血清NGAL、Cys-C、RBP联合检测对糖尿病肾损伤早期诊断的临床意义

朱文芳，沈建军，韩 双，付 涛，邹爱民

(1.西安市长安医院检验科，陕西 西安 710016；2.第四军医大学第二附属医院检验科，陕西 西安 710000)

血清NGAL、Cys-C、RBP联合检测对糖尿病肾损伤早期诊断的临床意义

朱文芳1，沈建军2，韩 双1，付 涛1，邹爱民1

(1.西安市长安医院检验科，陕西 西安 710016；2.第四军医大学第二附属医院检验科，陕西 西安 710000)

目的 探讨血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、胱抑素C(Cys-C)和视黄醇结合蛋白(RBP)联合检测在2型糖尿病肾功能损伤早期诊断中的临床意义。方法 选择2015年11月至2016年10月西安市长安医院内分泌科就诊的220例2型糖尿病患者为观察组，根据尿微量白蛋白与尿肌酐比值(ACR)将患者分为单纯糖尿病(SDM)组83例、早期糖尿病肾病(EDN)组77例和临床期糖尿病肾病(CDN)组60例，并选择80例健康体检者为对照组。采用胶乳免疫增强比浊法检测血清Cys-C、RBP、NGAL，脲酶-谷氨酸脱氢酶法检测血清尿素(UREA)，酶法检测血清肌酐(CREA)，并对各组检测结果进行比较分析。结果 SDM组患者的血清NGAL、CysC、RBP、UREA与CREA检测结果与对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；EDN组患者的血清NGAL、CysC及RBP检测结果与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05)，血清UREA与CREA比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；CDN组患者的血清NGAL、CysC、RBP、CREA及UREA检测结果与对照组、SDM组及EDN组比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。EDN组患者的血清NGAL、CysC、RBP阳性率分别为55.84%、59.74%、54.55%，均明显高于SDM组的19.28%、16.87%、15.66，差异均有统计学意义(P＜0.05)，而血清UREA、CREA阳性率比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；CDN组患者的血清NGAL、CysC、RBP、UREA、CREA阳性率高于EDN组和SDM组，差异均有统计学意义(P＜0.05)；血清NGAL、CysC、RBP在SDM组、EDN组、CDN组联合检测的阳性率分别为25.30%，68.83%，96.67%，均高于各单项检测结果的阳性率；Pearson相关性分析结果显示，血清NGAL、CysC、RBP与尿ACR检测结果之间存在正相关(r=0.65、0.62、0.58，P＜0.05)。结论 血清NGAL、Cys-C和RBP可作为2型糖尿病患者肾损伤早期诊断的重要指标，联合检测可提高糖尿病肾病早期诊断的阳性率，对临床识别和早期诊断糖尿病肾病有重要临床意义。

胱抑素C；血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白；血视黄醇结合蛋白；Ⅱ型糖尿病；糖尿病肾病

近年来，随着生活水平不断提高，2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)的发病率逐步上升，糖尿病肾病(diabetic nephropahy，DN)是其最常见的并发症，也是T2DM患者致残或致死的主要原因，由于其呈不可逆的进行性发展导致肾功能损害甚至肾衰竭。因此，糖尿病患者在肾脏早期损伤时及时诊断并干预，具有重要的临床意义。本文通过观察血清NGAL、RBP、CysC检测结果在2型糖尿病患者肾功能损伤不同时期的变化，探讨其联合检测在DN早期诊断中的临床意义。

表1 各组生化指标检测结果比较s)

表1 各组生化指标检测结果比较s)

注：与对照组比较，aP＜0.05;与SDM组比较，aP＜0.05；与EDN组比较，bP＜0.05。

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1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2015年11月至2016年10月西安市长安医院内分泌科收治的220例2型糖尿病患者作为研究对象，其中男性125例，女性95例，平均年龄54岁，所有患者均符合2型糖尿病诊断标准[1]。研究[2]表明尿微量白蛋白与肌酐比值(ACR)测定是糖尿病早期肾损伤的敏感指标。依据尿微量白蛋白与肌酐比值将2型糖尿病患者分为3组：(1)单纯糖尿病(SDM)组：ACR≤30 mg/g，共83例(男性48例，女性35例)；(2)早期糖尿病肾病(EDN)组：300 mg/g≥ACR＞30 mg/g，共77例(男性42例，女性35例)；(3)临床期糖尿病肾病(CDN)组：ACR＞300 mg/g，共60例(男 35例，女25例)。所有研究对象均排除冠心病、肝病、急慢性炎症、妊娠、自身免疫性疾病、Ⅰ型糖尿病等继发及原发性肾脏疾病。选择同期性别、年龄匹配的健康体检者80例(男性46例，女性34例，平均年龄52岁)作为对照组，各组间受检者的性别、年龄等一般资料比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 检测方法 各组受检者均予入组次日早晨空腹采集静脉血3 mL，3 000 r/min离心5 min分离血清待测，同时收集晨尿3 mL，3 000 r/min离心5 min，取上清液待测。采用胶乳增强免疫比浊法检测血清NGAL、RBP、CysC，参考范围：NGAL 37～180 ng/mL，RBP 25～70 mg/L，CysC＜1.05 mg/L，采用酶法检测血清尿素和肌酐，参考范围：UREA男，3.1～8.0 mmol/L，女，3.1～8.8 mmol/L，CREA 男，57～97 μmol/L，女，41～81 μmol/L；同时采用透射比浊法检测尿微量白蛋白及采用酶法检测尿肌酐计算尿微量白蛋白与肌酐比值(ACR)，ACR=尿微量白蛋白/尿肌酐，ACR参考范围0～30 mg/g；所有检测项目均采用宁波美康技术股份有限公司试剂在TBA-120FR全自动生化分析仪检测，各检测项目均按标准操作规程进行。

1.3 统计学方法 应用SPSS18.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差(s)表示，组间多样本均数比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)，两样本均数比较采用t检验，阳性率比较采用χ2检验，均以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组生化指标检测结果比较 SDM组血清NGAL、CysC、RBP、UREA、CREA检测结果与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)；EDN组血清NGAL、CysC及RBP检测结果与对照组比较差异有统计学意义(t=25.63、30.12、21.62，P＜0.05)，而UREA与CREA差异无统计学意义(t=2.07、3.11，P＞0.05)；CDN组血清NGAL、CysC、RBP、CREA及UREA检测结果与对照组、SDM组及EDN组比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。血清NGAL、CysC、RBP的检测结果随着尿微量白蛋白/肌酐比值(ACR)的增高而升高，见表1。

2.2 血清NGAL、CysC、RBP检测结果与尿ACR检测结果的相关性 采用Pearson相关性分析，以ACR检测结果为自变量，分别以血清NGAL、CysC、RBP检测结果为因变量。相关性分析结果显示血清NGAL、CysC、RBP与尿ACR检测结果之间存在正相关关系(r=0.65、0.62、0.58，P＜0.05)。

2.3 糖尿病患者各组血清生化指标检测结果阳性率比较 血清NGAL、CysC、RBP、UREA、CREA检测结果超出正常参考值上线表示为阳性，各项目的阳性率计算公式为：阳性率=各组内阳性例数/各组总例数×100%。EDN组血清NGAL、CysC、RBP阳性率高于SDM组，差异有统计学意义(P＜0.05)，血清UREA、CREA阳性率差异无统计学意义(P＞0.05)，见表2；CDN组血清NGAL、CysC、RBP、UREA、CREA阳性率高于EDN 组，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表 3；血清NGAL、CysC、RBP在SDM组、EDN组、CDN组联合检测的阳性率分别为25.3%、68.83%、96.67%，均高于各单项指标的检测阳性率，且随着并病情加重而增高。

表2SDM组与EDN组阳性率比较[例(%)]

表3CDN组与EDN组阳性率比较[例(%)]

3 讨论

DN是T2DM主要慢性并发症之一，近年来，随着T2DM患病率的逐年上升，由此造成DN发病率剧增[2-3]。由于DN起病隐匿、缺乏典型的临床表现，早期仅出现尿微量白蛋白增高[4]，故DN患者一旦出现蛋白尿，预示着肾病将呈进行性发展。血清UREA、CREA是肾功能损伤的传统指标，在肾损伤时可升高，但由于肾脏具有强大的代偿能力，血清UREA和CREA在肾损伤早期无明显改变。本文结果显示，对照组与单纯糖尿病(SDM)组和早期糖尿病肾病(EDN)组的血清UREA与CREA检测结果比较差异无统计学意义，而在临床期糖尿病肾病(CDN)组有所增高，说明血清UREA与CREA作为早期肾损伤的指标灵敏性较差。目前临床主要以UAER、CREA作为肾损害程度的评价以及肾衰竭的分期标准。因此，灵敏度与特异性高的生化指标用于早期肾损害的临床诊断，对于DN的早期发现和积极防治具有重要的临床意义。

CysC是胱氨酸蛋白酶抑制剂，由机体有核细胞产生，广泛存在于各种组织中，经肾小球滤过而被清除，并在近曲小管重吸收，其产生速率稳定且浓度不受年龄、性别、饮食及其他病理变化等因素影响[5]，是反映肾小球滤过率的理想指标。RBP经肾小球滤过，由肾小管全部重吸收和降解。文献报道，RBP对于早期肾功能的评价具有积极的临床价值[6]。NGAL是诊断急性肾损伤(AKI)最有效的标志物之一[7]，作为急性时相反应蛋白，当机体发生炎症反应或上皮细胞受到损伤刺激时，NGAL才被诱导并且在受损的肾小管高表达[8]，可能参与了DM发展为DN的过程。有学者发现在T2DM中，NGAL水平随着尿微量白蛋白的水平增加而增加，这种变化出现在T2DM肾病的早期[9]，提示在T2DM中NGAL可作为DN早期肾损伤诊断依据。

本文结果显示，血清NGAL、CysC、RBP检测结果在EDN组明显升高，并且EDN组患者血清NGAL、CysC、RBP阳性率明显高于SDM组。在SDM组、EDN组、CDN组血清NGAL、CysC、RBP联合检测的阳性率分别为25.3%，68.83%，96.67%，均高于各单项指标检测阳性率，且血清NGAL、CysC、RBP与尿微量白蛋白/尿肌酐比值(ACR)为正相关，证明血清NGAL、CysC、RBP检测结果的升高与EDN的发生、发展密切相关。

文献报道，30%～50%的T2DM患者会发生DN[10]，联合检测血清NGAL、CysC、RBP既能反映肾小球病变，又能反映肾小管病变，对DN的早期诊断具有重要的临床意义。

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Value of combined detection of serum neutrophil gelatinase associated lipid delivery protein,Cystatin C and

retinol binding protein in the early diagnosis of diabetic renal injury.ZHU Wen-fang1,SHEN Jian-jun2,HAN Shuang1,FU Tao1,ZOU Ai-min1.1.Department of Clinical Laboratory,Chang,an Hospital,Xi'an 710016,Shaanxi,CHINA;2.Department of Clinical Laboratory,Tangdu Hospital of the Fourth Military Medical University,Xi'an 710000,Shaanxi,CHINA

Objective To investigate the clinical significance of combined detection of serum neutrophil gelatinase associated lipid delivery protein(NGAL),Cystatin C(Cys-C)and retinol binding protein(RBP)in the early diagnosis of renal function impairment in type 2 diabetes mellitus(T2DM).Methods From November 2015 to October 2016,220 patients with T2DM who admitted to Department of Endocrinology of Chang,an Hospital were selected as the observation group.According to urinary albumin creatinine ratio(ACR),these patients were divided into diabetes mellitus(SDM)group(n=83),early diabetic nephropathy(EDN)group(n=77),and clinical stage of diabetic nephropathy(CDN)group(n=60),and 80 healthy persons were chosen as the control group.Serum Cys-C,RBP and NGAL were detected by latex immunoassay,and serum urea(UREA)was detected by urease glutamate dehydrogenase method.Serum creatinine(CREA)was detected by enzyme method,and the results of each group were compared and analyzed.Results There was no significant difference between the SDM Group and the control group in serum NGAL,CysC,RBP,UREA and CREA detection results(P＞0.05);there was significant difference between the EDN Group the control group in serum NGAL,CysC and RBP detection results(P＜0.05),while there was no significant difference in UREA and CREA(P＞0.05);there were significant differences in serum NGAL,CysC,RBP,CREA and UREA results in the CDN group versus those in the control group,SDM group and EDN group(P＜0.05).Serum NGAL,CysC and RBP positive rates in the EDN group were 55.84%,59.74%,54.55%,respectively,which were significantly higher than corresponding 19.28%,16.87%,15.66%in the SDM group(P＜0.05),while there was no significant difference in the positive rates of serum UREA and CREA(P＞0.05);serum NGAL,CysC,RBP,UREA,CREA in the CDN group were significantly higher than those in the EDN group and SDM group(P＜0.05);the combined detection positive rate of serum NGAL,CysC,RBP in the SDM group,EDN group,CDN group were 25.30%,68.83%,96.67%,respectively,which were significant higher than those of the single detection results.Pearson correlation analysis showed that there was a positive correlation be-tween the serum levels of NGAL,CysC,RBP and urinary ACR test results(P＜0.05).Conclusion Serum NGAL,Cys-C and RBP can be used as the type 2 diabetic kidney important indexes in early diagnosis of injury.Combined detection of these indexes can improve the positive rate of early diagnosis of diabetic nephropathy,and has important significance for clinical identification and early diagnosis of diabetic nephropathy.

Cystatin C(CysC);Neutrophil gelatinase-associated lipocalin(NGAL);Serum retinol binding protein(RBP);Type 2 diabetes mellitus(T2DM);Diabetic nephropathy

R587.2

A

1003—6350（2017）19—3169—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.19.024

2017-03-28)