圈养灵长类动物寄生虫病的诊治及效果评价

何相宝 郝春晓 李若楠 张海军 关春宇

(1.哈尔滨北方森林动物园，哈尔滨，150322；2.东北林业大学野生动物资源学院，哈尔滨，150040；3.鄂尔多斯市家畜改良工作站，鄂尔多斯，017000)

圈养灵长类动物寄生虫病的诊治及效果评价

何相宝1郝春晓2李若楠1张海军3关春宇1

(1.哈尔滨北方森林动物园，哈尔滨，150322；2.东北林业大学野生动物资源学院，哈尔滨，150040；3.鄂尔多斯市家畜改良工作站，鄂尔多斯，017000)

稿件运行过程

圈养灵长类动物； 球虫； 毛尾线虫； 蠕形住肠线虫； 治疗效果

长期以来，人们对非人灵长类身上所携带能引起疾病的病毒和细菌给予了足够重视和研究，然而常见且同样具有高强度传染性以及危害性的肠道寄生虫却往往被人们忽略[1]。目前为止，非人灵长类肠道寄生虫的研究报道较少[2]，已有研究证明非人灵长类肠道寄生虫可引发反复腹泻、腹痛、肺炎、致盲等症状。作为人类近亲的非人灵长类动物，最易传染给人类某些疾病[3]，包括寄生虫病，对人类健康构成严重威胁，因此对灵长类寄生虫的持续关注是非常必要的。

2016年6月中旬，哈尔滨北方森林动物园圈养的川金丝猴(Rhinopithecusroxellanae)，表现出稀便较多，颜色为灰色，排泄到地面上呈片状，稀便占粪便总量的60%～80%。另外树叶的食入量也有所减少，比正常量减少30%～40%的异常症状。但其精神状态、水果和窝头等饲料的食入量则无明显异常。前期诊断怀疑其为消化系统疾病，经过一段时间治疗无好转。后诊断疑似寄生虫感染，于是采集其粪样进行寄生虫检测。同时我们还对园内饲养的黑猩猩(Pantroglodytes)、埃及狒狒(Papiohamadryas)、东非狒狒(Papioanubis)、豚尾猴(Macacanemestrina)和灰斑悬猴(Cebusnigrivittatus)共5种灵长类动物的粪便样本进行了检测。现将对上述6种动物进行粪便虫卵的检测和药物治疗的结果总结如下。

1 材料与方法

1.1粪便采集与处理

采集新鲜粪便 10～20 g，装入干净封口袋，带回实验室，当天进行检查。处理方法：用饱和食盐水漂浮法，检查是否为阳性，显微镜下观察其形态结构并拍照。灵长类动物粪便样品采集检查情况如表1。

表1动物粪便样品采集情况

Tab.1 Sample collection of animal feces

1.2 感染强度的测定

采用麦克马斯特计数法(McMaster’s method)，称取5 g粪便，与40 mL饱和盐水混合均匀。通过过滤除渣，用移液枪吸取粪汁注入麦氏计数室里，静置3～5 min，置于显微镜上，然后在镜下记录2个计数室内虫卵总数，求出2个计数室虫卵的平均数，将所得值乘以60，即每克粪便中的虫卵数。

1.3 治疗效果的评价

通过驱虫前后检测灵长类肠道寄生虫虫卵的种类、感染率和感染强度(EPG)的变化状况，对治疗效果进行评价。

2 结果

2.1 灵长类动物消化道寄生虫虫卵种类及形态特征

在粪便的检测中我们发现了毛尾线虫(Trichurissp.)、蠕形住肠线虫(Enterobiusvermicularis)和球虫(Isosporasp.)3类寄生虫。毛尾线虫虫卵60.31 μm ×23.50 μm，在埃及狒狒、东非狒狒和川金丝猴粪便中均有发现。蠕形住肠线虫虫卵64.09 μm×28.94 μm，只在黑猩猩粪便中发现。球虫虫卵20.96 μm×19.50 μm，仅在川金丝猴粪便中发现。3种虫卵的形态如图1所示。

图1 粪检阳性动物寄生虫虫卵(×400)Fig.1 The parasite eggs in feces positive animal(×400) 注：A.毛尾线虫。镜下毛首线虫(鞭虫)虫卵，可见其虫卵呈腰鼓状，黄褐色，卵壳内充满紫褐色颗粒状内容物，两端具塞，处单细胞期。B.蠕形住肠线虫。近无色透明，两侧不对称，呈柿核状，卵壳较厚，内含一幼虫。C.艾美耳球虫 Note：A.Trichuris sp.Under microscope the eggs of Trichuris sp. are visible drum shaped，tawny，with purplish-brown granular contents of eggshell，both ends with a plug，single cell.B.Enterobius vermicularis.Nearly colorless and transparent，anisopleural，persimmon nuclear shaped，egg shell israther thick，containing a larva.C.Eimeria sp.

2.2 灵长类动物肠道寄生虫首次测定的感染情况

在首次检测川金丝猴粪便时，检测到了球虫虫卵和毛尾线虫虫卵，在7份粪便中5份检测出寄生虫虫卵，其中2份同时感染2种寄生虫。在1份名为童童的粪便样品中检测出大量的毛尾线虫虫卵，其他4份都只检测出少量的虫卵，寄生虫感染率71.43%(5/7)。在首次检测埃及狒狒和东非狒狒粪便样品时，检测到毛尾线虫虫卵，东非狒狒感染极少；黑猩猩检测到蠕形住肠线虫，豚尾猴和灰斑悬猴未发现任何寄生虫感染且未表现出临床症状，因此之后不再检测豚尾猴和灰斑悬猴。所有灵长类动物总感染率66.7%(8/12)，6种灵长类动物寄生虫感染情况见表2。

2.3 灵长类动物主要寄生虫感染强度动态

川金丝猴粪便的首次检测中，7份样品中5份感染毛尾线虫，在1份名为童童的粪便样品中检测出大量的毛尾线虫虫卵，其他4份都只检测出少量的虫卵。但由于这次童童的粪便收集太少，无法进行虫卵计数，所以毛尾线虫虫卵计数只测了其他4份，虫卵的平均感染强度偏低(图2)。在驱虫期间的第二次检测中，我们发现只有童童感染毛尾线虫，其他川金丝猴均没有再检测到寄生虫。在第三次检测中，毛尾线虫感染强度明显下降，而第四次的感染强度恢复到最高值后不再发生明显的波动。埃及狒狒和东非狒狒尽管在7月5～7日进行了药物驱虫，但感染强度未发生明显波动。黑猩猩在驱虫后的第一次检测中，较驱虫前感染强度偏低，在驱虫后的第二次检测中，感染强度较快增大。

表2 哈尔滨北方森林动物园灵长类动物肠道寄生虫感染情况

Tab.2 Infection situation of parasite

注：* 本次实验的最小检出限是30，饱和盐水漂浮发现了虫卵，但麦克马斯特法计数结果为0

Note：The minimum detection limit of this experiment is 30，the eggs was found by brine floatation，but the result of McMaster’s method was 0

图2 主要寄生虫感染强度EPGFig.2 Infection intensity EPG of main parasite 注：1.图中川金丝猴、埃及狒狒和东非狒狒选择的寄生虫都是毛尾线虫，黑猩猩是蠕形住肠线虫；2.5次采样时间分别是6月17日、6月21日、6月28日、8月9日和8月23日；3.“驱虫1”指6月20～22日川金丝猴驱虫；“驱虫2”指7月5～7日埃及狒狒、东非狒狒和黑猩猩驱虫；4.为了与采样日期相对应，埃及狒狒、东非狒狒和黑猩猩的第一、二、三次虫卵检测与图中第三、四、五次相对应 Note：1.The parasites of Rhinopithecus roxellanae，Papio hamadryas and Papio anubis are all Trichuris sp.the parasites of Pan troglodytes is Enterobius vermicularis in the picture；2.The time of Five sampling were June 17，June 21，June 28，August 9，and August 23 respectively；3.“expelling parasite 1”refers to the expelling parasite of Rhinopithecus in June 20-22；“expelling parasite 2”refers to the expelling parasite of Papio hamadrys、Papio anubis and Pan troglodytes in July 5-7；4.In order to correspond to the time of sampling，the first，second，and third eggs detection of Papio hamadrys、Papio anubis and Pan troglodytes correspond to the third，fourth and fifth respectively

2.4 灵长类动物主要寄生虫治疗效果

根据实验室检测结果，我们选择了甲苯咪唑片治疗川金丝猴 、埃及狒狒和东非狒狒，盐酸左旋咪唑片治疗黑猩猩，通过药物对动物粪便EPG的影响作用来评价对动物的治疗效果。川金丝猴在驱虫前，粪便中检测到毛尾线虫和球虫。在甲苯咪唑药物治疗后，球虫消失，而毛尾线虫的感染强度由4 980个/g迅速下降到180个/g，这说明甲苯咪唑对川金丝猴毛尾线虫的驱虫治疗效果较理想，对球虫的治疗也有一定效果。埃及狒狒和东非狒狒连续3次的感染强度没有发生明显变化，我们无法判定甲苯咪唑是否对它们产生作用。经检测黑猩猩只感染了蠕形住肠线虫，驱虫后的第一次检测，感染强度较驱虫前有所下降，但近半个月后的第二次检测时，感染强度快速增大。这表明盐酸左旋咪唑对黑猩猩蠕形住肠线虫有良好的效果，很好地抑制住了蠕形住肠线虫对黑猩猩的侵害。

3 分析与讨论

在对哈尔滨北方森林动物园6种圈养灵长类动物的寄生虫检测中，我们发现，寄生虫种类单一、感染强度较小、感染率低、毛尾线虫突出等特点。6种动物，感染单种寄生虫的动物有3种，占 50.00%(3/6)；感染2种寄生虫的有1种，占 16.67%(1/6)；未查出寄生虫卵的有2种，占 33.33%(2/6)。黑猩猩只感染蠕形住肠线虫，川金丝猴感染毛尾线虫和球虫，东非狒狒和埃及狒狒感染毛尾线虫，毛尾线虫为优势种。

据国外报道[4]，不同种类的野生灵长类动物都有线虫感染，主要是鞭虫(Trichuristrichura)、蛔虫(Ascarislumbricoides)和十二指肠钩口线虫(Ancylostomaduodenale)，这与我们的调查结果有所差异。国内张迪[5]等人发现黑猩猩感染司氏伯特绦虫(Bertiellastuderi)，王芸[6]等人发现北平顶猴(Macacaleonine)感染伯特绦虫(Bertiellastuderi)，而我们都没有检测到。林慧彪[7]等发现野生滇金丝猴种群毛首线虫卵阳性率为72%。胡罕等人在灵长类动物粪样中均查出毛首线虫卵，其中川金丝猴毛首线虫卵阳性率为80.00%，EPG达(33 275±6 556.61)个/g。圈养的川金丝猴毛尾线虫的感染率很高，达到80%以上[8]，每克粪便中毛尾线虫卵达到10 000/g以上的占70%[9]。上述调查结果表明，毛首线虫是危害圈养金丝猴的主要寄生虫[10]。与他们测得的感染率、感染强度相比，我们测得川金丝猴的最高感染率仅为71.43%(5/7)，EPG最高4 980个/g，远远小于以往报道。这表明哈尔滨北方森林动物园灵长类动物的管理预防做得很好，有效地控制了寄生虫对灵长类动物的侵害。通过本次实验，我们认为圈养川金丝猴驱虫最好做到间隔1个月进行1次驱虫，这样可以使川金丝猴体内的毛尾线虫保持在最低水平，同时对灵长类动物持续阶段性地进行寄生虫检查也是十分必要的。

非人灵长类肠道寄生虫感染率受很多因素的影响[11]。最常见的影响因素就是外部环境周期性的波动，即季节性[12]。同样地，激素以及免疫机制的不同可能会影响寄生虫种类对宿主的选择。本研究中，川金丝猴童童由于个体差异，体质较弱可能是其毛尾线虫持续感染的主要因素[13]。动物园中，圈养动物生活在相对封闭潮湿的饲养环境中，这也增大了寄生虫感染率[14]。此外毛尾线虫和蠕形住肠线虫独特的生活史也是圈养动物寄生虫病流行的重要因素。毛尾线虫的发育不需要中间宿主[15]，在普通环境中需3个星期左右发育成侵袭性幼虫，幼虫在动物盲肠中很难驱净，川金丝猴对毛尾线虫又特别易感。蠕形住肠线虫雌虫会在宿主肛门和会阴部周围产卵，并在该处发育成为感染性虫卵[16]。当非人灵长类相互理毛时，虫卵易存留在皮肤或指尖，经手口传播，幼虫在其小肠内孵化，到大肠中发育为成虫[17]。在实际管理中，动物园管理人员无法使动物体表及环境中的虫卵完全去除。

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Captive nonhuman primates； Coccidium； Hairy nematodes；Enterobiusvermicularis； Treatment effeat

哈尔滨北方森林动物园川金丝猴出现稀便多和摄食树叶减少的异常症状，经初步诊断疑似寄生虫感染。随后我们在川金丝猴(Rhinopithecusroxellana)粪便中检测到大量的毛尾线虫(Trichurissp.)和少量的球虫(Isosporasp.)。通过给予川金丝猴甲苯咪唑进行药物治疗。同时，对动物园未表现出症状的其他5种灵长类动物，包括埃及狒狒(Papiohamadryas)、东非狒狒(Papioanubis)、豚尾猴(Macacanemestrina)、灰斑悬猴(Cebusnigrivittatus)和黑猩猩(Pantroglodytes)进行肠道寄生虫的检测。结果显示，在埃及狒狒和东非狒狒的粪便中检测出毛尾线虫，黑猩猩检测到蠕形住肠线虫(Enterobiusvermicularis)，豚尾猴和灰斑悬猴均未检测到寄生虫。埃及狒狒和东非狒狒给予甲苯咪唑(Mebendazole Tablets)，黑猩猩给予盐酸左旋咪唑(Levamisole Hydrochloride Tablets)进行治疗。结果表明，治疗效果良好。

Diagnosis and Treatment of Parasitosis in CaptivePrimates and Effectiveness Evaluation

He Xiangbao1Hao Chunxiao2Li Ruonan1Zhang Haijun3Guan Chunyu1

(1.Harbin Northern Forest Zoo，Harbin，150322，China；2.College of Wildlife Resources，Northeast Forestry University，Harbin，150040，China；3.Erdos Livestock Breeding Improved Workstation，Erdos，017000，China)

A golden monkey at the Northern Forest Zoo was found eating less leaves and defecated more loose feces in mid-June 2016.Preliminary diagnosis indicated parasitic infection.Fecal samples of the golden monkey were examined on 17 June 2016.We identified manyTrichurissp.and and fewIsosporasp.The veterinarian treated the Golden Monkey with Mebendazole tablets.At the same time，we conducted eggs inspection of other primates includingPapiohamadryas，Papioanubis，Macacaleonine，CebusnigrivittatusandPantroglodytes.Eggs ofTrichurissp. were found in the feces ofPapiohamadryasandP.anubis.Eggs ofEnterobiusvermiculariswere found in feces ofPantroglodytes.We did not find any parasite infection inMacacaleonineorCebusnigrivittatus.PapiohamadryasandP.anubiswere treated with Mebendazole tablets.Pantroglodyteswere given levamisole hydrochloride tablets.The treatments proved effective.

东北林业大学国家级实验教学示范中心建设专项——本科实践教学研究子项目立项

何相宝，男，41岁，硕士，高级工程师；主要从事野生动物饲养与繁殖的研究。 E-mail：he191@sina.com

2016-09-29

S858.93

A

修回日期：2016-11-24

发表日期：2017-05-10

2310-1490(2017)02-200-05