两个大环柄菇属野生菌的鉴定与生境观测

顾新伟 赵玉莲 刘 昆 宋小亚 吴邦仁

（1丽水市农作物站，浙江丽水323000；2丽水市莲都区联城农业技术服务站，浙江丽水323000；3丽水市农业科学研究院，浙江丽水323000）

通常认为，大环柄菇属多为可食用大型真菌，其中不乏具有独特风味和保健功能的珍贵食用菌[1，2]。大环柄菇属真菌子实体大型，菌盖常有粗大鳞片，菌柄具可活动的菌环，大环柄菇属共同的宏观特征常使基层食用菌专业人员误认。根据相关报道，我国该属物种共6个，其中，脱皮大环柄菇（Macrolepiota detersa）和裂皮大环柄菇（M.excoriata）是我国于2010年认定的2个新种[1-3]。根据国内文献数据库检索结果，大环柄菇分离应用研究多集中于高大环柄菇（M.procera）。浙江省域报道的大环柄菇属种群仍停留于20世纪80年代的高大环柄菇与粗鳞大环柄菇（M.rachodes）2个种，而按照最新的真菌分类与系统学研究成果，粗鳞大环柄菇现归青褶伞属（Chlorophyllum rachodes），我国通常仍归环柄菇属（Lepiota rachodes）。因此，高大环柄菇为浙江唯一记录的大环柄菇属物种[4]。

鉴于大环柄菇在不同生境中有较大的形态差异，各种间宏观形态又具有一定相似性，笔者对采集到的2个大环柄菇属子实体标本，在进行形态学鉴定的同时开展rDNA-ITS分析。通过形态特征与核酸序列比对结果相互验证，确定两个标本并非浙江省原记录的高大环柄菇。

1 材料与方法

1.1 生境观测分别在浙江丽水市莲都区联城街道办事处对面林地，采集标本编号M1，在丽水市白云山森林公园右南坡林地，采集标本编号M2，观察两个大环柄菇发生点土壤、肥力、地表植被等主要生境。调取两个发生点附近气象观测站相关数据，分析标本发生条件因子，为分离驯化提供参考。

1.2 子实体形态特征鉴定对采集的标本重点观察记录菌盖形态、大小、表面及边缘特征，鳞片形态、颜色，菌肉质地与颜色，菌褶颜色、形态以及与菌柄的关系，菌柄长度与直径、表面特征及内部结构、质地、基部形态，菌环着生位置、形态、质地和表面特征等宏观特征。将观察结果与最新发表的参考文献进行形态学检索比对[1-3]。

1.3 rDNA-ITS分析将形态存在显著差异的二个标本的ITS扩增产物由生工生物工程（上海）股份有限公司进行测序，测得的序列与GenBank核酸序列数据库进行比对，通过BLASTn检索具有最大相似性的物种。

2 结果与分析

2.1 发生地主要生境两个标本均于9月27日发现（采集），附近气象监测站提供的数据显示，两个站点的采集前后一周降水及温湿度数据非常接近。其中白云山庄站采集前一周为阴雨天气，最大日降雨量23.5 mm，七天总降雨量67.6 mm。出菇前后温湿度情况见图1、2。

图1 出菇期最高、平均、最低温度

图2 出菇期平均、最低相对湿度

M1标本采集于村庄附近古香樟树下，野生子实体1个。距东北侧4 m为村庄道路，距西南20 m为溪滩开垦的果园和菜地，120 m外是瓯江小支流。香樟树下无其它木本植物，郁闭度约75%，地上混生以禾本科为主的多种一年生杂草，杂草与子实体高度基本相当，地表有上年的枯草和香樟枯枝落叶构成的有机质，较肥厚。土壤为沙壤土，土地湿润。该种当地常见，采集当天还发现另外两处，共3个，均呈单生状，生境相似。

M2标本发生森林公园一护林点进出路口旁，周边马尾松、泡桐和小叶栎组成的混交林，高大茂密，郁闭度约65%。地上长一种一年生阔叶植物，高约1 m（后被护林员砍除），地表因经常清扫，枯枝落叶较少，土壤为混杂砂石的粘土。子实体生长区域面积约3.5 m2，共生23个，呈散生至群生状。

2.2 主要形态特征M1发现时已呈完全开伞状。菌盖直径11 cm，扁半球形，中间无凸起，边缘有白色至污白色内菌膜残余，表面被由表皮皲裂成的片状或块状鳞片；鳞片褐色至棕褐色，边缘少，有脱落，近中间渐密，中间呈龟裂状连成整片；裸露的表面菌肉会形成平伏的纤毛状鳞片，呈淡黄白色至灰白色。菌肉白色，肉质，较厚。菌褶白色，宽，不等长，离生。菌柄长21 cm，直径0.7～0.9（1.1）cm，上细下渐粗，淡棕红色，表面具密集的粉粒状棕褐色鳞片，纤维质，中间松软，拔取时基部残缺。菌环上位生，中间部分较厚，近肉质，灰褐色；边缘部分膜质，薄，脆，向上呈杯状，部分残缺。

M2发现时尚未开伞。菌盖初时呈球形至椭圆形，直径3～5.5 cm，幼嫩时表皮呈棕褐色，后逐步皲裂；开伞前中部及以下被由表皮皲裂成的大片棕褐色壳状鳞片，有少量脱落，刚开伞时呈半球形，直径5～9 cm，边缘及底部鳞片脱落；开伞后平展，直径13～19.5 cm，中间部位被龟裂状菌皮，周围具壳状鳞片；皲裂后裸露的菌肉白色，表面呈纤毛状。菌肉白色，肉质，较厚。菌褶白色，老后变淡棕色，宽，密，离生。菌柄初时长15～26 cm，至开伞时长19～31 cm，直径1.8～2.5 cm，圆柱形（上下几乎等粗），表面被棕色细鳞片；菌柄中段鳞片呈横向波浪形有序排列，易擦除；基部膨大至近球形，直径3～3.7 cm。菌环上位生，中间部分较厚，近肉质，上面白色，下面呈灰褐色与白色相间的环状，向上呈杯状；边缘部分膜质，薄，白色，向下呈裙状，易碎（图3）。

图3 子实体形态

2.3 rDNA-ITS分析结果子实体基因组DNA的ITS区域PCR扩增产物，经测序及修正分析后，标本M1得到一条688 bp的有效碱基序列，序列经核酸序列数据库进行比对，其与GenBank上传的“GQ254066.1”标本碱基吻合度99%，具99%相似性，同源性最高，该对照标本种名（Macrolepiota sp.）尚未确认；标本M2得到一条686 bp的有效碱基序列，序列经核酸序列数据库进行比对，其与GenBank上传的“KJ524560.1”标本碱基吻合度99%，相似性96%，同源性最高，该对照标本确认种名为Macrolepiota detersa（图4）。

图4 标本M1（左）与M2（右）子实体ITS区域碱基序列

3 讨论

在浙江省M1被广泛称为高大环柄菇，但其形态与最新发布的描述有很大的差异[1]，本次核酸序列比对也表明其与高大环柄菇的相似性仅92%，证明其同源性只能停留在属的层面。核酸序列数据库中，大环柄菇属的许多上传碱基序列没有确认到种，要确认尚需结合形态学鉴别[5]。根据宏观形态观测，该标本最近似于具托大环柄菇（M.velosa）[1]。由于工作失误，没有取得该种形态鉴别关键部位——菌托，因而需重新采集完整标本进行最终确认。

大环柄菇子实体大型，菌盖容易破损或与菌柄分离，影响到许多已驯化大环柄菇的商品性开发[6]。脱皮大环柄菇从菌柄基本伸长到菌盖开伞有3～5 d时间，在这段时间采收，既能保证子实体单株产量的表达，又使其质量和商品性得到保障。同时，根据野生状态生境分析，脱皮大环柄菇属于高温型菌株，在我国大部分地区可在春夏和夏秋季栽培，生产时段长。因此，该菌株可能具有较大的驯化栽培前景。