自身免疫性溶血性贫血引起ABO定型困难1例

洪俊

【中图分类号】R155.3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2017）09--01

自身免疫性溶血性贫血是由自身抗体引起的一类常见病征，多见于血液病、风湿免疫病等病种。病人红细胞由于被自身抗体致敏造成长期贫血，为了改善临床症状，该类患者长期依赖输血，但自身抗体会造成实验室交叉配血困难。近期我们实验室收到一例疑难配血标本，送检临床医院最初鉴定为A型，经我们实验室检查诊断为自身免疫性溶血性贫血，但我们在检测过程中发现患者ABO正反定型不一致，现报道如下。

一、材料与方法。

血型分型试剂单克隆抗-A、抗-B（批号：20151123）、抗-D（批号：20151815）、反定型细胞（批号：20175318）、抗体筛选细胞（批号：20177020）、抗体鉴定谱细胞（批号：20170503）均购自上海血液生物医药有限责任公司。AB型血浆由本实验室提供，酸放散试剂盒由上海血液中心血型参比室提供。血型定型、抗体筛选、抗体鉴定、放散试验均按文献[1]提供方法操作。

二、血型血清学检查。

1.血型鉴定：

患者ABO血型鉴定结果见表1。患者RhD血型为RhD阳性。

2.直接抗人球蛋白试验

患者红细胞直接抗人球蛋白试验结果见表2.

3.抗体筛选试验。

患者血清用抗体筛选试剂盒鉴定，结果见表3.

4.抗体鉴定。

用酸放散试剂盒制备患者红细胞放散液。患者血清、酸放散液用商品谱细胞鉴定抗体特异性，反应结果见表4。由表4可知该患者血清中有不规则抗体，但抗体特异性不明确，结合红细胞放散液的特异性可知患者红细胞被自身抗体所致敏。

1+w 2+ /

5. 经热放散处理的患者红细胞正定型

患者红细胞经56℃5分钟热放散处理后再次鉴定ABO正定型，结果见表5.

三、讨论

自身免疫性溶血性贫血（AIHA）可分为四种主要类型：温自身免疫性溶血性贫血（WAIHA）、冷凝集素綜合征（CAS）、混合型自身免疫性溶血性贫血（mixed-typed AIHA）和阵发性寒冷性血红蛋白尿（PCH）。某些患者溶血性贫血的临床证据是存在的，但是DAT为阴性，通常在血清和放散液中不能测得自身抗体，可能有几种原因导致DAT是阴性。1.）当进行DAT试验用盐水洗涤细胞时，低结合亲和力的抗体可能从红细胞上分离下来；用低离子强度盐水或生理盐水37℃或4℃洗涤可帮助抗体维持在细胞上。2.）用常规方法测定，可能太少抗体分子结合在红细胞上；但可用如下方法证实，如红细胞流式仪、酶连抗球蛋白试验、固相法或直接polybrene法。

红细胞膜表面由于唾液酸的存在而使红细胞带负电荷，红细胞带有负电荷可避免其发生自发聚集，使红细胞保持最大的表面积，增加氧的转移能力和气体扩散。红细胞悬浮在电解质溶液内，阳离子被红细胞的负电荷所吸引，红细胞被扩散的双层离子云所围绕。离子云如同红细胞的一部分随着红细胞移动，离子云的外沿称为修剪表面或滑面。红细胞的有效电荷称为Zeta电位，是由这个面决定的，它使红细胞之间保持静电排斥。由于静电使红细胞间保持一定距离，IgG分子的跨距太短，不能给两个细胞搭起桥来。胶体介质能提高介电常数，从而降低Zeta电位，使已致敏的红细胞靠拢而现凝集。

该患者直抗阳性，显示患者红细胞被IgG类抗体、C3d补体成分致敏。患者血清中抗体特异性不明确，可能是自身抗体或、和同种抗体 。患者红细胞酸放散液无特异性，显示患者红细胞被IgG类自身抗体致敏。正是由于该IgG类自身抗体的致敏，使患者红细胞与抗-B标准血清发生了正常不应有的弱凝集；而患者红细胞的盐水对照不凝集，与无抗体特异性的AB型血浆发生凝集，进一步验证了Zeta电位理论，即抗-B标准血清作为一种蛋白介质提高了介质的介电常数，从而降低了Zeta电位，导致了IgG类自身抗体致敏的红细胞发生凝集。患者红细胞经56℃5分钟热放散后，与抗-B标准血清不再发生凝集。

参考文献

丁苏鄂.常用血清学检查技术[M]//刘达庄.免疫血液学.上海：上海科学技术出版社，2002，194-234.endprint