。另外大量资料研究显示，宫颈疾病发生发展与HPV感染密切相关[5]。因此宫颈疾病发病率虽然较高，但是可以通过预防及早期诊断筛查来降低其发生率，随着人们对宫颈疾病认识研究不断深入，通过阻断宫颈上皮内瘤样变向宫颈癌发展的过程以降低宫颈癌发病率已经取得不错效果，那么如何通过一种切实可行的技术手段来早期发现癌前病变，以提高诊断阳性率，同时降低漏诊概率，这是业内研究及关注焦点。

有研究显示，接近90%CIN患者多有HPV感染，大约20%有性生活妇女感染HPV，如果在吸烟、性传播疾病等因素作用下，HPV持续感染能够诱使宫颈上皮发生内瘤变甚至癌变[6]。但Crosbie等[7-8]表示其感染多不能持久，且90%以上的感染均是一过性，常可自然消退而不伴临床症状。本研究显示，HPV E6/E7 mRNA检测技术比起HPV-DNA技术有更高临床敏感性（P<0.05），可实现对CIN2等高级别癌前病变检出，且其特异性明显高于HPV-DNA技术（P<0.05），大大地减少“假阳性”结果出现概率，也由此更大程度减少给患者带来心理负担等不必要麻烦。另外单项HPV-DNA检测的灵敏度偏低，与HPV E6/E7 mRNA技术相比，漏诊率高（P<0.05），不适于单独应用宫颈癌前病变筛查，故当前更推荐两种检测技术联合应用，这与相关临床研究结果显示一致[9]。

大量研究显示，高危型HPV病毒存在，不一定会导致细胞发生癌变，只有大量HPV病毒被持续转录成E6/E7 mRNA时，才能大量表达癌蛋白，诱發细胞癌变的风险成倍增加[10-11]。由此可见E6/E7 mRNA是病毒两个致癌基因“活跃程度”的重要指标，其含量可以明确地反应致癌基因的活动程度，可以更直观的评估宫颈癌发生风险及评估预后[12-13]。另外本研究显示，HPV E6/E7 mRNA检测技术有更高特异性及更少假阳性，因此，HPV E6/E7 mRNA检测作为一种新型技术，能更加精准地筛查病变，有效降低一过性感染率检出，对于宫颈癌前病变的筛查具有重要临床意义，值得推广应用。

参考文献

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（收稿日期：2017-06-11）endprint