猪圆环病毒病与传染性胸膜肺炎混合感染的诊断与分析

梁井林

（广西上思县动物疫病预防控制中心，广西上思县 535599）

猪圆环病毒病与传染性胸膜肺炎混合感染的诊断与分析

梁井林

（广西上思县动物疫病预防控制中心，广西上思县 535599）

广西上思县某猪场育肥猪近期发生疫病，主要表现在病猪发热、咳嗽、呼吸困难、体表发绀和急性死亡等症状。剖检发现病猪气管内积聚血样粘液，肺脏充血肿大，全身淋巴结肿大出血，脾脏肿大等典型病变。结合猪群临床症状和实验室检测结果最终确诊该病例是由猪圆环病毒病和传染性胸膜肺炎混合感染引起的。

猪圆环病毒病；传染性胸膜肺炎；诊断；混合感染

猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2）引起的一种高度传染性疫病。该病可以感染各年龄段的猪，在临床上主要表现为断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎肾病综合症、猪呼吸道疫病综合征、母猪繁殖障碍、肉芽肿性肠炎和仔猪先天性震颤等多种症状[1]。猪圆环病毒感染的猪可以导致机体免疫系统受损，使其易于继发其他病原，从而引发更为严重的临床症状。该病的流行给我国养猪生产带来巨大威胁。

猪传染性胸膜肺炎（Porcine contagious pleuropneumia，PCP）是由猪传染性胸膜肺炎放线杆菌引起的一种细菌性呼吸道疫病。该病的急性型主要表现为急性出血性纤维素性肺炎，慢性型则以纤维素性坏死性胸膜肺炎为特征[2]。该菌可以感染各年龄段的猪，但是以2～5月龄的育肥猪最为多见。随着现代养猪密度的增加以及免疫抑制性疫病的干扰，猪传染性胸膜肺炎已经成为阻碍我国养猪业发展的重要病原之一。

近年来，由于圆环病毒疫苗的广泛使用，使猪圆环病毒病在大多数猪场中得到了较为有效的控制，但是部分猪场尤其是散养户由于生物安全措施不健全以及疫苗免疫不合理等原因导致圆环病毒在猪群中循环传播，猪群总体抗病能力低下，从而易于继发细菌性疫病。笔者近期就诊断了一起猪圆环病毒病和传染性胸膜肺炎混合感染的病例，现将诊断过程报告如下：

1 发病情况

2017年7月初，广西上思县某猪场育肥猪发生疫病。主要表现为育肥猪发热，咳嗽，腹式呼吸，体表发绀等症状。急性发病猪在出现症状后半天内即死亡，且死前鼻孔流出血样液体。据养殖户介绍，该猪场存栏育肥猪100头，属于自繁自养模式。在母猪配种前和仔猪断奶后各免疫一次猪圆环灭活苗，猪传染性胸膜肺炎没有进行免疫。待笔者前去猪场会诊时，该猪场已有6头育肥猪表现严重呼吸道症状，其中2头猪已发病死亡。本次病例只波及4月龄的育肥猪，母猪和仔猪没有出现临床症状。

2 剖检病变

病死猪臀部、腹部、耳根等部位发绀，鼻孔流血。剖检发现病猪气管积聚血样泡沫样液体。肺脏高度充血肿大，呈紫红色，肺间质增宽（图1A）。胸腔积液，呈淡黄色。全身淋巴结肿大出血，尤其是腹股沟淋巴结肿大3倍左右。脾脏肿大（图1B）。其他器官未见明显病变。笔者采集病猪肺脏、淋巴结、脾脏等部位进行实验室检测。

图1 病猪典型病变照片

3 实验室检测

3.1 细菌分离鉴定

用无菌接种环采集病猪肺脏接种到含NAD（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）因子和5%犊牛血清的TSA培养基上，置于37℃培养箱中培养约48h，观察到光滑、半透明，针尖大小的菌落。无菌采集单个菌落进行革兰氏染色，在显微镜下看到革兰氏阴性短小杆菌。参考张建新等[3]建立的猪胸膜肺炎放线杆菌PCR诊断方法对所分离的菌落进行PCR鉴定。结果显示，猪传染性胸膜肺炎放线杆菌阳性（图2）。

图2 猪胸膜肺炎放线杆菌PCR检测结果

3.2 病毒检测

采集病猪肺脏、脾脏和淋巴结的少量组织进行充分碾磨，加入适量的PBS后搅拌均匀并分装到1.5mlEP管中，将组织匀浆反复冻融3次后置于普通离心机中进行适当离心，取离心后的上清液进行病毒学检测。分别参考罗廷荣等[4]建立的猪瘟病毒RT-PCR检测方法、韦莹等[5]建立的蓝耳病病毒RT-PCR检测方法和李莹莹等[6]建立的猪圆环病毒2型PCR检测方法对组织病料进行猪瘟、蓝耳病和圆环病毒2型的检测。检测结果显示，猪瘟和蓝耳病阴性，猪圆环病毒2型阳性（3）。

图3 组织样品病毒检测结果

4 讨论与小结

结合猪场发病情况、病猪剖检病变以及实验室检测结果最终诊断出该病例是由猪圆环病毒2型和传染性胸膜肺炎混合感染引起的。猪圆环病毒病是危害养猪业的一种重要免疫抑制性疫病，该病的病原感染机体后，可以在抗原递呈细胞如树突状细胞和巨噬细胞上进行复制，从而导致这些细胞的抗原递呈能力下降，进而影响T淋巴细胞和B淋巴细胞的充分激活[7]。同时有研究表明，PCV2可以上调机体IL-10的分泌[8]，而IL-10是一种强免疫抑制性细胞因子。因此，PCV2感染可以导致机体的先天性免疫和获得性免疫全面受损，最终为其他病原的入侵提供了便利。

PCV2在猪群中普遍存在，一般情况下单独感染不易引发临床疫病，只有在其他刺激因素的影响下才能促进疫病的发生。今年7月初，广西普遍出现炎热多雨的天气，而该猪场并没有采取有效的防湿降温措施，导致猪出现高温应激，且猪舍潮湿易滋生细菌，猪群面临巨大的感染压力，导致猪体内的PCV2活跃，从而引发临床症状。PCV2感染机体后，猪群的抗病能力大大降低，使猪传染性胸膜肺炎放线杆菌乘虚直入，最终导致猪圆环病毒病和传染性胸膜肺炎的混合感染。

当前，防控猪圆环病毒病和猪传染性胸膜肺炎主要依靠健全的生物安全措施和有效的疫苗免疫。猪场要采用自繁自养，全进全出的养殖方式，若要引种或外购仔猪，需将引进的猪进行隔离饲养，并做好各项血清学和病原学检测，确保引进猪群健康后方可入场。同时要做好猪场的日常消毒工作，防止病原的扩散。猪场可以根据本场的实际情况选用合适的猪圆环病毒苗和猪传染性胸膜肺炎菌苗，同时要定期检测猪群抗体水平，从而制定合理的免疫程序。若暴发猪圆环病毒病和传染性胸膜肺炎，应及时将临床健康猪进行紧急免疫接种并隔离饲养，将发病严重或病死的猪进行焚烧或深埋，同时对猪场环境和饲养工具进行全面消毒，最后选用敏感药物拌料饲喂一周，防止细菌的继发感染，降低猪场损失。

[1]覃一峰，季程远，吴桂杰，等.猪圆环和伪狂犬混合感染引起育肥猪肠炎和呼吸道疫病的诊断与分析[J].广西畜牧兽医，2017，33（3）：137-139.

[2]邓舜洲，张贻传，全木华，等.猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定[J].江西农业大学学报，2003，25（6）：913-915.

[3]张建新，朱岩昆，马金友，等.猪传染性胸膜肺炎放线杆菌PCR诊断方法的建立与应用[J]. 中国畜牧兽医，2013，40（4）：69-72.

[4]罗廷荣，波丹，黄宪高，等.RT—PCR检测猪瘟病毒初探[J].广西农业生物科学，2001，20（1）：17-20.

[5]韦莹，洪绍锋，覃艳然，等.一株Nsp2蛋白自然缺失123个氨基酸的PRRSV分离和鉴定[J]. 动物医学进展，2015，36（10）：34-38.

[6]李莹莹.广西陆川猪呼吸道疫病综合征的流行病学调查及猪圆环病毒2型的分离鉴定[D]. 广西大学，2014.

[7]林文君，黄明庆，殷海鹏.猪圆环病毒2型对猪的免疫抑制机理[J].畜牧兽医科技信息，2010，（8）：17-18.

[8]史利军，任林柱，李刚.猪圆环病毒2型免疫抑制机理研究进展[J].动物医学进展，2009，30（3）：74-77.