脊椎动物骨骼标本制作研究

林 和

(福建师范大学 生命科学学院, 福建 福州 350117)

脊椎动物骨骼标本制作研究

林 和

(福建师范大学 生命科学学院, 福建 福州 350117)

对骨骼标本制作过程中的腐蚀、脱脂、漂白3个重要过程进行实验性探究。结果表明:在一定浓度下,温度的变化在腐蚀与漂白过程中起着很大作用,同时作用时间长短也有一定的影响；脱脂过程采用3种不同溶剂连续脱脂起到较好效果。

骨骼标本; 腐蚀; 脱脂; 漂白

脊椎动物骨骼标本是生物标本的一种类型,它在生物教学和分类中占有重要地位[1]。骨骼标本在脊椎动物学的各纲教学过程中，作为直观、形象的教具，在活跃课堂气氛、增强学生的感知和理解能力起到一定的作用[2-3]；在科学研究方面，可以不受时间、地点的限制，为科学研究提供研究材料[4]。制作某种脊椎动物骨骼标本前，应先熟悉或了解此种动物的骨骼位置和形态，以免在制做时造成不必要的损失。骨骼标本可分为整体骨骼标本和散装骨骼标本[5]。整体骨骼标本是将骨骼按照其原来的自然位置安装成一个整体，散装骨骼标本即分解为各个部位的骨骼。

1 材料

实验药品：氢氧化钠，无水乙醇，过氧化氢，乙醚，混合脱脂剂。

实验器具：电子天平，HH-4型恒温水浴锅，卧式标本缸，大小标本瓶，解剖刀，解剖剪，眼剪，解剖镊，注射器，牙刷，塑料盆。

实验动物：成年鲤鱼，牛蛙，兔，购买于永辉超市与农大创业养殖园。

2 实验方法

2.1 药品配制

腐蚀剂配制：腐蚀剂浓度采用NaOH国标配制方法，本实验配制成3种不同质量分数的氢氧化钠腐蚀液:3%、5%、7%，分别盛入多个塑料器具备用。

脱脂剂配制：本实验制备3种不同脱脂剂，采用梯度法连续脱脂：85%乙醇，乙醇乙醚混合液(6∶4配比)，混合脱脂剂。

漂白剂配制：本实验漂白采用H2O2制备30%与10%两种不同质量分数的H2O2溶液。

2.2 实验动物取材

分别在动物解剖学实验课后选取成年的鲤鱼、牛蛙、兔的一些部位骨骼，这样可以减少材料的损失，降低成本。在药物腐蚀前，剔除大块肌肉，对长短骨(兔子或牛蛙肢骨等部位)两头进行钻孔，以便药剂能渗透到骨髓腔内,兔的颈椎椎体用尼龙线从椎孔穿过，两线头打结，以防止颈椎椎体在腐蚀过程中散落。分离鱼头与躯干，将鳃弓、鳃耙、咽齿整体从鱼头部取下[6-7]，去除其上血迹及一些软组织。3种动物分别取下需要的部位后，尽量将附着在骨骼上的大块肌肉去除干净，以备使用。

3 结果与分析

3.1不同NaOH浓度、作用时间、温度对鲤鱼、牛蛙、兔的骨骼腐蚀效果影响

分别取备用的实验材料放入制备好的多组NaOH溶液中，在同一质量分数下用不同作用时间、不同温度，以及不同质量分数下的在相对应的时间与温度下进行腐蚀多组实验,结果见表1。由表1可知：同一部位骨骼在同一质量分数、不同时间及不同温度下,其腐蚀效果不同；在同一质量分数下,温度升高,作用时间虽然短,骨骼会受到一定损坏；温度降低,作用时间虽然长，腐蚀效果不理想；温度在25～27 ℃之间时,时间视质量分数大小而定,腐蚀效果较好。另外，同一种动物实验材料，分别采用了2种质量分数、3组相同对应温度时，腐蚀作用的时间上作了一些调整，其作用结果基本一致。实验结果表明：温度的变化在腐蚀过程中起着很大作用，而腐蚀时间长短因浓度大小也有些影响。因此,在使用NaOH腐蚀液时，针对动物骨骼大小，选择适当的质量分数、确定相应的时间、把控好腐蚀温度[8]，同时对长短骨(肢骨等)两头钻了孔的要用注射器将其骨髓清除干净[9-10]。

表1 NaOH质量分数、作用时间、温度对鲤鱼、牛蛙、兔等部分骨骼腐蚀影响

3.2鲤鱼、牛蛙、兔经过不同脱脂剂脱脂后的效果

脱脂过程是制作骨骼标本的重要过程,也是关键的一个环节。经腐蚀处理过的骨骼取出,用清水洗净沥干,并除去残碎肉膜杂质后,放入85%乙醇溶液中固定。不同脱脂剂实验结果见表2。

实验结果表明：乙醇因能使较细小的骨骼具有一定的硬度而不易溶解,起到保护作用，同时乙醇具有脱色、脱水及弱脱脂作用[11],经3～4 d浸泡,骨骼呈浅黄色后取出；然后转入乙醇乙醚混合液中,因乙醇乙醚混合液具有一定的脱脂作用,能使骨骼中的脂肪溢出表面,其间要经常用牙刷刷除表面油脂，经5～7 d后转入最后的混合脱脂剂中；在这期间因实验动物的大小区别，其骨骼脱脂时间不一样，要经常观察继续刷除表面油脂至骨骼呈黄白色时取出。

3.3H2O2浓度、时间、温度对鲤鱼、牛蛙、兔的骨骼漂白影响

将脱脂后的实验材料清洗沥干后进入漂白环节。本实验采用H2O2作为漂白剂，将一些有色物质氧化为白色。为了缩短实验时间，实验设定30%与10%两种质量分数，在30%质量分数下设定不同时间与温度，10%质量分数作为进一步补充漂白作用。实验结果见表3。由表3可知,在同一质量分数下,作用的时间、温度不同，其漂白的结果不一样。鲤鱼的鳃弓、鳃丝、鳍及蛙的指趾骨等细小的骨骼在30%时虽然作用时间短,但漂白剂温度设定在32～35 ℃之间,鲤鱼鳃丝、鳍,蛙的细小骨骼受到了氧化损坏；而兔的骨骼粗大一些，在同样温度与浓度下，时间长一些，目的增加洁白度，结果骨骼有被氧化残缺；在同一质量分数(30%)下温度设定在23～27 ℃之间,从鲤鱼、蛙、兔的各部分骨架较完整,骨骼也洁白。实验结果表明:在一定浓度和时间的条件下,骨骼上过氧化氢的分解消耗是随着温度的升高而增加的,漂白效果是随过氧化氢在骨骼上分解率的增大而增高的,但温度过高骨骼会加快被氧化损坏，因此控制适当温度较为关键。本实验用质量分数为30%过氧化氢,鲤鱼、蛙时间在2～5 h之间、兔在7～10 h之间,温度在23～27 ℃之间漂白产生较好效果;最后再经过10%的过氧化氢、温度30 ℃、漂白3 h时间左右的漂白，使骨骼达到更稳定洁白。

表2 鲤鱼、牛蛙、兔经过3次不同脱脂剂脱脂的效果

表3 H2O2质量分数、时间、温度对鲤鱼、牛蛙、兔的骨骼漂白影响实验结果

4 结论

(1) 本实验结果表明:在腐蚀实验中,因氢氧化钠具有的腐蚀作用,并且溶解度随着温度升高,腐蚀性更强。在25～27 ℃之间某恒定温度下,因实验材料大小差异,在采用不同浓度时,选择适当的对应时间可取得效果较好。如鱼类的鳃丝、鳃弓，牛蛙、兔的指趾骨等小骨块，最好使用低浓度，还要不定时取出观察，否则骨骼会损坏甚至被腐蚀溶解。

(2) 通常使用单一的汽油或二甲苯或乙醇等多次脱脂方法,存在着实验过程安全隐患、骨骼存放久了脱脂效果不确定的因素[12],为此本实验脱脂方法分别采用3种脱脂剂连续进行脱脂,安全、无毒,逐步将油脂脱离干净,以达到彻底脱脂，以利长久保存。

(3) 漂白环节不仅温度较为关键,温度对过氧化氢的分解速度有直接的关系,时间过长会影响骨骼的完整性,时间太短会影响骨骼洁白度。

References)

[1] 刘凌云,郑光美.普通动物学[M].北京:高等教育出版社,2015.

[2] 潘红平,陈风华,王晓丽,等.动物标本的制作及其在教学中的功能[J].广西大学学报(自然科学版),2007,32(増刊1):357-359.

[3] 耿宝荣.动物学实验[M].北京:科学出版社,2012.

[4] 李梦云,张自强,熊建利.动物骨骼标本制作[J].畜牧与饲料科学,2010,31(10):18-19.

[5] 唐子英,唐子明,唐庆瑜.脊椎动物标本制作[M].上海:复旦大学出版社,1992.

[6] 邱奉同.鲫鱼骨骼标本制作法[J].生物学教学,1998(9):29-30.

[7] 苏怀栋,陈圆圆,龙微鑫,等.多种鱼类骨骼标本制作[J].河北渔业,2012,223(7):55-57.

[8] 瞿羽佳,黄玉风，孙娟.一种改良的骨骼标本制作方法[J].解剖学杂志,2014,37(4):556-557.

[9] 乔灵.骨骼标本制作的研究[J].韶关学院学报(自然科学),2011,32(2):35-39.

[10] 顾勇.脊椎动物骨骼标本的制作[J].安微农业科学,2011,39(14):8628-8630.

[11] 吴江锋,陈静,丁志兵.骨骼标本脱脂的新方法[J].解剖学研究.2012,34(1):72-73.

[12] 吴坤成,李泽宇,刘畅,等.多种骨骼标本脱脂溶剂的脱脂脱水效果比较[J].湘南学院学报(医学版),2013,15(4):49-50.

Study on preparation of vertebrate skeletal specimens

Lin He

(College of Life Sciences, Fujian Normal University, Fuzhou 350117, China)

An experimental exploration is carried out on the three important processes of corrosion, degreasing and bleaching during the traditional skeletal preparation. The results show that under the certain concentration, the temperature change plays a great role in the corrosion and bleaching processes, and has some effect on the length of time. Adopting three different solvents for continuous degreasing during the degreasing process has better effect.

skeletal specimens; corrosion; degreasing; bleaching

Q95-34

B

1002-4956(2017)10-0040-03

10.16791/j.cnki.sjg.2017.10.012

2017-05-04

林和(1961—),男,福建福州,学士，高级实验师,从事动物学及标本制作研究.

E-mail：ofss@fjnu.edu.cn