气相色谱法测定康力欣胶囊中丁香酚的含量

云南省食品药品监督检验研究院，云南 昆明 650011

气相色谱法测定康力欣胶囊中丁香酚的含量

张元杰周兰来国防*

云南省食品药品监督检验研究院，云南 昆明 650011

目的建立气相色谱法测定康力欣胶囊中丁香酚的含量。方法采用HP-Innowax毛细管柱(30m×0.32mm，0.25μm)，载气为氮气，流量2.0 mL·min-1；进样口温度230 ℃，柱温箱温度190 ℃，FID检测器温度为250 ℃；进样体积为1 μL，分流比10：1。结果丁香酚在0.049～1.199 mg·mL-1范围内线性关系良好(r= 0.9999)，平均加样回收率为99.2%(RSD为1.8 ，n=9)。结论该法准确、高效，可用于康力欣胶囊的质量控制。

气相色谱；康力欣胶囊；丁香酚

康力欣胶囊，由阿魏、九香虫、丁香等药材组成，是基于藏族民间药方开发的中药复方制剂，具有扶正去邪，软坚散结的功效，主治消化道恶性肿瘤、乳腺恶性肿瘤、肺恶性肿瘤见于气血淤阻症者[1-3]。研究表明[4-6]，丁香及其主要成分丁香酚在宫颈癌、前列腺癌、黑色素瘤等疾病的治疗中显示了良好的疗效，是康力欣胶囊的重要组成部分，但在现行标准中无相关的含量测定项目。因此笔者采用气相色谱法，测定康力欣胶囊中丁香酚的含量，现报告如下。

1 仪器与材料

1.1 仪器 Agilent 6890气相色谱仪(美国Agilent公司)； BP-211D电子天平(德国Sartorius公司)。

1.2 材料 丁香酚对照品(批号：110725-201615，含量为99.3%，购中国食品药品检定研究院)；康力欣胶囊样品(云南名扬药业有限公司，批号：170201、161202、150803)；无水乙醇为色谱纯(德国默克公司)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 HP-Innowax毛细管柱(30 m × 0.32 mm，0.25 μm)，载气为氮气，流量2.0 mL·min-1；进样口温度230 ℃，柱温箱温度190 ℃，FID检测器温度为250 ℃；进样体积为1 μL，分流比10：1。

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品溶液制备 取丁香酚对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每1mL含丁香酚1.199 mg的溶液，作为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液制备 取本品内容物适量，混匀，取约1.0 g，精密称定，置100 mL具塞锥形瓶中，精密加入无水乙醇25 mL，密塞，摇匀，称定重量，避光超声处理20min(功率250 W，频率35 kHz)，放冷，再称定重量，加无水乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.3 缺丁香阴性对照溶液制备 取除丁香外的七味药材，依处方制备缺丁香阴性样品，按“2.2.2”项下方法，制备缺丁香阴性对照溶液。

2.3 专属性试验 分别吸取对照品溶液、供试品溶液及缺丁香阴性对照溶液各1 μL，注入气相色谱仪，按“2.1”项下色谱条件测定，记录色谱图。供试品色谱图中呈现与丁香酚对照品色谱峰保留时间相同的色谱峰，且与杂质峰分离良好，阴性样品无干扰，该方法专属性较好。如图1所示。

2.4 线性关系考察 精密吸取“2.2.1”项下的对照品溶液，用无水乙醇逐级稀释，制成系列浓度对照品溶液，分别精密吸取1 μL，注入气相色谱仪，按“2.1”项下色谱条件测定，记录色谱图。以质量浓度(mg·mL-1)为横坐标X，峰面积为纵坐标Y，绘制标准曲线。结果丁香酚在0.049～1.199 mg·mL-1范围内，线性关系良好(r= 0.9999)，回归方程为Y= 712.44X- 0.5649。

2.5 精密度试验 精密吸取“2.2.1”项下的对照品溶液1 μL，注入气相色谱仪，按“2.1”项下色谱条件测定，连续进样6次，记录色谱图。计算丁香酚峰面积的RSD值为0.3 %(n= 6)，仪器精密度良好。

2.6 重复性试验 取批号为170201的供试品6份，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液。分别精密吸取1 μL，注入气相色谱仪，按“2.1”项下色谱条件测定并计算。结果丁香酚平均含量为6.482mg·g-1，RSD为0.7 (n= 6)，重复性良好。

2.7 加样回收试验 取批号为170201的供试品0.5g，共9份，精密称定，按“2.6”项下测得含量的50%，100%，150%，共3个水平，分别加入丁香酚对照品，每水平3份，按“2.2.2”项下方法，制备供试品溶液。分别精密吸取1 μL，注入气相色谱仪，按“2.1”项下色谱条件测定并计算。结果丁香酚平均回收率为99.2 %，RSD为1.8(n= 9)，方法准确性良好。见表 1。

表1 加标回收试验

2.8 稳定性试验 取批号为170201的供试品，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，分别于0、2、4、6、8、12 h进样测定，记录峰面积，计算丁香酚峰面积RSD值为0.6 (n= 6)，表明供试品溶液在制备后12 h内保持稳定。

2.9 样品含量测定 取康力欣胶囊样品3批，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，分别精密吸取1 μL，注入气相色谱仪，分别按“2.1”项下色谱条件，测定并计算。见表 2。

表2 样品测定结果 (n= 3)

3 讨论

3.1 提取溶剂的选择 正己烷是丁香酚含量测定的常用提取溶剂[7-8]。康力欣胶囊由乙醇提取浸膏与药材细粉混匀制成，考虑到乙醇与丁香酚混溶[9]，对药材浸润性较好，且操作过程中较正己烷损失少，因此选择无水乙醇作为提取溶剂。

3.2 提取方法的优化 丁香酚含较活泼的酚羟基，光热条件下易氧化或降解[10]，因此选择避光超声作为提取方法。通过不同超声提取时间对丁香酚提取效果的比较，最终确定超声处理时间为20min。

3.3 含量测定结果分析 依处方制法计算，每1 g康力欣胶囊内容物相当于丁香药材0.2 g。含量测定结果显示，3批样品中丁香酚约占丁香药材的3.4 %～4.6 %(按干燥品计算)，批间差异较小，质量较为稳定。

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QuantitativeDeterminationofEugenolinKanglixinCapsulesUsingGasChromatography

ZHANG Yuanjie ZHOU Lan LAI Guofang*

Yunnan Institute for Food and Drug Control，Kunming 650011，China

ObjectiveTo establish a method for quantitative determination of eugenol in Kanglixin capsules using gas chromatography (GC).MethodsThe analyses were performed on a HP-Innowax capillary column (30 m × 0.32 mm, 0.25 μm) using nitrogen as carrier gas at a flow rate of 2.0 mL·min-1. The temperatures of inlet, oven and FID detector were set at 230 ℃, 190 ℃ and 250 ℃, respectively. The injection volume was 1μL (split ratio 10:1).ResultsThe calibration curve of eugenol showed good linearity (r= 0.9999) within the range of 0.049 mg·mL-1～1.199 mg·mL-1. The average recovery was 99.2 % (RSD= 1.8 %,n= 9).ConclusionThe method was accurate and efficient for quality control of Kanglixin capsules.

Gas Chromatography; Kanglixin Capslues; Eugenol

R927.2

A

1007-8517(2017)18-0034-03

2017-08-22 编辑：邓丽佳)

张元杰( 1984- )，男，汉族，硕士研究生，主管药师，研究方向为药品检验及质量标准研究。E-mail:yx8996@163.com

来国防(1973-), 男，汉族，博士研究生，主任药师, 研究方向为药品检验及质量标准研究。E-mail: 1547592470@qq.com