肉鸡新城疫母源抗体衰减规律和免疫程序试验

卢运战 ， 程帮照 ， 杨金兵 ， 诸亚平 ， 李 杨 ， 王 颖 ， 刘鹏义 ， 赵宏波

(1．安徽省宣州区畜牧兽医管理局 , 安徽 宣城 242000 ； 2.安徽省宣城市畜牧兽医局 , 安徽 宣城 242000 ；3.安徽华卫集团禽业有限公司 , 安徽 宣城 242000)

肉鸡新城疫母源抗体衰减规律和免疫程序试验

卢运战1， 程帮照2， 杨金兵1， 诸亚平1， 李 杨1， 王 颖3， 刘鹏义3， 赵宏波3

(1．安徽省宣州区畜牧兽医管理局 , 安徽 宣城 242000 ； 2.安徽省宣城市畜牧兽医局 , 安徽 宣城 242000 ；3.安徽华卫集团禽业有限公司 , 安徽 宣城 242000)

鸡新城疫(ND)是由鸡新城疫病毒引起鸡的一种急性、高度接触性、高致死性传染病，严重危害养鸡生产，疫苗免疫是预防和控制ND的主要手段，有的养殖场免疫途径选择不合理，有的免疫次数过多，有的免疫时机不佳，免疫失败情况也时有发生，研究鸡新城疫母源抗体的消退规律，建立科学合理的免疫程序对新城疫防控有实际意义。

当前多数肉鸡养殖场在1日龄采用喷雾、点眼或滴鼻等方式进行免疫，本试验中，对1日龄雏鸡用ND活苗分别进行喷雾、点眼和滴鼻3种免疫途径接种，设定对照组，通过检测抗体水平，可确定1日龄的免疫途径，也为第二次免疫时间提供科学依据；第二次加强免疫中，选择注射和饮水两种方法，比较免疫效果，从而建立肉鸡新城疫免疫程序。

1 材料与方法

1.1 疫苗 鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗(HB1株+H120株)，购自北京信得威特科技有限公司，生产批号：201603001；用于喷雾、滴鼻、点眼和饮水免疫，免疫剂量均按说明书要求操作。鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(LaSota株+M41株+WD株)(派力优)，购自四川省华派生物制药有限公司，生产批号：2016004；用于注射免疫，免疫剂量按说明书要求操作。

1.2 检测试剂 鸡新城疫血凝抑制试验抗原，购自哈尔滨动物生物制品国家工程研究中心有限公司(批号：20151103)；鸡新城疫血凝抑制试验阳性血清和阴性血清，购自哈尔滨动物生物制品国家工程研究中心有限公司(批号：20151101)。

1.3 试验设计 1日龄健康皖江黄雏鸡2 400羽，由安徽华卫集团禽业有限公司提供，分成5组，共2个批次，第一组来源同一批次，共300羽，第二、三、四、五组来源同一批次，其中第三组900羽，其他每组300羽。第一、二组作为对照，不进行任何免疫；第三组1日龄雏鸡进行ND喷雾免疫，第四组1日龄雏鸡进行ND点眼免疫，第五组1日龄雏鸡进行ND滴鼻免疫。试验鸡由安徽华卫集团禽业有限公司在隔离场所按常规方法进行饲养管理[1]，分别于1、4、7、10、13、16、19、22日龄采集血样，每组每次采样30羽，18日龄前用心脏采血，18日龄后翅静脉采血，采样后鸡只废弃，血样放于室温待自然淅出血清后，取血清于离心管中，放置于-20 ℃冰箱冷冻保存待检。13日龄时，选取第三组喷雾免疫组鸡600羽，平均分成A、B两小组，A组进行注射免疫，B组进行饮水免疫，每隔4天分别进行翅静脉采血30羽，血样放于室温待自然淅出血清后，取血清于离心管中，放置于-20 ℃冰箱冷冻保存待检。

1.4 抗体检测方法 按照国标《新城疫诊断技术》(GB/T 16550-2008) 中血凝和血凝抑制试验(HA-HI)方法进行抗体检测。每组按采样日龄分别计算平均值。

2 结果

2.1 不同批次皖江黄肉鸡新城疫母源抗体衰减规律 对两组不同批次的试验鸡群，采集其不同日龄血样进行ND抗体的HI效价测定。由表1可知，两组1日龄皖江黄雏鸡的ND母源抗体HI效价平均值分别是7.8 log2、和7.5 log2， 10 日龄分别降至5.95 log2和4.60 log2，22 日龄降至2.65 log2和2.35 log2。依据母源抗体滴度衰减规律，10～13日龄进行1次加强免疫为宜。

表1 两批次皖江黄鸡ND母源抗体的动态变化 (log2)

2.2 同一批次1日龄雏鸡不同免疫接种方法新城疫抗体测定 对同一批次的第2、3、4、5组鸡群在不同日龄采样后检测新城疫抗体，检测结果如表2所示，经喷雾、点眼、滴鼻免疫后，免疫组抗体滴度比空白对照组略高，但抗体均匀度有所提升，3种免疫途径间的免疫效果差异不显著。

表2 同一批次1日龄雏鸡不同免疫方法ND抗体的动态变化 (log2)

2.3 1日龄喷雾免疫，13日龄注射免疫和饮水免疫效果监测 13日龄时，采用注射免疫和饮水免疫两种方法分别进行ND第二次免疫，抗体监测结果如表3所示，由此可知，1日龄进行喷雾免疫，13日龄进行注射免疫可获得良好的ND免疫效果；1日龄进行喷雾免疫，13日龄进行饮水免疫ND免疫效果不明显。

表3 1日龄喷雾免疫，13日龄注射免疫和饮水免疫效果监测 (log2)

3 讨论

测定ND母源抗体的衰减规律对于制定科学合理的ND免疫程序是十分重要的基础性工作，本试验选取了两组不同批次的皖江黄鸡为试验对象，研究母源抗体衰减规律。试验中，两批次皖江黄鸡ND母源抗体高低有所不同，这与父母代鸡的ND抗体高低直接相关，随着鸡日龄的增长，血清中母源抗体水平逐渐降低，至22日龄时，两批皖江黄鸡的母源抗体退到2.5 log2左右。选择其中一批试验鸡，对1日龄雏鸡分别进行喷雾、点眼和滴鼻免疫后，测定其血清中ND抗体，通过数据分析可以得出，3种免疫接种方法，其血清中ND抗体差异不显著，但与不免疫的空白对照组相比，抗体滴度下降较慢，抗体均匀度有所提高，考虑到操作简易性，1日龄喷雾免疫是比较不错的选择。

在第二次免疫中，根据1日龄雏鸡喷雾免疫后抗体的滴度下降规律，在10-13日龄时，抗体滴度降至5.0 log2左右，此时是加强免疫的最好时机，以弱毒苗饮水和死苗注射两种免疫途径进行，每隔4 d监测抗体1次，通过抗体滴度数据不难发现，注射免疫可获得可靠的免疫抗体滴度，抗体峰值较高，最高可达9.68 log2，均匀度高；而饮水免疫后，效果不明显，峰值最高只达到5.10 log2，离散度高，注射免疫效果明显好于饮水免疫。

在传染病的预防接种中，局部免疫作用有利于封锁入侵门户，是防制传染病的较好措施。由于新城疫病毒，对黏膜有特殊的亲嗜性，极易经呼吸道感染而发病，雏鸡早期抵抗ND病毒感染的机制主要依靠的是黏膜的局部免疫作用。通过疫苗在体内的占位性免疫，先入为主，干扰野毒的入侵。弱毒活疫苗通过滴鼻、点眼和气雾途径免疫，均可产生局部黏膜抗体和免疫记忆细胞，且这种抗体的产生不受母源抗体的影响，因而1日龄进行喷雾免疫，抗体滴度虽不能很大幅度提高，但对于早期新城疫的防控具有重要意义。周宝贵等[2]提倡1日龄进行活苗免疫。

综上所述，根据母源抗体衰减规律和黏膜的局部免疫作用原理，以及本试验的监测结果，肉鸡新城疫免疫程序推荐为1日龄用活苗进行喷雾免疫，13日龄采用灭活苗进行注射免疫，可取得良好效果。这种弱毒疫苗和灭活疫苗间隔免疫法与孟建斌等[3]报道的相符。

[1] 冯永志. 皖江黄鸡饲养管理技术[J]. 农技服务,2011,28(7):1 017-1 055.

[2] 周宝贵,卢国强,邢千旺，等. 鸡群新城疫免疫应坚持的原则[J]. 中国家禽,2005,27(21):51.

[3] 孟建斌,温志医,王兴龙，等. 弱毒疫苗和灭活疫苗间隔免疫法提高鸡群新城疫苗免疫效果的研究[J]. 畜牧兽医科技信息,2014,05:13-14.

S855.3

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0529-6005(2017)09-0051-02

2017-01-16

卢运战(1980-)，男，兽医师，硕士，主要从事动物疫病防控工作，E-mail: lyz0563@163.com