2016年安徽铜陵市人民医院细菌耐药性监测

潘 恺， 胡志军， 潘晓龙， 宋元明， 吴道伟

2016年安徽铜陵市人民医院细菌耐药性监测

潘 恺， 胡志军， 潘晓龙， 宋元明， 吴道伟

目的了解2016年安徽省铜陵市人民医院临床所有分离细菌的分布情况及耐药性变迁。方法收集2016年所有临床分离细菌并作药敏试验，结果统一输入WHONET5.6软件统计分析。结果2016年共收集细菌2 949株，其中革兰阴性菌2 134株（72.4%），革兰阳性菌815株（27.6%）。革兰阴性菌数量居前5位是大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和肠杆菌属细菌；革兰阳性菌数量居前5位是凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌和链球菌属。产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别占各自菌数量的42.3%和31.1%，耐碳青霉烯类大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率为1.2%（8/640）和29.4%（108/367），鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感率为94.3%，对亚胺培南和美罗培南的耐药率为74.3%和74.9%，铜绿假单胞菌对哌拉西林的敏感率为78.2%，对碳青霉烯类抗生素的敏感率在70%左右；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离率32.0%（74/231），耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌分离率65.6%（170/259），没有发现对替考拉宁和万古霉素耐药的葡萄球菌属；未检出替考拉宁和利奈唑胺耐药的肠球菌属细菌（粪肠球菌和屎肠球菌）。结论该院各类细菌分离数量呈逐年上升趋势，多重耐药菌的分离率逐年增长，泛耐药肠杆菌科细菌及鲍曼不动杆菌分离率的逐年增长趋势十分严峻，迫切需要继续加强医院感染管理工作。

细菌耐药性； 多重耐药菌； 广泛耐药菌； 碳青霉烯酶

Abstract: ObjectiveTo investigate the bacterial distribution and antibiotic resistance pro fi le in Tongling People's Hospital during 2016.MethodsAll the clinically isolated bacterial strains in Tongling People's Hospital during 2016 were identi fi ed and tested for their susceptibility to antimicrobial agents. The results were analyzed with WHONET 5.6 software.ResultsA total of 2 949 strains of bacteria were collected, including 2 134 strains of gram-negative bacteria and 815 strains of gram-positive bacteria. The top fi ve gram-negative bacteria wereE. coli,A. baumannii,K. pneumoniae,P. aeruginosaandEnterobacter. The top fi ve grampositive bacteria were coagulase-negativeStaphylococcus,S. aureus,E. faecalis,E. faeciumandStreptococcus. The prevalence of ESBLs-producing strains was 42.3% inE. coliand 31.1% inK. pneumoniae. The prevalence of carbapenem-resistant strains was 1.2% (8/640) inE. coliisolates and 29.4% (108/367) inK. pneumoniaeisolates. Majority (94.3%) ofA. baumanniistrains were susceptible to tigecycline. However, 74.3% and 74.9% of these strains were resistant to imipenem and meropenem, respectively.MostP. aeruginosastrains (78.2%) were resistant to piperacillin, but about 70% were susceptible to carbapenem antibiotics.The prevalence of methicillin-resistant strains was 32.0% (74/231) inS. aureusand 65.6% (170/259) in coagulase-negativeStaphylococcus. No staphylococcal strains were found resistant to teicoplanin or vancomycin. No enterococcal isolates were resistant to teicoplanin or linezolid.ConclusionsThe number of bacterial isolates in this hospital is increasing year by year. The prevalence of multidrug-resistant bacteria is also on rise, especially the pandrug-resistantEnterobacteriaceaeandA. baumannii.It is urgently required to strengthen the control of hospital infections.

Key words:bacterial resistance; multi-drug resistant bacteria; extensively-drug resistant bacterium;carbapenemase

近年来，抗菌药物规范化使用已经越来越引起临床医师和医院感染管理部门的重视。细菌对抗菌药物耐药性的逐年增长也给临床诊治工作带来了极大的挑战。为了解铜陵市人民医院2016年的细菌分布、耐药性变迁情况并对本地区临床分离细菌进行实时监测，指导临床用药，我们回顾分析了2016年1－12月所有临床分离细菌相关数据，结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1菌株来源 所有细菌均分离于2016年1月1日－12月31日临床送检各类标本，常规培养后采用全自动细菌鉴定仪鉴定到种，剔除同一患者相同部位重复分离的菌株。

1.1.2培养基 药物敏感试验使用MH培养基，采用英国OXOID公司产品，各类链球菌采用含5%脱纤维羊血MH琼脂进行药敏试验，血液培养瓶采用BD需氧微生物培养瓶。

1.1.3药敏纸片 采用英国OXOID公司产品，试验药敏纸片采用法国生物梅里埃公司产品。

1.1.4细菌鉴定 采用VITEK 2-Compact 3.0细菌鉴定仪，为法国生物梅里埃公司产品。

1.2 方法

1.2.1细菌培养 严格按照《全国临床检验操作规程》第4版[1]进行，药物敏感试验采用纸片扩散法，参照2015年 CLSI推荐的药敏试验方法[2]；用头孢西丁药敏纸片检测是否为耐甲氧西林葡萄球菌；用E试验方法检测葡萄球菌是否耐万古霉素。

1.2.2质量控制 大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853和金黄色葡萄球菌ATCC25923为质控菌株。

1.2.3统计分析 所有数据统一输入WHONET5.6软件进行分析。

2 结果

2.1 细菌分布

2016年中，从临床各类培养标本中共分离细菌2 949株，革兰阴性菌2 134株，占72.4%，革兰阳性菌815株，占27.6%；革兰阴性菌数量居前5位的是大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和肠杆菌属细菌；革兰阳性菌前5位的是凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌及链球菌属细菌。细菌分布情况见表1。

表1 2016年临床分离细菌分布Table 1 Distribution of bacterial isolates in 2016

2.2 标本来源

2949份标本分别来源于痰液969例（32.9%），中段尿748例（25.4%），创面分泌物459（15.6%），全血样本306例（10.4%），脓液178例（6.0%），胆汁93例（3.2%），胸腹水82例（2.8%），引流液37例（1.3%），粪便21例（0.7%），导管8例（0.3%）以及其他标本48例（1.6%）。

2.3 科室 分布

所有分离的细菌来源于重症医学科373株（12.6%），神经外科281株（9.5%），泌尿外科277株（9.4%），急诊内外科186株（6.3%），肾脏内科162株（5.5%），呼吸内科154株（5.2%），骨科142株（4.8%），肝胆胰脾外科142株（4.8%），肿瘤科131株（4.4%），老年医学科119株（4.0%），感染内科101株（3.4%），胃肠外科99株（3.4%），内分泌科96株（3.3%），甲乳血管外科80株（2.7%），干部保健病区77株（2.6%），显微外科74株（2.5%），烧伤科71株（2.4%），心胸外科69株（2.3%），血液内科64株（2.2%），神经内科62株（2.1%），心血管内科50株（1.7%），消化内科46株（1.6%），中医风湿科42株（1.4%）以及其他科室51株（1.7%）。

2.4 主要革兰阳性菌对抗菌药物的耐药率和敏感率

2.4.1葡萄球菌属 利奈唑胺、替考拉宁和万古霉素对分离的葡萄球菌具有良好的抗菌活性，MRSA分离率为32.0%，利福平对MRSA具有良好的抗菌效果，MRSA对其敏感率为87.1%；除青霉素、氨苄西林、红霉素、克林霉素、四环素外，MSSA对其他抗菌药物的敏感率在80%以上；耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）分离率为65.6%， MRCNS对利福平和庆大霉素的敏感性最好，敏感率分别为86.9%和70.2%，其他抗菌药物敏感性差；MSCNS对临床常规抗菌药物的敏感率较好，但对青霉素和氨苄西林的敏感率仅在20%左右，对红霉素的敏感率在50%以下，对甲氨苄啶-磺胺甲唑敏感率不足40%，见表2。

表2 葡萄球菌属细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 2 Susceptibility ofStaphylococcusstrains to antimicrobial agents in 2016（%）

2.4.2肠球菌属 粪肠球菌占58.6%（130/222），屎肠球菌占37.8%（84/222）；除红霉素和四环素外，粪肠球菌对临床常用抗菌药物保持良好的敏感性，屎肠球菌对红霉素敏感率低，对磷霉素、氯霉素和四环素有较高的敏感率，屎肠球菌对高浓度庆大霉素敏感率为51.4%；检出1株万古霉素中介的粪肠球菌，MIC值为16 mg/L，未发现对利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁耐药的粪肠球菌和屎肠球菌，见表3。

2.4.3链球菌属 65株链球菌属中分离自无菌体液部位的草绿色链球菌36株（55.4%），β溶血链球菌21株（32.3%），其中A、B、C、G群分别为8、9、3、1株，肺炎链球菌8株，占12.3%。草绿色链球菌对青霉素敏感率为83.3%，对左氧氟沙星、克林霉素敏感率保持在75%左右，对四环素敏感率85.7%，对红霉素的敏感率为52.6%；β溶血链球菌和肺炎链球菌对青霉素100%敏感，对左氧氟沙星的敏感率为95.5%，对红霉素敏感率仅20%；未发现万古霉素或替考拉宁耐药的链球菌。

2.5 主要革兰阴性菌对抗菌药物的敏感率和耐药率

2.5.1肠杆菌科 几乎所有肠杆菌科细菌（99.9%）对替加环素保持敏感，本年度发现3株对替加环素中介[3]的肺炎克雷伯菌；阿米卡星和碳青霉烯类抗生素对肠杆菌科细菌抗菌活性较好，除肺炎克雷伯菌外，肠杆菌科细菌对阿米卡星和碳青霉烯类抗生素的敏感率均保持在85%以上，其中大肠埃希菌的敏感率在97.0%以上；肺炎克雷伯菌、肠杆菌属细菌对头孢哌酮-舒巴坦的敏感率分别为63.2%和58.2%，对哌拉西林-他唑巴坦的敏感率为63.5%和63.3%，肠杆菌科细菌对氨苄西林的耐药率为95.2%。见表4。

表3 肠球菌属细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 3 Susceptibility ofEnterococcusstrains to antimicrobial agents in 2016（%）

表4 肠杆菌科细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 4 Susceptibility ofEnterobacteriaceaestrains to antimicrobial agents in 2016（%）

2.5.2肠杆菌科细菌中产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 产ESBL大肠埃希菌对哌拉西林-他唑巴坦、碳青霉烯类、阿米卡星敏感性较好，对其他药物敏感性差；除替加环素外，产ESBL肺炎克雷伯菌对临床常规抗菌药物敏感率均不高，对碳青霉烯类和阿米卡星的敏感率已不到60%。见表5。

2.5.3肠杆菌科细菌中耐碳青霉烯类菌株 本年度共发现耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌108株，肠杆菌属细菌11株，大肠埃希菌8株。重症医学科和神经外科分离的肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药率显著高于其他临床科室。见表6。

表5 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产和非产ESBL菌株对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 5 Susceptibility of ESBLs producers and non-ESBLs producers to antimicrobial agents in 2016（%）

表6 不同科室肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 6 Susceptibility ofK. pneumoniaeisolates to antimicrobial agents in different departments（%）

表6 （续）Table 6（continued）（%）

2.5.4不发酵糖革兰阴性杆菌 本年度临床分离的鲍曼不动杆菌对常规抗菌药物的敏感性差，除替加环素和米诺环素外，敏感率均低于30%；铜绿假单胞菌对第三代头孢菌素和替卡西林-克拉维酸的敏感性差，对临床常规抗菌药物保持较高的敏感率；嗜麦芽窄食单胞菌对左氧氟沙星和米诺环素的敏感率分别为94.4%和94.7%，见表7。重症医学科与神经外科分离的鲍曼不动杆菌耐药率明显高于其他临床科室。见表8。

表7 不发酵糖革兰阴性菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 7 Susceptibility of non-fermentative gram-negative bacilli to antimicrobial agents in 2016（%）

表7 （续）Table 7（continued）（%）

表8 不同科室鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 8 Susceptibility ofA. baumanniito antimicrobial agents in different departments（%）

3 讨论

2016年临床共分离细菌2 949株，较2015年数量（2 797株）增加了152株，增加5.43%。重症医学科、神经外科和泌尿外科为分离细菌的主要来源科室，标本主要来源前3位的是痰液、尿液和创面分泌物。与2015 CHINET[4]统计结果不同的是，血液样本仅占第4位（2015CHINET血液标本占第3位），这主要与我院目前尚未完全实行双侧双套血培养标准，导致血液标本送检量和分离细菌阳性率均较低有关；鲍曼不动杆菌的分离率（12.9%）超过肺炎克雷伯菌（12.4%），成为我院细菌分离率第2位的细菌，这与我院ICU以及神经外科ICU的鲍曼不动杆菌为主要流行菌有重要联系[5-6]，且泛耐药鲍曼不动杆菌已有向医院其他科室扩散的可能性。革兰阳性菌中，凝固酶阴性葡萄球菌的分离率明显上升，已经达到细菌总数量的8.9%（261/2 949），超过金黄色葡萄球菌，位列第1位，这与CHINET 2015统计结果不同，其他细菌分离的比例和数量与2015年相比没有太大变化。

革兰阳性菌占27.6%（815株），较2015年增加了45株，检出MRSA 74株（32.0%）、MRCNS 172株（65.9%），高于CHINET 2015年平均统计水平，MRSA对庆大霉素、左氧氟沙星和利福平的敏感率有所提高（24.1%到42.3%，21.1%到38.4%，44.4%到87.1%），对克林霉素、红霉素和四环素敏感率下降，并以四环素敏感率下降最为显著（73.3%到44.3%）；与2015年本院统计数据相比，MRCNS对左氧氟沙星、克林霉素和红霉素的敏感率有所下降（31.2%到30.8%、53.2%到43.6%和21.2%到16.1%），对甲氧苄啶-磺胺甲唑的敏感率下降较为明显（48.0%到18.3%），未发现对替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。粪肠球菌分离数量较多，粪肠球菌对利福平、红霉素和四环素的敏感性差，其中对利福平、红霉素的敏感率不足20%，对利福平的敏感率从31.0%下降到19.8%；屎肠球菌对红霉素和利福平的敏感性有所好转，对其他临床常用抗菌药物敏感率较高，均保持在75%以上，发现1株对万古霉素、利奈唑胺中介的粪肠球菌；除替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺外，屎肠球菌对磷霉素和氯霉素的敏感率保持在80%左右，对左氧氟沙星的敏感率继续下降，已不足10%，对高浓度庆大霉素的敏感率为51.4%，高于CHINET 2015平均水平，本年度依然未发现对万古霉素耐药的屎肠球菌或粪肠球菌。

本组分离的革兰阴性菌占72.4%，较2015年本院统计数据有所上升（71.7%），大肠埃希菌依然是临床分离最多的细菌，其在分离的革兰阴性菌中所占比例有所上升，从2015年的22.3%到2016年的30.0%；ESBL阳性大肠埃希菌42.3%（271/640），与2015年相当（42.7%）。共发现8株耐碳青霉烯类抗生素的大肠埃希菌，有3株来源于泌尿外科患者的中段尿，2株胃肠外科患者的中段尿和痰液，其余3株分别来自于肝胆胰脾外科患者的胆汁、神经外科患者中段尿和急诊科患者脓液。较2015年，耐碳青霉烯类大肠埃希菌的比例没有上升，但仍需引起临床相关科室的重视并实时监测。鲍曼不动杆菌的分离率超过肺炎克雷伯菌，成为我院分离率第2位的细菌，其中118株来自于重症医学科，101株来源于神经外科，我院神经外科拥有独立的监护病房，这2个科室大多为长期卧床免疫力低下的昏迷患者，呼吸机的大量使用以及侵袭性医疗操作等均是造成该细菌在这2个科室大量流行的主要原因[6-8]，通过比较这2个科室与其他科室鲍曼不动杆菌的药敏试验发现，ICU和神经外科分离该菌的耐药率明显高于其他临床科室，除替加环素外，对其他抗菌药物均表现出极强的耐药性，而其他科室分离的鲍曼不动杆菌对含有酶抑制剂碳青霉烯类抗生素依然有40%以上的敏感率，对阿米卡星敏感率为53.8%。共分离到肺炎克雷伯菌367株，产ESBL菌占31.1%（114/367），较2015年统计的47.0%有明显下降，这与CHINET统计的近10年产ESBL肺炎克雷伯菌变化趋势相同[9]，耐碳青霉烯类肺类克雷伯菌占29.4%（108/367），从我院发现耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌开始，该比例呈逐年增加状态，尤其以肺炎克雷伯菌为主，数量从2013年的81株（21.8%）到2015年114株（28.3%），再到2016年的108株（29.4%），可以看出虽然在2016年，该类细菌的分离数量有所减少，但分离率却呈现逐年增加状态，该类细菌对替加环素保持100%敏感率，对阿米卡星、左氧氟沙星和庆大霉素的敏感率分别为15.4%、12.5%和6.7%，对甲氧苄啶-磺胺甲唑有3.9%的敏感率，对青霉素类、头孢菌素类及含酶抑制剂抗菌药物全部呈现耐药。与鲍曼不动杆菌相同的是，该类细菌主要也来自于ICU（32株）、神经外科（21株）与呼吸内科（14株），且重症医学科和神经外科该菌对抗菌药物的耐药率显著高于其他临床科室，这与CHINET统计结果中的中心ICU与脑外科ICU是碳青霉烯类耐药株主要来源科室相一致，同时也提示了可能与呼吸机相关感染有重要关系，

本研究显示，泛耐药鲍曼不动杆菌的检出率为27.3%（104/381）；泛耐药肺炎克雷伯菌检出率为19.6%（72/367），分析这些细菌的科室来源我们发现，鲍曼不动杆菌主要来源于重症医学科（48株）、神经外科（17株）和呼吸内科（11株），肺炎克雷伯菌主要来源于重症医学科（20株）、呼吸内科（11株）和老年病科（10株），而其他科室少量泛耐药菌的出现，可能由于入院患者在重症医学科治疗期间受到感染，在康复过程中携带到其他普通病房所致。药敏结果显示，除替加环素外，对其他抗菌药物均显示甚高的耐药率，在治疗上，临床医师普遍采用联合用药的治疗方案[10-11]，这2类泛耐药菌与2015年数据相比，泛耐药鲍曼不动杆菌分离率从45.2%下降至27.3%，下降较为明显，证明该类菌在我院的扩散速度已经有所减缓，然而泛耐药肺炎克雷伯菌分离率从14.6%上升至19.6%，给临床工作者和医院感染管理带来了新的挑战。

综上所述，2016年我院细菌分离数量有所增长，临床分离主要革兰阳性菌对各类抗菌药物的敏感率增减不一，主要的革兰阴性菌耐药率呈增长趋势，特别是泛耐药鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌，迫切需要继续加强出入院管理和临床治疗器械的严格消毒并严密监控该类细菌耐药性变化。

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Surveillance of bacterial resistance in Tongling People's Hospital during 2016

PAN Kai, HU Zhijun, PAN Xiaolong, SONG Yuanming, WU Daowei. （Department of Laboratory Medicine,Tongling People's Hospital, Tongling Anhui 244000, China）

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 05-0584-09

10.16718/j.1009-7708.2017.05.018

2017-03-24

2017-04-21

安徽省铜陵市人民医院检验科，安徽铜陵 244000。

潘恺（1987—），男，本科，主管检验师，主要从事临床微生物检验和细菌耐药机制研究。

潘恺，E-mail：278456373@qq.com。