二代杂交捕获（HC2）技术对预测宫颈癌及癌前病变的价值

王 昱，王秀梅

（山西省太原市妇幼保健院，山西太原030012）

二代杂交捕获（HC2）技术对预测宫颈癌及癌前病变的价值

Value on HC2in the prediction of cervical cancer and precancerous lesions

王 昱，王秀梅

（山西省太原市妇幼保健院，山西太原030012）

目的：探讨二代杂交捕获技术（HC2）对于预测宫颈癌及癌前病变的价值。方法：2012年1月-2013年11月对2 482例来自我院门诊及住院患者采用HC2技术进行HPV检查，阳性者在阴道镜下行宫颈活检，做组织病理学检查。结果：2 482例患者中阳性789例（31.8%），阴性1 693例（68.2%）。阳性患者中232例进行宫颈活检。高危型HPV在慢性炎症、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ级以及宫颈病变中感染率分别为75.6%、92.2%、95.9%、100%、100%。HC2用于HPV检查，其阳性率结果与组织病理学有较高符合率，其阳性率随着宫颈病变严重程度增加呈上升趋势。结论：HC2检测具有高度的敏感性，阳性预测值高，是一种值得信赖的方法。

HC2；HPV；宫颈癌；癌前病变

世界范围研究表明，HPV可以在99.8%的宫颈癌患者中发现，HPV的感染使宫颈癌的相对危险增加250倍。在中国每年约有13万宫颈癌新发病例，占世界子宫颈癌发病总数的28.2%。宫颈癌病因明确，HPV是其致病根源。近年来其发病有年轻化的趋势，其发病以每年2%～3%的速度不断增长［1］。所以对HPV检测预测宫颈癌及癌前病变的诊断就十分重要，本院采用美国Digene公司发展的二代杂交捕获试验法（HC2），对2 482例宫颈病变患者进行检测，取得了良好效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

抽取2012年1月-2013年11月来我院妇科门诊就诊的2 482例宫颈病变患者，年龄19～65岁，平均40岁，未婚或已婚有性生活史2年以上。患者均出现以下几类病变症状：乳头样增生、宫颈糜烂、肥大、接触性出血等。

1.2 研究方法

将宫颈用窥器完全暴露，使用Digene公司提供的专用HPV采样刷，伸入宫颈口，同一方向旋转3圈并在里面停留10 s，之后将采样刷多余部分折断，妥当放置于专用的标本储存瓶内，以保留足够标本，盖上盖子，做好标记，置于2℃～8℃环境待检。高危型HPV-DNA检测试剂盒及基因杂交捕获仪均购自美国Digene公司，特异性非标记的RNA探针是检测试剂中所使用的探针，此种探针有两个类型，分别能检测低危型和高危型HPV。

1.3 统计学方法

临床所得数据均使用SPSS16.0软件进行统计分析，计数资料采用卡方检验，计量资料采用t检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 判断标准

≥1.0 pg/mL（≥5 000 copies/mL）为阳性，＜1.0 pg/mL为阴性。

2.2 HC2阳性率与病理学诊断结果对比

2 482例患者采用HC2技术进行HPV检查，结果阳性789例（31.8%），阴性1 693例（68.2%）。HC2阳性率中232例患者进行阴道镜下宫颈活检，其阳性率随着宫颈病变严重程度增加呈上升趋势，且在CIN以上病变中HC2阳性率为100%，结果见表1。

表1 232例患者HC2阳性率与病理学诊断结果对比（例）

3 讨论

宫颈癌的发生、发展受多种因素调控，宫颈局部感染HPV是高危因素之一。HPV即人乳头瘤病毒，其与宫颈CIN病变及宫颈癌关系密切。HPV是一种嗜上皮细胞，在人群中有广泛分布。1974年，德国病毒学家Zur Hausen博士提出HPV与子宫颈癌发病相关的假设。但是，HPV的研究却被这样一个事实所阻碍，即HPV病毒无法在体外培养，又无合适的实验动物，在体内也不能被诱导出易于检测的免疫反应，且在活体内的扩增效率非常低，直到建立了聚合酶链反应（PCR）方法，HPV检测的临床意义才被发现。人们对HPV感染与宫颈癌发生的关系认识日渐统一，即HPV感染是宫颈CIN及宫颈癌发生的必要因素。随着分子生物学技术的发展，不仅从宫颈病变组织中分离出了HPV DNA，并可对HPV进行分型。HPV的基因结构主要由两个开放读码框架（ORFs）构成，包含了6个早期转录单位（earlygene region，E 区）：E1、E2、E4、E5、E6、E7；2 个晚期转录单位 （1ate gene region，L 区）：L1、L2。E1、E2是病毒DNA复制和获得感染的调节蛋白，其中E2还控制着病毒基因的原始转录和复制，同时还抑制E6、E7的转录作用。E6、E7是病毒的癌基因，参与调控宿主的病毒基因表达与复制，在细胞永生化当中起重要作用。根据其与宫颈癌及癌前病变的关系，HPV 可分为高危型（high risk，HR-HPV）和低危型（low risk，LR-HPV）。HR-HPV 感染后无明确的组织病理学改变，LR-HPV感染常有特征性的组织病理学改变，即挖空样细胞（koilocytosis）形成，形态学上表现为核增大、不规则，可有双核，核周有空泡。其原因可能是E4编码的蛋白破坏了宿主细胞的中间体细丝，即核周围的蛋白质网导致镜下呈挖空样改变。宿主细胞感染HPV后，HPV DNA可呈游离形式存在，也可整合到宿主细胞中，在癌前期组织中，病毒常位于染色体之外，而在癌症进展期，病毒DNA以单拷贝或多拷贝串联方式整合于宿主细胞DNA中。除E6、E7整合到宿主DNA外，其他全部脱落，所以高级别上皮内瘤变罕见挖空样改变。HPV感染后，HPV DNA复制与正常细胞分裂成熟同步进行，未成熟细胞中呈潜伏状态存在，即未成熟细胞中病毒DNA不会复制，具体机制有待进一步研究。大部分HPV感染呈一过性［2-3］，可通过自身免疫力清除，大部分报道清除时间8～14个月不等。当HPV感染以整合状态存在于宿主细胞中，使繁殖停止在复制周期的某一时相时，可导致HPV持续感染，这种持续或反复HPV感染可使发生宫颈癌的风险明显增加。多数专家认为从发现HPV感染开始，之后24个月内感染持续存在，则认定为持续感染。目前我们认为，如感染高危HPV后，如果不能依靠自体免疫力将病毒清除，感染就会持续存在，从而引起宫颈细胞发生异常改变，就有可能继续向癌变的方向进展［4］。

目前对宫颈癌及其癌前病变临床推广认可的方法主要有TCT及HPV检查。HPV检查已成为筛查宫颈癌的重要方法之一，HC2HPV检测是被世界卫生组织认可的可用于临床的HPV检测技术，并已在世界范围内普遍应用，采用基因杂交信号扩大仪，利用对抗体捕获信号的放大和化学发光信号的检测，此法使用全长的RNA探针可以防止由于L1基因段缺失导致的假阳性。HC2可同时检测13种高危型HPV，操作简便，具有高灵敏度，阴性预测值高，用荧光计直接读检测结果，客观性及重复性均较好［5］。

综上所述，HC2检测法具有高度的重要性和敏感性，阳性预测值高，是经临床验证的敏感的、可靠的检测技术，能有效预测宫颈癌发生的风险，最大限度保护妇女健康。

［1］陈铁峰，陈志央，丁福等.521例宫颈癌及癌前病变患者HC2-HPV-DNA检测结果分析［J］.中国优生与遗传杂志，2007，15（5）：66，75.

［2］von Knebel D M.New markers for cervical dysplasia to visualise the-genomic chaos created by aberrant oncogenic papillomavirus infections［J］.Eur J Cancer，2002，38（17）：2 229-2 242.

［3］Walboomers J M，Jacobs M V，Manos M M，et al.Human papillomavirus is a necessary cause of invasive cervical cancer worldwide［J］.J Pathol，1999，189（1）：12-19.

［4］付玉梅，张晓坤，梁惠芬，等.HC2-HPV-DNA联合TCT筛查宫颈癌早期及癌前病变的临床分析［J］.实用医学杂志，2012，28（11）：1 823-1 825.

［5］李大海，玛依努尔.尼亚孜.第二代杂交捕获法检测高危型人乳头瘤病毒的临床应用价值［J］.中国医药，2011，6（增刊）：33-36.

（编辑：张世霞）

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：1671-0258（2017）03-0048-02

王昱，E-mail：wangxiumei1220@163.com