对单克隆抗体制备技术及应用研究进展的认识

● 於瑞敏 陈赢

对单克隆抗体制备技术及应用研究进展的认识

● 於瑞敏 陈赢

单克隆抗体是现代生命科学研究的重要内容，本文对单克隆抗体的类别进行了简单分析，并且明确指出了现阶段应用的多种单克隆抗体制备技术，同时，也对单克隆抗体制备技术的应用研究进展进行了一定的介绍，希望能够为我国生命科学研究事业的发展提供一定的理论支持。

单克隆抗体;制备技术;应用研究

在分子生物学及细胞生物学发展的影响下，单克隆抗体技术逐渐被应用在多个领域。单克隆抗体就是用特定的培养基筛选出既能稳定生长又能产生抗体的杂交瘤细胞，经过多年的研究，相关科研人员已经意识到单克隆抗体技术对于科研发展的重要性，所以，我国加强了对单克隆抗体制备技术的重视，不断提高单克隆抗体制备技术水平。

1 单克隆抗体的类别

1.1 人源化抗体

抗体的人源化改造主要是对抗体进行表面重塑或者重新构造，其中，表面塑造是指对鼠源抗体特殊区域表面的氨基酸进行重新塑造，这种方式具有一定的局限性，这只适合在与人抗体具有明显差异的表面氨基酸，利用与人抗体相似的氨基酸残基对其进行替换，从而提高抗体与抗原的特异性结合;重构抗体，是目前应用最常见的基本方法，其中的互补决定区移植抗体是通过对鼠源抗体上的互补决定区，经过分子克隆后，克隆到人体抗体与之相对应的区域内，但这种方法仍会存在非人源基因的少量残留，仍存在因其人体免疫排斥的可能[1]。

1.2 嵌合单克隆抗体

图1 小鼠单克隆抗体制备

自从单克隆抗体技术出现以来，单抗制备技术的一般流程就是从具有抗原免疫的小鼠中获取它的脾细胞，再将其与骨髓瘤细胞进行融合处理，最后对单个细胞进行克隆，从而培养出既能分泌抗体又能稳定生长的克隆细胞(如图1)。首先，免疫细胞表面F锻受体亲和力弱，产生的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用较弱，而且它与人补体成分结合能力低，对肿瘤细胞的杀伤能力较弱，并且鼠源性抗体在人血循环中的半衰期短，它发挥细胞毒作用的时间较短;其次，鼠单克隆抗体具有自身的免疫原性，这极易导致宿主发生过敏反应，这样不仅会影响单抗的效价，而且会严重影响病人的身体状况，所以，为了更好的应用于临床治疗，相关人员还需要对鼠源单克隆抗体做进一步的完善。

2 单克隆抗体制备技术

2.1 噬菌体抗体库技术

噬菌体抗体库技术主要是促进基因表达产物与亲和选择相结合的一种技术，它的实施载体是被改造的噬菌体，在噬菌体外壳蛋白质基因区域插入待选基因片段，这就使得蛋白质或者外源多肽的表达产物呈现在噬菌体的表面，进而通过亲和富集法表达有特异肤或蛋白质的噬菌体，该技术实现了基因型和表型的转换。利用这种方式，促使一个具有上亿个体外方式获得的不同抗体基因数据库的形成，使从真实的抗原中迅速分离高度相似的同族抗体成为可能，得到的抗体可用于制备完全人源化抗体。

2.2 核糖体展示技术

核糖体展示技术的基本原理就是利用PCR技术对目的基因进行扩增，使其形成DNA文库，同时，将启动子、核糖体结合位点等加入其中，并且将它们放置在具有藕联转录翻译的无细胞翻译系统中进行发育，在核糖体表面上承载目的基因的翻译产物，并且形成mRNA—蛋白质—核糖体的三元复合体，最后通过常规的免疫学检测方法，通过固相化的靶分子直接从三元复合体中筛选出感兴趣的核糖体复合体，再利用RTPLR扩增，经过多次循环过程，最终筛选出高亲和力的目标分子[2]。

3 单克隆抗体制备技术的应用前景

3.1 应用于疾病的检测

单克隆抗体可以对病原体类型进行准确识别，并且针对感染性疾病能够进行精确判断。同时，单克隆抗体还可以通过检测淋巴细胞表面分子，并且能够判断出淋巴细胞的分化阶段。其中，激素类单克隆抗体能够测定人体内的激素含量，并且利用该信息可以对体内的内分泌情况进行判断。

3.2 应用于疾病的临床治疗

单克隆抗体可以针对多种疾病进行治疗，其中对肿瘤临床治疗具有明显的效果。单克隆抗体治疗肿瘤的方式主要有生物导弹和纯抗体两种，现阶段已有几十种特异性单克隆抗体应用于临床治疗，推动了肿瘤治疗技术的发展。

3.3 均应用于疾病的预防

人体免疫主要由自身主动免疫及特异性免疫等构成，特异性免疫属于被动免疫，在抗原侵入人体后，在人体内部加入抗体，对病原体进行中和及清除，从而实现对疾病的预防。主动免疫是指在对病原体进行减毒化操作后，将其接种到人体内，使人体产生一定的免疫，促使体内的抗体对其产生相应的记忆，比如，对人体接种卡介苗等。虽然这两种免疫方式有所不同，但是，它们都可以利用单克隆抗体技术进行免疫。

4 结束语

本文通过对单克隆抗体的类别、单克隆抗体制备技术、单克隆抗体制备技术应用前景的研究分析，明确了单克隆抗体制备技术对于我国科学研究事业发展的重要作用。单克隆抗体制备技术的应用研究主要体现在用于疾病的检测、治疗及预防等方面，这充分的体现出了单克隆抗体制备技术不仅关乎科学事业的发展，而且还关系到人类的健康水平，所以，加强对单克隆抗体制备技术的研究具有重要的现实意义。

(作者单位：基蛋生物科技股份有限公司)

[1]郭粉粉,梁文波,张学梅.单克隆抗体制备技术及应用的研究进展[J].医学综述,2011,08：1129-1131.

[2]张力文.单克隆抗体制备技术的类别与应用[J].科技风 ,2017,03：256.