26%嘧菌环胺·啶酰菌胺悬浮剂高效液相色谱分析

徐 妍，刘细平，潘 静，东 琴，高敬雨，刘润峰



26%嘧菌环胺·啶酰菌胺悬浮剂高效液相色谱分析

徐 妍1，刘细平2，潘 静1，东 琴1，高敬雨1，刘润峰1

(1.北京明德立达农业科技有限公司，北京 102206；2.江西威敌生物科技有限公司，江西南昌 331700)

建立高效液相色谱法同时测定26%嘧菌环胺·啶酰菌胺悬浮剂中有效成分的分析方法。采用ZORBAX SB C18反相柱和紫外可变波长检测器，以乙腈-水为流动相(磷酸调制弱酸性液体)同时测定试样中嘧菌环胺和啶酰菌胺的含量。嘧菌环胺和啶酰菌胺标准偏差分别为0.16和0.21，变异系数分别为2.52%和1.03%，平均回收率分别为99.34%和99.51%。该方法操作简便，分离效果好，精密度与准确度高，可同时快速测定嘧菌环胺和啶酰菌胺含量。

嘧菌环胺；啶酰菌胺；高效液相色谱法；分析

嘧菌环胺(cyprodinil)化学名称为-(4-甲基-6-环丙基嘧啶-2-基)苯胺，是瑞士诺华(现先正达公司)开发的嘧啶胺类杀菌剂。其作用机理是抑制真菌水解酶分泌和蛋氨酸的生物合成，同三唑类、咪唑类、吗啉类、二羧酸亚胺类、苯基吡咯类等无交互抗性。嘧菌环胺具有保护、治疗、叶片穿透及根部内吸活性。啶酰菌胺(boscalid)化学名称2-氯--(4′-氯联苯-2-基)烟酰胺，是BASF公司开发的新型烟酰胺类杀菌剂，其作用机理是线粒体呼吸链中琥珀酸辅酶Ｑ还原酶抑制剂，与其他杀菌剂无交互抗性。药效试验证明：将二者混合制成的26%嘧菌环胺·啶酰菌胺悬浮剂，保护性能好，持效期长，尤其是对葡萄、韭菜、辣椒、草莓、花卉等多种作物的灰霉病具有优异的防效，同时对油菜、莴苣、马铃薯、辣椒、番茄、花生等作物的菌核病、早疫病、白粉病、炭疽病、叶霉病等均有很好的预防和治疗效果，应用前景广泛[1-5]。但有关嘧菌环胺•啶酰菌胺悬浮剂的高效液相色谱分析方法，目前尚未见公开报道。

该试验使用ZORBAX SB C18柱和紫外可变波长检测器，以乙腈-水(磷酸调制弱酸性液体)溶液为流动相，用外标法对有效成分进行分析和定量。该方法同时适用于嘧菌环胺(啶酰菌胺)原药及制剂的分析，具有简便、快速、准确、分离效果好的特点，适用于产品生产过程的质量控制。

1 试验部分

1.1 仪器与试剂

Agilent 1260高效液相色谱仪，具有紫外检测器和自动进样器；Agilent色谱工作站；岛津UV-1800紫外可见分光光度计；乙腈为色谱纯；水为新蒸二次蒸馏水；嘧菌环胺标样(质量分数98.0%)、啶酰菌胺标样(质量分数99.0%)，中国农业大学理学院；26%嘧菌环胺•啶酰菌胺悬浮剂试样。

1.2 色谱条件

Agilent ZORBAX SB C18不锈钢柱：150 mm´4.6 mm(i.d.)；检测波长210 nm；流动相：乙腈-水(0.05%磷酸水溶液，体积比55︰45)；流速1.0 mL/min；进样量5 μL；柱温25 ℃。嘧菌环胺的保留时间约为4.5 min，啶酰菌胺的保留时间约为7.1 min。典型液相色谱分离图见图1、2。

图1 嘧菌环胺、啶酰菌胺标样液相色谱图

图2 26%嘧菌环胺·啶酰菌胺悬浮剂液相色谱图

1.3 分析步骤

1.3.1标样溶液的配制

准确称取嘧菌环胺标样约0.006 g和啶酰菌胺标样约0.020 g(精确至0.0002 g)，置于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解，定容，摇匀后备用。

1.3.2试样溶液的配制

准确称取试样约0.1 g(精确至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容，用0.22 μm有机滤膜过滤后备用。

1.3.3 测定

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值，直至相邻2针嘧菌环胺(啶酰菌胺)的响应值相对变化小于1.2%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

1.3.4 计算

将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中的嘧菌环胺(啶酰菌胺)峰面积分别进行平均。试样中嘧菌环胺(啶酰菌胺)的质量分数(%)按下式计算：

式中：A为标样溶液中嘧菌环胺(啶酰菌胺)峰面积平均值，A为试样溶液中嘧菌环胺(啶酰菌胺)峰面积平均值，m为标样溶液中嘧菌环胺(啶酰菌胺)的质量(g)，m为试样的质量(g)，为标样中嘧菌环胺(啶酰菌胺)的质量分数(%)。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的选择

2.1.1 检测波长的选择

对嘧菌环胺和啶酰菌胺标样溶液分别进行紫外扫描，得到其相应的吸收波长与响应值的紫外吸收光谱图。当选用210 nm作为检测波长时，嘧菌环胺和啶酰菌胺均有较强吸收峰，同时杂质响应值小，流动相无吸收。因此，为兼顾两者均有较好的吸收，将检测波长选为210 nm。

2.1.2 流动相的选择

根据嘧菌环胺和啶酰菌胺的特点，分别试用不同比例的甲醇、水，乙腈、水作为流动相对试样进行分离检测，结果发现，用乙腈+水(0.05%磷酸水溶液)作为流动相较理想。当流速控制在1.0 mL/min时，有效成分能很好地分离，峰形对称，基线平稳，保留时间短。综合以上因素，最终选定乙腈+水(0.05%磷酸水溶液)作为流动相，体积比为55︰45。

2.2 线性相关性测定

配制一系列不同质量分数的嘧菌环胺(啶酰菌胺)标样溶液，按上述色谱操作条件，测定相应的响应值，并以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得到嘧菌环胺和啶酰菌胺的线性回归方程和相关系数。嘧菌环胺线性方程为=24.476 5+18.171 4，=0.999 3；啶酰菌胺线性方程为=32.017 7－33.013 2，=0.999 5。

2.3 方法精密度测定

对同一26%嘧菌环胺•啶酰菌胺悬浮剂平行测定5次，在上述色谱操作条件下进行分析。测得嘧菌环胺和啶酰菌胺的标准偏差分别为0.16和0.21，变异系数分别为2.52%和1.03%(表1)。由此可知该法精密度较高，可行。

表1 26%嘧菌环胺·啶酰菌胺悬浮剂精密度测定

2.4 方法准确度测定

采用标准品添加法，在已知含量的26%嘧菌环胺·啶酰菌胺悬浮剂中加入一定量的嘧菌环胺、啶酰菌胺的标准品，按上述色谱操作条件分析，计算回收率。测得嘧菌环胺添加回收率为98.60%~ 100.66%，平均回收率为99.34%；啶酰菌胺添加回收率为98.38%~101.05%，平均回收率为99.51%(表2)。由此可知该法准确度较高，可准确定量。

表2 26%嘧菌环胺·啶酰菌胺悬浮剂回收率测定

3 结 论

综上所述，试验建立的26%嘧菌环胺·啶酰菌胺悬浮剂中有效成分质量分数的高效液相色谱分析方法，具有较高的准确度和精密度，线性关系良好，分离效果好，并且操作简便，快速，适用于产品生产过程的质量控制。

[1] 刘长令. 世界农药大全(杀菌剂卷)[M]. 北京: 化学工业出版社, 2006: 234-235, 237－238.

[2] 顾爱国, 潘虹, 王莉. 35%啶酰菌胺·氟环唑悬浮剂的高效液相色谱分析[J]. 农药, 2015, 54(5): 343－345.

[3] 姜宜飞, 王胜翔, 陈铁春. 嘧菌环胺原药高效液相色谱分析方法研究[J]. 农药科学与管理, 2011, 32(12): 34－36.

[4] 王丽颖, 孙克, 张敏恒. 啶酰菌胺分析方法述评[J]. 农药, 2014, 53(8): 622－623.

[5] 潘冬, 杨红, 刘贤进. 葡萄中嘧菌环胺的气相色谱分析[J]. 江苏农业学报, 2009, 25(5): 1199－1200.

Analysis of Cyprodinil·Boscalid 26% SC by HPLC

XU Yan1, LIU Xiping2, PAN Jing1, DONG Qin1, GAO Jingyu1, LIU Runfeng1

(1.Beijing Mindleader Agroscience Co., Ltd, Beijing 102206, China;2. Jiangxi Vegcides Biotechnology Co., Ltd，Jiangxi Nanchang 331700, China)

The HPLCmethod for the determination of active ingredient content in cyprodinil• boscalid 26% SC was established. The simultaneous determination of cyprodinil and boscalid in the samples was conducted with ZORBAX SB C18column and UV-absobance detector, while the mixture solution of acetonitrile-water was used as the mobile phase acidified by phosphoric acid. The results showed that the standard deviations for cyprodinil and boscalid were 0.16 and 0.21, variation coefficient were 2.52% and 1.03%, and average recovery were 99.34% and 99.51%, respectively. The method has the advantages of simple, convenient, good separating effect, high precision and accuracy, which can be used for the simultaneous determination of cyprodinil and boscalid.

cyprodinil; boscalid; HPLC; analysis

10.16201/j.cnki.cn31-1827/tq.2017.02.11

TQ450.7

A

1009-6485(2017)02-0049-03

徐妍(1975—)，女，辽宁昌图人，高级工程师，博士，主要从事农药剂型加工及使用技术研究。Tel：010-56071484，E-mail：xuayn@mdldagro.com。

2016-12-21。