健脾清化散瘀饮对脾虚湿热血瘀型隆起糜烂性胃炎患者EGF、bFGF、Ki67表达的影响

方文怡 ，高尤亮 ，毛欣欣 ，柯 晓 ，王文荣 ，胡光宏

（1.福建中医药大学，福建 福州 350122；2.福建中医药大学附属第二人民医院，福建 福州350003；3.莆田市第一医院，福建 莆田 351100）

健脾清化散瘀饮对脾虚湿热血瘀型隆起糜烂性胃炎患者EGF、bFGF、Ki67表达的影响

方文怡1，2，高尤亮2，毛欣欣3，柯 晓2，王文荣2，胡光宏2

（1.福建中医药大学，福建 福州 350122；2.福建中医药大学附属第二人民医院，福建 福州350003；3.莆田市第一医院，福建 莆田 351100）

目的 观察健脾清化散瘀饮治疗脾虚湿热血瘀型隆起糜烂性胃炎（REG）的临床疗效，并探讨其可能作用机制。 方法 选取脾虚湿热血瘀型REG患者32例做为REG组，健康志愿者20例做为正常组，正常组不予干预，REG组予健脾清化散瘀饮口服治疗，疗程为3个月，观察REG组的临床疗效，并比较正常组及REG组治疗前后EGF、bFGF、Ki67表达的变化。 结果 中医临床证候、胃镜、病理疗效总有效率分别为93.75%、78.14%、84.375%。与正常组比较，REG组治疗前胃黏膜EGF、bFGF、Ki67表达明显提高（P＜0.01，P＜0.05）；REG组治疗后胃黏膜EGF、bFGF、Ki67表达较与治疗前明显下调（P＜0.01，P＜0.05）。 结论 健脾清化散瘀饮治疗脾虚湿热血瘀型REG有效，其作用机制可能与降低Ki67、bFGF、EGF表达有关。

隆起糜烂性胃炎；健脾清化散瘀饮；脾虚湿热血瘀证；EGF；bFGF；Ki67

隆起糜烂性胃炎（raised erosive gastritis，REG）是一种具有特征形态及病理变化的特殊类型的胃炎，第十届世界胃肠病学大会将其列为具有高度癌变倾向的疾病之一［1-2］。REG是一类以细胞增殖异常为特征的增殖性疾病，具有癌变倾向。Ki67是公认的全面反映细胞群体增殖活性的可靠且客观的指标［3］。此外近年研究表明，碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）、表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）可显著刺激上皮细胞的增殖，两者表达失衡可影响胃黏膜修复功能的表达，促进REG的发生和发展［4-5］。前期研究发现REG以脾虚湿热血瘀证多见［6］，且经验方健脾清化散瘀饮治疗本病较单纯西药组更有优势［7］，因此本研究拟进一步探讨健脾清化散瘀饮治疗REG的疗效作用机制，通过观察中医证候积分、胃镜、病理治疗前后的变化，以及对胃黏膜EGF、bFGF、Ki67表达的影响，探讨健脾清化散瘀饮治疗REG的可能的作用机制，为中药治疗REG的临床应用提供实验理论依据。

1 临床资料

1.1 西医诊断标准 镜下REG诊断标准参照《全国慢性胃炎共识意见（2012，上海）》［8］制订：胃镜下单个或多个疣状、膨大皱襞状或丘疹样隆起，最大径5～10 mm，顶端可见黏膜缺损或脐样凹陷，中央有糜烂。

1.2 中医辨证标准 由于国家标准和行业标准并无脾虚湿热血瘀证的中医诊断标准，因此课题组在福建省中西医结合学会消化系统疾病专业委员会、福建中医药学会脾胃病学分会的指导下，并与全国名老中医杨春波教授共同讨论，拟定了REG脾虚湿热血瘀证的诊断标准。主症：① 胃脘部痞胀或疼痛；② 舌质紫暗或暗红，有瘀斑或瘀点，苔白腻微黄或黄腻或黄腻干；③ 餐后及饮食不慎后症状易发作或加重。次症：① 精神倦怠；② 胃脘部灼热；③ 胃脘痛日久不愈；④ 口苦口臭；⑤ 不思饮食。胃镜象：胃镜下单个或多个疣状、膨大皱襞状或丘疹样隆起，最大径5～10 mm，顶端可见黏膜缺损或脐样凹陷，中央有糜烂［8］。证型确定：具备主证3项加次证1项并结合胃镜象。

1.3 纳入标准 ① 治疗组符合西医诊断及中医辨证标准；②正常组无上消化道不适且胃镜镜下胃黏膜正常，Hp阴性者；③ 年龄18～60岁；④ 同意加入本研究并签署知情同意书。

1.4 排除标准 ① 合并脑血管、心血管、肝、肾、肺和造血系统等严重原发性疾病者；② 伴有胃溃疡或十二指肠溃疡患者；③ 哺乳期或妊娠妇女、精神病患者；④ 不愿配合检查、治疗及失访患者，未按规定服用药物，无法判断临床疗效者。

1.5 一般资料 选取我院2013年1月—2015年12月脾虚湿热血瘀型REG患者32例做为REG组，同时选取健康志愿者20例做为正常组。2组在性别、年龄上比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

表1 2组一般资料比较（x±s）

2 治疗方法

2.1 REG组 予经验方健脾清化散瘀饮口服治疗，药物组成：党参 15 g，白术 9 g，茯苓 15 g，茵陈9 g，黄连 3 g，半夏 9 g，陈皮 9 g，扁豆 15 g、厚朴9 g，砂仁 6 g，莪术 9 g，鳖甲 18 g，丹参 15 g，炙甘草3 g，本院药剂科煎药机代煎，每次1袋，每袋200 mL，早晚各服1次，疗程为3个月。

2.2 病理学检查 正常组于胃窦部钳取胃黏膜组织3块。REG组胃镜下观察胃窦有隆起病变部位处取胃黏膜组织3块，首次活检处镜下进行拍照留底。于中药口服治疗后，胃镜下隆起未消失者，于原部位钳取胃黏膜组织3块；若隆起消失者，尽量于原部位钳取胃黏膜组织3块。所取组织经10%中性福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋常规厚度切片，HE染色后置于显微镜下观察。病理诊断标准参考《中国慢性胃炎共识意见（2012 年，上海）》［8］。

2.3 观察指标 采用MaxVisionTM／AP免疫组化法染色测定EGF、bFGF、Ki67。兔抗人bFGF单克隆抗体（工作效价1∶50）、兔抗人EGF单克隆抗体（工作效价1∶50）购自北京中杉金桥生物技术有限公司，Ki67单克隆抗体购自迈新生物技术开发有限公司，MaxVisionTM／AP购自迈新生物技术开发有限公司。按试剂说明书步骤操作，实验均设阴性及阳性对照。EGF、bFGF阳性表达在细胞质内出现棕黄色颗粒为阳性，Ki67阳性表达在细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性。染色结果在相同条件下进行拍照，图片进行计算机图像分析测累积光密度（IOD）、Ki67计数。

2.4 疗效评定标准

2.4.1 证候疗效评定标准 参照《慢性胃炎的中西医结合诊疗共识意见》［9］拟定，主要观察临床症状（主症、次症）和体征的变化并根据症候量化表记录、评分，所有症状均分为无、轻、中、重4级，主症分别记 0、2、4、6 分，次症分别记 0、l、2、3 分。 ① 临床痊愈：主要症状、体征消失或基本消失，疗效指数≥95%；② 显效：主要症状、体征明显改善，70%≤疗效指数＜95%；③ 有效：主要症状、体征明显好转，30%≤疗效指数＜70%；④ 无效：主要症状、体征无明显改善，甚或加重，疗效指数＜30%。

疗效指数＝［（治疗前积分－治疗后积分）／治疗前积分］×100%；

2.4.2 胃镜及病理疗效评定标准 参照《慢性胃炎的中西医结合诊疗共识意见》［9］拟定，① 治愈：胃镜下隆起糜烂较治疗前消失，慢性炎症好转达轻度，腺体萎缩、肠化生和异型增生消失；② 显效：胃镜下隆起糜烂较治疗前减少≥2／3，慢性炎症好转，腺体萎缩、肠化生和异型增生明显减轻；③ 有效：胃镜下隆起糜烂较治疗前减少≥1／3～2／3，炎症有所减轻，腺体萎缩、肠化生和异型增生减轻；④ 无效：胃镜下隆起糜烂较治疗前减少＜1／3或增多，病理所见无好转者。

2.5 统计学方法 采用SPSS 20.0统计软件进行数据分析。计量资料符合正态分布以（x±s）表示，采用t检验；不符合正态分布的两组比较采用Wilcoxon秩和检验，多组比较采用Kruskal-Wallis H检验。计数资料采用χ2检验。

3 结 果

3.1 REG组证候疗效、胃镜疗效、病理疗效情况见表2。

表2 REG组证侯疗效、胃镜疗效、病理疗效情况

3.2 正常组及REG组治疗前后胃黏膜EGF、bFGF、Ki67表达比较 见表3。

表3 正常组及REG组治疗前后胃黏膜EGF、BFGF、Ki-67表达比较（x±s）

4 讨 论

REG属于中医“痞满”“嘈杂”“胃脘痛”等范畴，课题组前期研究发现REG患者以脾虚湿热血瘀证最为常见，其中实证多与气滞、湿、热、血瘀等因素有关，虚证多与气虚有关，且随着胃黏膜病变程度加重，血瘀、虚证的比例较前增加［10］。健脾清化散瘀饮为本课题组治疗REG的经验方，全方共奏健脾益气、清热化湿、软坚散结、活血化瘀之效。本研究采用健脾清化散瘀饮治疗脾虚湿热血瘀型REG患者32例，结果显示：胃镜疗效有效率为78.14%；病理疗效有效率为84.375%；中医证候疗效有效率为93.75%。所有治疗组用药后均未见明显不良反应。该结果提示健脾清化散瘀饮治疗REG有一定的临床疗效。

EGF对胃黏膜有保护及促增生作用，在生理状态下，EGF能够调节细胞的生长，但是它的过度表达可导致细胞的分裂增殖以及细胞的恶性转化，从而导致肿瘤细胞的生长［11］。相关研究发现，Ki67表达的高低，对评价浸润性生长、转移等生物学行为，评估细胞增殖活性、判断肿瘤预后具有重要意义［12］，因此Ki67有可能作为确定癌前人群高危个体的生物标志物［13］。bFGF是一种多功能细胞生长因子及血管生长因子，能刺激血管生成，抵抗胃酸对黏膜重建的抑制作用［14］，且与胃癌的发生、发展关系密切，bFGF阳性表达率越高，越易发生转移［15］。

本研究结果表明：与正常组比较，REG患者EGF、Ki67、bFGF表达明显升高，提示REG患者胃黏膜处于一种高增殖、高分化、高表达状态，导致黏膜产生隆起性病变。而经健脾清化散瘀饮3个月口服治疗后，REG患者黏膜中 EGF、Ki67、bFGF表达明显下调，提示健脾清化散瘀饮可能是通过下调EGF、Ki67、bFGF表达而对REG起治疗作用。

综上所述，健脾清化散瘀饮治疗REG不仅在临床症状疗效、病理学各方面有着显著的疗效，而且明显降低EGF、bFGF、Ki67表达，这可能是健脾清化散瘀饮治疗REG的作用机制之一，为临床上治疗REG提供进一步的试验理论依据，而具体的调控机制的研究还有待进一步的研究探索。

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R573.3

B

1000-338X（2017）05-0006-03

2017-08-20

福建省自然科学基金项目（2015J01478）；福建卫生厅中医药科研课题（WZPW201302）；福建省教育厅课题（JAT 160225）

方文怡（1985—），女，医学硕士，主要从事中西医结合消化系统疾病研究。

通迅作者：柯晓（1965—），男，主任医师。 E-mail：drkxkx@163.com