卵巢癌组织己糖激酶2、6磷酸果糖激酶1、丙酮酸激酶表达变化及其意义

崔英,魏顺英

(青海红十字医院，西宁810000)

卵巢癌组织己糖激酶2、6磷酸果糖激酶1、丙酮酸激酶表达变化及其意义

崔英,魏顺英

(青海红十字医院，西宁810000)

目的观察卵巢癌组织中己糖激酶2(HK-2)、6磷酸果糖激酶1(PFK1)、丙酮酸激酶(PK)表达变化，并探讨其意义。方法采用免疫组化法检测100例卵巢癌患者肿瘤组织(观察组)及癌旁组织(对照组)中的HK-2、PFK1、PK。分析卵巢癌组织中HK-2、PFK1、PK表达与卵巢癌临床病病理参数的关系。结果观察组HK-2表达阳性56例(56%)、PFK1表达阳性62例(62%)、PK表达阳性53例(53%)，对照组分别为8例(8%)、11例(11%)、10例(10%)。观察组HK-2、PFK1、PK阳性表达率高于对照组，P均<0.05。HK-2、PFK1、PK阳性表达率高于对照组，P<0.05。卵巢癌组织中HK-2、PFK1、PK阳性表达与卵巢癌临床分期、淋巴结转移及远处转移有关(P均<0.05)，与患者年龄、组织学类型、分化程度无关(P均>0.05)。HK-2、PFK1、PK表达阳性和HK-2、PFK1、PK表达阴性的卵巢癌患者2年累积复发率相比P均>0.05。结论卵巢癌组织HK-2、PFK1、PK表达上调。检测卵巢癌组织HK-2、PFK1、PK有助于判断卵巢癌患者病情。

卵巢癌；糖酵解；己糖激酶2；6磷酸果糖激酶1；丙酮酸激酶

肿瘤细胞的代谢与正常细胞不同，即使在有足够氧气的情况下依然保持着高度的糖酵解，即Warburg效应[1～4]，Warburg效应是恶性肿瘤细胞的特征性表现之一。糖酵解过程中有己糖激酶2(HK-2)、6磷酸果糖激酶1(PFK1)、丙酮酸激酶(PK)三个限速酶。文献报道，HK-2、PFK1、PK在多形性胶质细胞瘤中呈高表达，且与肿瘤的发生发展和预后密切相关[5，6]。但是尚未见有关卵巢癌组织中HK-2、PFK1、PK表达变化及其临床意义的相关研究。本研究观察了卵巢癌组织中HK-2、PFK1、PK表达变化，并分析卵巢癌组织HK-2、PFK1、PK表达与患者年龄、临床分期、组织学类型、分化程度、淋巴结转移、远处转移及复发等的关系。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择我院2011年9月～2014年9月收治的病理资料及随访资料完整的100例卵巢癌患者。患者年龄24～73(50.6±5.3)岁。手术切除的卵巢癌组织标本病理检查均证实为单一的卵巢癌。组织学类型为浆液性51例、黏液性49例。FIGO临床分期Ⅰ期18例、Ⅱ期27例、Ⅲ期38例、Ⅳ期17例。分化程度低分化22例、中分化35例、高分化43例。有淋巴结转移58例、无淋巴结转移42例。有远处转移55例、无远处转移45例。随访2年，复发54例。取其手术切除卵巢癌组织标本为观察组，癌旁正常卵巢组织(病理检查证实为正常卵巢组织)标本为对照组。

1.2 两组HK-2、PFK1、PK检测方法 采用免疫组化染色法。根据试剂盒说明书操作。两组标本切片经二甲苯脱蜡，在100%、95%、85%乙醇浸泡水化，在98℃的枸橼酸钠溶液(0.01 mol/L，pH值6.0)中浸泡15 min进行抗原修复，山羊血清封闭，一抗(1∶200)4 ℃孵育过夜，二抗(1∶500)室温孵育1 h，加入链霉亲和素-过氧化物酶，DAB显色。读片时随机选取10个视野(奥林巴斯显微镜CX31)。由同一医师进行观察。细胞膜和(或)细胞质中出现棕黄色颗粒为阳性染色。阳性细胞百分率>75%为3分，25%～75%为2分，<25%为1分；染色强度浅棕黄色为1分，棕黄色为2分，深棕黄色为3分。两项得分乘积≥4为阳性表达，小于4分为阴性表达。

1.3 统计学方法 采用SPSS17.0统计软件。计量资料组间比较用χ2检验和Fisher确切概率法。P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组HK-2、PFK1、PK表达比较 观察组HK-2表达阳性56例(56%)、PFK1表达阳性62例(62%)、PK表达阳性53例(53%)，对照组分别为8例(8%)、11例(11%)、10例(10%)。观察组HK-2、PFK1、PK阳性表达率高于对照组，P均<0.05。

2.2 卵巢癌组织HK-2、PFK1、PK表达与卵巢癌临床病理参数的关系 卵巢癌组织中HK-2、PFK1、PK阳性表达与卵巢癌FIGO临床分期、淋巴结转移及远处转移有关(P均<0.05)，与患者年龄、组织学类型、分化程度无关(P>0.05)。详见表1。

表1 卵巢癌组织HK-2、PFK1、PK表达与卵巢癌临床病理参数的关系

2.3 卵巢癌组织HK-2、PFK1、PK表达与患者复发的关系 本组100例患者随访2年，复发54例，其中HK-2阳性表达的56例患者中复发29例(51.78%)，HK-2阴性表达的44例患者中复发25例(56.82%)，HK-2阳性、阴性表达患者2年累积复发率相比，P>0.05；PFK1阳性表达的62例患者中复发33例(53.22%)，PFK1阴性表达的38例患者中复发21例(55.26%)，PFK1阳性、阴性表达患者2年累积复发率相比，P>0.05；PK阳性表达的53例患者中复发28例(52.83%)，PK阴性表达的47例患者中复发21例(55.32%)，PK阳性、阴性表达患者2年累积复发率相比，P>0.05。

3 讨论

肿瘤细胞的代谢与正常细胞不同，主要依靠糖酵解获得能量。HK-2、PFK1、PK作为糖酵解过程中的关键酶，与恶性肿瘤关系最密切，在多种恶性肿瘤组织中呈高表达，并与肿瘤的发生发展密切相关。HK-2、PFK1、PK可以通过调控肿瘤细胞的糖酵解、改变肿瘤细胞能量代谢水平，进而在肿瘤细胞的增殖、转移和凋亡过程中也发挥着重要作用。如HK-2、PK在胆管癌中高表达，抑制HK-2、PK可抑制胆管癌细胞的生长和侵袭迁移能力[7]。PFK1在肝癌细胞的糖代谢和细胞凋亡中发挥重要作用，抑制PFK1可引起肝癌细胞凋亡[8]。此外，在结直肠癌、口腔癌、前列腺癌等的研究中，也有类似发现[9～12]。这提示我们HK-2、PFK1、PK有可能也是卵巢癌的治疗靶点。

本研究结果显示，卵巢癌组织中HK-2、PFK1、PK高表达，而在癌旁组织中几乎不表达，提示HK-2、PFK1、PK参与了卵巢癌的发病过程。本研究中我们还分析了HK-2、PFK1、PK阳性表达与卵巢癌患者临床病理参数的关系，发现HK-2、PFK1、PK阳性表达与患者的临床分期、淋巴结转移及远处转移有关，而与年龄、组织学类型、分化程度无关，说明HK-2、PFK1、PK在卵巢癌进展和转移中也发挥一定作用，提示我们检测卵巢癌组织HK-2、PFK1、PK表达有助于判断卵巢癌患者病情。本研究未发现卵巢癌组织HK-2、PFK1、PK表达与患者复发有相关性，这与Suh等[13]的报道不一致。Suh等[13]研究发现，HK-2、PFK1、PK高表达与卵巢癌化疗耐药、复发密切相关。造成这种差异的原因有多种可能，笔者认为研究对象不同可能是造成结果差异的重要原因。本研究的对象是中国人群，Suh等[13]的研究对象是韩国人群。HK-2、PFK1、PK表达与卵巢癌患者的化疗敏感性及复发的关系尚需后续更深入的研究。

能量代谢是肿瘤治疗的重要靶点，抑制能量代谢过程中的关键酶可明显抑制肿瘤的生长、侵袭和转移，在肿瘤治疗中发挥一定作用[14～16]。HK-2、PFK1、PK是糖酵解过程中最关键的三个限速酶。本研究结果为今后的研究指明了方向。除了HK-2、、PFK1、PK，己糖激酶1(HK-1)、己糖激酶3(HK-3)等也是重要的能量代谢酶[17,18]。本研究为其他能量代谢酶在肿瘤中的作用的研究提供了很好的研究思路。

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10.3969/j.issn.1002-266X.2017.35.013

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1002-266X(2017)35-0042-03

2017-05-22)

魏顺英(E-mail:weishunyingvip@163.com)