消炎利喉口服液质量标准研究

.云南省曲靖市第一人民医院，云南 曲靖 655000；.云南健测检验检测技术有限公司，云南 曲靖 655000

消炎利喉口服液质量标准研究

吕艳1李莉美1张瑶2袁建平1
1.云南省曲靖市第一人民医院，云南 曲靖 655000；2.云南健测检验检测技术有限公司，云南 曲靖 655000

目的建立消炎利喉口服液的质量标准。方法采用TLC法定性鉴别玄参、金荞麦，HPLC法对黄芩苷含有量进行测定。结果玄参、金荞麦分离度良好，斑点清晰，阴性无干扰。黄芩苷在0.208～1.248μg范围内线性关系良好(r=0.9998)，平均加样回收率为99.47%，RSD为0.43%。结论该方法快速、准确、灵敏度高，可用于消炎利喉口服液质量标准研究。

消炎利喉口服液；薄层色谱；高效液相色谱法；质量标准

消炎利喉口服液是云南省曲靖市第一人民医院院内自制纯中药制剂，处方源自我院名中医20多年临床验方，主要由金荞麦、玄参、黄芩、忍冬藤、臭灵丹等10味中药组成，具有养阴、清咽、清热消炎解毒的功效，主要用于急性扁桃体炎、咽峡炎，上呼吸道感染引起的咽喉肿痛。其现行质量标准比较简单，仅有金荞麦的薄层鉴别。为提升特色中药制剂品牌，更全面、有效地控制该制剂的质量，提升其质量标准，本实验在原有质量标准基础上，建立了玄参、金荞麦的TLC定性鉴别方法，并采用HPLC法测定消炎利喉口服液中黄芩苷的含量，以期全面有效地控制消炎利喉口服液制剂的质量[1]。

1 仪器与材料

1.1 仪器 1260型高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司)；分析天平(梅特勒-托利多国际股份有限公司)；R2003KE旋转蒸发仪(上海申生科技有限公司)；DZF9240型干燥箱(上海一恒科技有限公司)；pH计(梅特勒-托利多国际股份有限公司)。

1.2 材料 玄参对照药材(批号：121008-201007)、金荞麦对照药材(批号：121114-201403)、黄芩苷对照品(批号：110715-201016)均购自中国药品生物制品检定所。色谱纯乙腈、甲醇均购自美国Merck公司；其余化学试剂均为分析纯。

消炎利喉口服液(批号：20151129、20160117、20160516)和阴性样品，均由曲靖市第一人民医院制剂室提供。

2 方法与结果

2.1 薄层色谱鉴别[2-3]

2.1.1 玄参鉴别[2]取本品10mL，加乙酸乙酯振摇提取2次，每次10mL，弃取乙酸乙酯液，再用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次10mL，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1mL使之溶解，作为供试品溶液。同时制备不含玄参的阴性制剂，同法制成阴性对照溶液。另取玄参对照药材1g，同法制备成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(13:2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸乙醇试液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。如图1所示。

2.1.2 金荞麦鉴别[2]取本品15mL，加甲醇20mL，放置1h，加热回流1h，放冷，滤过，滤液浓缩至5mL，作为供试品溶液。同时制备不含金荞麦的阴性制剂，同法制成阴性对照溶液。另取金荞麦对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取表儿茶素对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5～10μL、对照药材溶液和对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(1∶2∶0.2∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以25%磷钼酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱色谱和对照品相应的位置上，显相同颜色的斑点。如图2所示。

2.2 黄芩苷的含量测定[4-5]

2.2.1 溶液的制备

2.2.1.1 对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含40μg的溶液，即得。

2.2.1.2 供试品溶液的制备 精密量取本品0.2mL，置10mL量瓶中，加甲醇35mL，超声处理(功率135W，频率59kHz)20min，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.1.3 阴性样品溶液的制备 按照工艺制备消炎利喉口服液阴性样品(缺黄芩)，按照“2.2.1.2”项下配制阴性样品溶液。

2.2.2 色谱条件及系统适应性试验 色谱柱：Zorbax C18 (4.6mm×150mm，5μm)；流动相：甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)；柱温：30℃；检测波长：280nm；流速：1.0mL/min；进样量：10μL。

2.2.3 线性关系考察 精密量取浓度为260μg/mL的黄芩苷对照品溶液适量，加甲醇制成浓度分别为20.8、41.6、62.4、83.2、104.0、124.8μg/mL的对照品溶液，分别进样10μL，记录色谱图，以峰面积对黄芩苷的进样质量(μg)绘制标准曲线，线性回归方程为Y=3479X-37.46，r=0.9998。结果表明，在0.208～1.248μg范围，峰面积与黄芩苷进样质量呈良好的线性关系。

2.2.4 精密度试验 在“2.2.2”项色谱条件下，精密吸取对照品溶液5μL，连续进样6次，测定峰面积，RSD为0.08%，表明进样精密度良好。

2.2.5 重复性试验 取同一批样品，按“2.2.1.2”项下方法制备6份供试品溶液，在“2.1.1”项色谱条件下测定峰面积，峰面积RSD为1.2%，结果表明重复性良好。

2.2.6 稳定性试验 取同一批供试品溶液，在“2.2.1.2”项色谱条件下0、2、4、8、16、24进样，测定峰面积，峰面积RSD为2.3%，结果表明在24h内供试品溶液稳定性良好。

2.2.7 专属性试验 将黄芩苷对照品、供试品溶液和阴性样品溶液按“2.2.2”项下条件下分别进样，记录色谱图，黄芩苷的保留时间为8.65min左右，高效液相色谱图显示在黄芩苷峰位处，阴性样品中无杂质干扰，方法专属性良好。如图3所示。

2.2.8 加样回收率试验 精密量取0.1mL消炎利喉口服液样品(20160516，浓度2.674 mg/mL)9份置于10mL容量瓶中，作为低、中、高水平组分别加入浓度为96.78μg/ mL的黄芩苷对照品2.0、3.0、4.0mL，每个浓度3份，按照“2.2.1.2”项下操作，依次定容、摇匀、滤过，进样测试，记录色谱图，计算黄芩苷各浓度水平的加样回收率。结果表明，平均加样回收率为99.47%，RSD为0.43 %，加样回收率符合要求。见表1。

表1 加样回收率试验结果 (n=9)

2.2.3 样品测定 按照上述验证的方法，取不同批次的消炎利喉口服液测定黄芩苷的含量，3批样品中黄芩苷的含量分别为2.677、2.663、2.674mg/mL。按照3批样品计算，以均值的80%作为含量下限，每1mL消炎利喉口服液中含黄芩苷不少于2.14mg。

3 讨论

3.1 玄参和金荞麦TLC法鉴别 消炎利喉口服液的质量标准提升是在原有质量标准基础上，根据本院的配制的实际情况而形成的。在制定玄参和金荞麦TLC方法时，发现由于本品为水煎煮液，成分复杂，通过文献查阅[6-9]并结合2015版《中国药典》，选择合适的提取方法及展开剂，得到的色谱斑点清晰，阴性对照无干扰，方法专属性较强。

3.2 增加黄芩苷含量测定的意义 依据《中国药典》2015版要求，对中药制剂需进行定量分析，从院内制剂研究开发及发展的角度，须提升院内制剂的质量标准[10]。研究针对处方中另一味臣药黄芩建立其指标性成分黄芩苷的含量测定方法，并进行了方法学验证。实验采用所建立的方法，对3个不同批次消炎利喉口服液中黄芩苷的含量进行测定，发现各批次差异不明显，表明该工艺比较稳定，质量控制方法可行。

研究为消炎利喉口服液建立了有效成分含量测定方法，并且增加了玄参的薄层色谱鉴别，进一步完善其质量标准，这对指导该制剂今后的生产、质量控制以及产品质量的稳定性提高具有重要意义。

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QualityStandardStudyonXiaoyanLihouOralLiquid

LV Yan1LI Limei1ZHANG Yao2YUAN Jianping1

1.The First People's Hospital of Qujing,Qujing 655000,China;2.Yunnan Jian Technology Co., Ltd. measuring inspection,Qujing 655000,China

ObjectiveTo establish quality standards for the Xiaoyan Lihou oral liquid.MethodsIt was used TLC for identification of Scrophulariaceae and Fago, HPLC method for the determination of baicalin conten.ResultsTLC of Scrophulariaceae and Fago had a good specialization and there was no interference when compared with the negative. The linear ranges of Baicalin were 0.208 ～ 1.248μg (r=0.9998), respectively. The average recovery rate was 99.47% andRSDwas 0.43%, respectively.ConclusionThe method is rapid, accurate, sensitive and can be used for the quality control of Xiaoyan Lihou oral liquid.

Xiaoyan Lihou Oral Liquid; TCL; HPLC; Quality Standards

R284

A

1007-8517(2017)17-0015-03

2017-07-31 编辑：陶希睿)

吕艳(1977-)，本科，主管药师，研究方向为中药制剂分析及质量标准研究。E-mail：67430552@qq.com