羊腹泻病原菌的分离鉴定与药敏试验

那音台

（呼伦贝尔市新巴尔虎右旗呼伦镇畜牧兽医站，内蒙古呼伦贝尔 021300）

羊腹泻病原菌的分离鉴定与药敏试验

那音台

（呼伦贝尔市新巴尔虎右旗呼伦镇畜牧兽医站，内蒙古呼伦贝尔 021300）

某一羊养殖场，150日龄的羊出现食欲废觉，严重腹泻，有的羊只出现了神经症状，有的羊突然死亡。为了鉴定引起150日龄的羊腹泻与突然死亡的病原菌，对突然死亡的患病的150日龄的羊进行剖检，无菌采集150日龄的突然死亡的肝脏、肺脏、肾脏、心血等病料组织进行病原菌的分离，在采集的150日龄的突然死亡病料组织中分离一株病原菌，对分离到的病原菌通过细菌的培养特性鉴定、细菌革兰氏染色观察细菌形态学、生化试验鉴定等方法，分离菌株被鉴定为大肠杆菌。将分离到的大肠杆菌通过口服方式攻毒给小白鼠，结果显示，分离到的大肠杆菌对小白鼠具有很强的致病性，感染率100%，死亡率100%。用K-B药敏纸片法对分离的致病性链球菌进行药敏试验分析，结果显示，分离菌株对头孢曲松、氨苄西林、阿莫西林、头孢他定、磺胺间甲氧嘧啶、头孢拉啶6种药物高度敏感，对林可霉素、青霉素、大观霉素、强力霉素、卡娜霉素6种抗生素耐药。

羊；致病性大肠杆菌；药敏试验

随着我国的养殖业的发展，羊的养殖数量越来越多，我国养羊数量主要集中于新疆、青海、四川、内蒙古、山东、河北及北京等多个省市养地区，多个地区的羊养殖已经形成规模化的养殖场，集约化养殖羊越来越多。羊相关的传染性疾病越来越多，越来越复杂。养殖户对羊相关的传染性疾病也愈来愈重视。羊的相关的传染性疾病主要包括病毒性、细菌性疾病。其中，羊的细菌性的传染病最为严重，尤其是羊的致病性大肠杆菌引起的腹泻严重危害着我国养羊的发展。因此，羊的致病性大肠杆菌病成为养羊业中常见的传染性疾病之一，羊的致病性大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起不同阶段羊的一种急性、热性、败血性传染病，对不同阶段的羊均易感，羊的致病性大肠杆菌病发病无明显的季节性，常年均有发生羊的致病性大肠杆菌病，笔者通过对突然发病的临床症状和剖检变化实验室诊断技术及致病性试验，确定引起150日龄羊严重腹泻和突然死亡的病原菌为致病性大肠杆菌，对其进行药敏试验，分析其耐药性，进行合理的使用药物。

1 发病情况

某一羊养殖场，养羊数量为1000只左右，其中，150日龄的羊出现食欲废觉，严重腹泻，有的羊只出现了神经症状，有的羊突然死亡，发病率为10%，死亡率为6%。

2 临床症状

150日龄的羊出现了精神沉郁，食欲开始减少，到后期出现了食欲废绝，有的羊，口腔黏膜以及糜烂，流出白色带泡沫的涎液，舌头肿大，病羊的鼻腔和眼睛有脓性分泌物排出，有的病羊出现水样的黄色腹泻，有的病羊带有神经症状，严重腹泻、脱水而死。

3 病理剖检变化

对病死羊进行病理剖检，观察组织学症状。剖检的病羊病羊的胸腔、腹腔均有淡黄色渗出液，颌下、肠系膜淋巴结肿大、出血；心脏发硬，淤血；肝脏肿大、质脆呈线淡黄色；肾脏肿大，胃及肠道有片状或者条状的出血，肠壁变薄，严重的黏膜脱落。

4 细菌分离培养与形态学观察

无菌采集150龄的突然死亡的肝脏、肺脏、肾脏、心血等病料组织接种于7%绵羊脱纤血液营养培养基上，放置37℃培养箱中培养12～16h后，接种与伊红美蓝培养基养基上，37℃恒温培养12h，挑取单个优势菌落接种革兰氏染色镜检。结果显示，从病死仔猪体内分离菌株在伊红美兰培养基可见边缘光滑整齐、湿润的、带铁锈黑色菌落，革兰氏染色呈两端钝圆阴性杆状菌，与报道大肠杆菌培养特性和形态特征一致。

5 细菌生化特性鉴定

分离菌株能分解麦芽糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇；木糖和阿拉伯糖并产酸产气，吲哚和甲基红阳性，V-P试验呈阴性，经ATB自动生化仪鉴定为大肠杆菌，评定结果合格率为 99.9%。与大肠杆菌的生化特性一致。

6 分离菌株的致病性试验

将6只小白鼠分为2组，第一组每只小白鼠口服分离菌株0.5 ml（109cfu /ml），另外一组，口服等量的生理盐水，观察7天，第一组小鼠出现全部死亡，另外一组健康存活，说明了分离的菌株对小白鼠具有很强的致病性。

7 药敏试验

用K-B药敏纸片法对分离的致病性链球菌进行药敏试验，结果显示，分离菌株对头孢曲松、氨苄西林、阿莫西林、头孢他定、磺胺间甲氧嘧啶、头孢拉啶6种药物高度敏感，对林可霉素、青霉素、大观霉素、强力霉素、卡娜霉素6种抗生素耐药。

表1 药敏试验结果

8 结论

通过对突然发病的临床症状和剖检变化实验室诊断技术及致病性试验，确定引起150日龄羊严重腹泻和突然死亡的病原菌为致病性大肠杆菌，将分离到的大肠杆菌通过口服方式攻毒给小白鼠，结果显示，分离到的大肠杆菌对小白鼠具有很强的致病性，感染率100%，死亡率100%。因而，证实分离菌株为致病性大肠杆菌。结果显示，分离菌株对头孢曲松、氨苄西林、阿莫西林、头孢他定、磺胺间甲氧嘧啶、头孢拉啶6种药物高度敏感，对林可霉素、青霉素、大观霉素、强力霉素、卡娜霉素6种抗生素耐药。

[1]蒋培红，韩冬，肖真真，等.济宁青山羊大肠杆菌病病原分离鉴定[J].畜牧与兽医，2016，48（1）：142-143.

[2]苏洋洋，宋萍，孙鎏国，等.一例山羊大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验[J].畜禽业，2014，（6）：8-9.