粉防己碱在减轻深Ⅱ°烧伤创面早期加深效果的初步实验研究

张友来++王晓++邓如非++赖青鸿++辛国华

摘要：目的 初步探讨粉防己碱在减轻深Ⅱ°烧伤创面早期加深中的效果。方法 選健康新西兰大白兔20只，体重（2.50±0.30）kg，采用铜梳烫伤法在其背腹部两侧进行深Ⅱ°烧伤动物造模，共4处，将4处创面随时分为4组，每组20个部位，分别对4组创面给予5、25、50 g/L的粉防己碱与面霜基质（对照）外用，换药1次/d，每日观察创面变化并拍照计算间隙正常皮肤的宽度，3 d后处死动物并取创面组织行病理组织学检查，统计Ⅲ°创面个数，并对数据进行统计、分析。结果 对照组伤后24 h间隙区可见大量瘀斑，部分区域坏死，48 h坏死面积增大，72 h进一步扩大，部分与烧伤区域融合。实验组大致无明显差异，伤后24 h间隙区可见少量瘀斑，48 h时瘀滞区局部坏死，72 h时较前局部扩大，未见与烧伤区域融合情况发生。与对照组相比，实验各组均有统计学意义（P<0.05），在实验组内，72 h时5 g/L组健康创面面积（39.67±4.29）mm2明显低于25 g/L组的（48.52±1.27）mm2（P<0.05）。而72 h加深的创面中25g/L明显低于5 g/L与对照组（P<0.05）。结论 小剂量粉防己碱一定程度上能减轻深Ⅱ°烧伤创面早期加深。

关键词：深Ⅱ°烧伤；创面加深；粉防己碱

中图分类号：R644 文献标识码：A 文章编号：1006-1959（2017）19-0056-03

Preliminary Experimental Study on the Effect of Tetrandrine on Deepening Deep Ⅱ° Burn Wounds

ZHANG You-lai，WANG Xiao，DENG Ru-fei，LAI Qing-hong，XIN Guo-hua

（Department of Burns，the First Affiliated Hospital of Nanchang University，Nanchang 330006，Jiangxi，China）

Abstract：Objective To investigate the effect of tetrandrine on the deepening of deep Ⅱ° burn wounds.Methods 20 healthy New Zealand white rabbits， weight（2.50±0.30）kg，using copper comb burn method at the back of the abdomen on both sides of deep second degree burn animal model，a total of 4，4 wounds were divided into 4 groups at any time，20 parts of each group，4 groups of wounds were given 5，25，50g/L powder of tetrandrine and cream matrix（control）external use，change dressings 1 times/d，observe the wound changes every day，and take pictures to calculate the width of the normal skin of the gap，3 d after the death of animal and wound tissues were obtained for pathological examination，the statistical number of third Ⅲ° wounds，and the data were statistically analyzed.Results In the control group，24 h after injury in the gap area shows a large number of ecchymosis，necrosis in some areas，necrotic area increased at 48 h，enlarged at 72 h，and partially fused with burn area.There was no significant difference in the experimental group，and a small amount of ecchymosis was observed at 24 h after injury.The local necrosis of the stasis area at 48 h was enlarged at 72 h，and there was no fusion with the burned area.Compared with the control group，the experimental area was statistically significant （P<0.05）.In the experimental group，the healthy wound area（39.67±4.29）mm2 in the 5 g/L group was significantly lower than that in the 25 g/L group （48.52±1.27）mm2（P<0.05）at 72 h.The 25g/L in 72 h deepened wound was significantly lower than that in 5 g/L and control group（P<0.05）.Conclusion Low dose of tetrandrine can alleviate the deepening of deep Ⅱ° burn wounds.endprint

Key words：Deep Ⅱ°burns；Wound deepened；Tetrandrine

创面修复是烧伤治疗的永恒主题[1]。烧伤深Ⅱ°创面在早期治疗过程中普遍存在进行性加深现象[2-3]，创面加深不仅使创面修复时间延长、愈合后瘢痕形成机率增加，而且也是导致严重烧伤患者死亡的重要原因之一。如何早期防止深Ⅱ°创面加深是烧伤治疗过程中必须重视、但也是目前有待进一步深入研究解决的难题[4]。本研究拟通过动物实验研究初步探讨粉防己碱在减轻深Ⅱ°烧伤创面早期加深中的效果。

1 材料与方法

1.1实验动物的选择

选健康新西兰大白兔20只，由南昌大学医学院动科部提供，雌雄不限，体重（2.50±0.30）kg。

1.2建模方法

实验动物大白兔实验前给予适应性喂养1 d，行背部脱毛等准备后采用以Regas FC和Ehrlich HP[5]发明的铜梳状烫伤法致伤，铜梳烫伤器由3个突出的梳齿组成，形成烫伤创面。梳齿间为2个凹型间隙（正常间隙10 mm×5 mm），烫伤时不接触皮肤形成的区域称为间隙区。间隙区在以往文献中用来代表瘀滞区（zone of stasis）或缺血区（zone of ischemia）。按动物体重给予40 mg/kg的1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，固定于动物实验台上，将自制的铜梳烫伤器浸没于预先烧开的沸水（测水温为100 ℃）中，均匀加热5 min，沾干。先后置于大鼠背部中线两侧旁开0.5 cm处皮肤，不施加任何压力，按计划保持其与皮肤相应的接触时间（15 s）。由此背部两侧各制得4个烫伤创面和它们之间8个未烫伤的间隙区。经病理组织学检查确定烧伤创面深度、后续鉴别创面未加深与加深均经病理组织学检查。

1.3分组、实验与观察指标

将4个创面随时分为4组，每组20个部位，分别对4组给予5、25、50 g/L的粉防己碱、面霜基质（对照）外用，换药1次/d，并观察伤后24 h、48 h与72 h创面情况大体瘀滞区面积，有无发生出血点或瘀斑等，如有，则视为坏死。数码照相机距离创面20 cm垂直拍片保存，创面旁放置钢尺作为参照，后用Image pro 5.0圖像分析软件，检测瘀滞区面积变化。伤后72 h处死大白兔并用手术刀切取创面组织行病理组织学检查，统计创面深度加深的创面个数。

1.4数据统计学分析

采用SPSS19.0统计软件包处理，计量数据以（x±s）表示，采用t检验比较两组之间的差异。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1大体与组织学观察

对照组伤后24 h间隙区可见大量瘀斑，部分区域坏死，48 h时坏死面积增大、72 h坏死范围进一步扩大，部分与烧伤区域融合。实验组大致无明显差异，伤后24 h间隙区可见少量瘀斑，48 h时瘀滞区局部坏死、72 h时较前局部扩大，未见与烧伤区域融合情况发生。组织上模型建立后皮肤表皮坏死，部分脱落，真皮胶原发生变性，皮肤附属器官大部分坏死，见图1。对照组3 d后更多呈现Ⅲ°改变，见图2。

2.2各组创面皮肤变化的对比

与对照组相比较，实验各组均有统计学意义（P<0.05），在实验组内，72 h时5 g/L组面积（39.67±4.29）mm2明显低于25 g/L组（48.52±1.27）mm2（P<0.05）。而72 h加深的创面中25 g/L明显低于5 g/L与对照组（P<0.05），见表1、2。

3讨论

防止或减轻早期的创面加深，对于提高特重度烧伤患者救治成功率有十分积极的意义，也是目前烧伤基础研究领域亟待解决的问题之一。众所周知，感染仍是当前烧伤患者死亡的主要原因，也是现阶段烧伤基础研究领域的难点与热点[6]。适度的炎症反应对控制感染、促进创面修复有重要作用，但当炎症反应过度激活时，机体免疫系统中抵御感染的炎性因子就会转而攻击机体自身的组织[7]。临床观察与研究表明[8]，感染是创面加深的重要原因，过度炎症反应会导致组织损害，而且进一步证实加深创面坏死区中性粒细胞、炎症介质浸润明显。

粉防己碱是中药防己的有效成分，目前多应用于烧伤炎症、创面愈合与瘢痕形成方面的研究[9-11]，粉防己碱外用治疗小鼠烫伤，不仅能降低血管通透性，减轻组织损伤，促进创面愈合，抑制肉芽肿生长，减少愈合后疤痕，此外可抑制烫伤皮肤中组织胺、白细胞介素1与肿瘤坏死因子的产生。基于此，笔者选用粉防己碱用于观察减轻深Ⅱ°烧伤创面早期加深效果，初步结果表明，粉防己碱能一定程度上减轻创面早期加深，但研究表现，具有剂量依赖性，我们推断，随着剂量的增加，效果可能达到一个平台期，然后随着剂量的进一步增加，效果反而下降，最适剂量有待进一步探索，这可能和高浓度的粉防己碱影响羟脯氨酸浓度、一氧化氮合酶活性等有关。早期烧伤创面加深的原因众多，机理目前仍不十分清楚，至于粉防己碱通过影响何种信号通路、或作用于哪些炎症介质起作用，目前我们还不得而知，作者初步分析认为可能与通过影响烧伤早期毛细血管的通透性，从而减少炎症介素、蛋白、水分等渗入组织间隙，减轻组织水肿、改善局部氧合等有一定的关系，具体的机理仍有待进一步的实验研究揭示。

参考文献：

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[3]李利根.防治深Ⅱ度烧伤创面早期加深的研究进展[J].中华临床医师杂志：电子版，2012，6（18）：7-9.endprint

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[5]Regas FC，Ehrlich HP.Elucidating the vascular response to burns with a new rat model[J].J Trauma，1992，32（5）：557-563.

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[9]劉德伍，李国辉，刘德明.粉防己碱对创面修复组织中一氧化氮和一氧化氮合酶的影响[J].中华烧伤杂志，2005，21（2）：135-136.

[10]Ning P，Peng Y，Liu DW，et al.Tetrandrine induces microRNA differential expression in human hypertrophic scar fibroblasts in vitro[J].Genet Mol Res，2016，15（1）：7288.

[11]张乐之，何华美，李新芳，等.粉防己碱抗炎作用的研究进展[J].解放军药学学报，2002，18（3）：172-174.

编辑/杨倩endprint